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Item Atributos microbiológicos, físicos e químicos em latossolo com diferentes estados de compactação e culturas de outono-inverno sob sistema plantio direto.(2018-02-27) Debiasi, Brenda Cristye Tonon; Nogueira, Marco Antonio; Guimarães, Maria de Fátima; Andrade, Diva de Souza; Rondina, Artur Berbel Lirio; Menoncin, Andrea Scaramal da Silva; Debiasi, HenriqueA atividade microbiana e o carbono da biomassa microbiana (CBM) podem ser indicadores sensíveis da melhoria da estrutura do solo proporcionada por espécies vegetais cultivadas na entressafra. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da compactação do solo e de diferentes espécies vegetais de outono-inverno sobre os atributos bioquímicos/microbiológicos e diversidade metabólica do solo, além de selecionar indicadores sensíveis ao estado de compactação (EC) em um LATOSSOLO Vermelho distroférrico cultivado em sistema plantio direto (SPD). O experimento foi realizado em Londrina-PR, em blocos ao acaso com três repetições, parcelas subdivididas, sendo quatro espécies vegetais nas parcelas (braquiária ruziziensis, aveia preta, milho 2° safra e trigo), e três ECs nas subparcelas: EC1- SPD escarificado; EC2- SPD e EC3- SPD compactado. Foram realizadas quatro amostragens de solo: out/2014; fev/2015; jan/2016 e fev/2017. Em cada amostragem foram determinados atributos químicos e físicos do solo. Foram obtidas amostras de solo (0-0,1 m de profundidade) para avaliação da respiração basal (RB), e quociente metabólico (qCO2), CBM (fumigação-extração), além das atividades das enzimas celulase, arilsulfatase, fosfatase ácida e glutaminase no solo. O perfil metabólico foi avaliado em microplacas Biolog Ecoplate® com 31 fontes de carbono. Os dados foram submetidos à ANOVA, médias comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05), e à análise canônica discriminante (ACD). Não houve interação significativa entre os ECs e as culturas de outono-inverno para nenhum dos atributos químicos e físicos em todas as épocas de avaliação. No entanto, os ECs influenciaram significativamente todos os atributos físicos avaliados, independentemente da época de amostragem, evidenciando que a escarificação e o tráfego da colhedora promoveram variabilidade na qualidade estrutural do solo. A RB diminuiu com o aumento do EC nas três primeiras amostragens, quando o EC1 e o EC2 apresentaram atividades 68% e 28% maiores que o EC3, respectivamente. O efeito dos ECs sobre o CBM na primeira avaliação variou com as culturas de outono-inverno. O solo do EC3 apresentou o menor valor de CBM sob as culturas de aveia preta e braquiária, EC2 e EC1 apresentaram maiores valores de CBM nas parcelas sob aveia e braquiária. As enzimas do solo foram mais sensíveis ao EC do que a cobertura de outono-inverno. A (ACD) foi mais sensível para discriminar o efeito da cobertura de outono-inverno sobre os atributos microbiológicos e bioquímicos, sendo que a enzima glutaminase foi a mais sensível. O potencial e a taxa de consumo dos substratos orgânicos foram menores no SPD escarificado comparativamente a EC2 e EC3 sob o cultivo de aveia preta ou milho. Nas parcelas sob braquiária, o EC1 apresentou maior potencial e taxa de consumo das fontes de C em relação ao EC2 e EC3, enquanto que a cinética de consumo não foi influenciada pelos ECs sob trigo. O perfil metabólico dos microrganismos foi sensível aos ECs e às culturas de outono-inverno, o que o qualifica como indicador de qualidade biológica do solo.Item Estratégias técnicas e farmacológicas para o incremento da eficiência reprodutiva em fêmeas bovinas(Universidade Estadual de Londrina, 2020-02-18) Bonato, Denis Vinicius; Seneda, Marcelo Marcondes; Morotti, Fábio; Zanin, Roberta Garbelini Gomes; Santos, Gustavo Martins Gomes dos; Cavalieri, Fábio Luiz BimResumo: O objetivo do primeiro trabalho foi avaliar o efeito das categorias nulíparas, primíparas e multíparas sobre a taxas de manifestação de estro e de prenhez de fêmeas tratadas com GnRH no momento da inseminação artificial em tempo-fixo (IATF). Foram utilizadas matrizes da raça Nelore alocadas por categoria, compreendendo 144 nulíparas, 132 primíparas e 255 multíparas. As matrizes foram submetidas a um protocolo de IATF. Para identificar a manifestação de estro, no oitavo dia do protocolo, a região sacrococcígea foi pintada e no dia da inseminação artificial, a ausência da tinta indicava o estro. As fêmeas que não manifestaram estro foram tratadas com 10μg de GnRH. A taxas de manifestação de estro e prenhez foram analisadas por um modelo de regressão logística. A taxa de manifestação de estro foi inferior (P = 0.006) na categoria das primíparas (61,36%) em comparação com as nulíparas (76,39%) e as multíparas (75,69%). As taxas de prenhez entre as categorias foram semelhantes, tanto para as que manifestaram estro (nulíparas 84,54%, primíparas 86,42% e multíparas 80,31%; P = 0.398) quanto para as que não manifestaram estro (nulíparas 41,18%, primíparas 56,86% e multíparas 58,06%; P = 0.244), inclusive a taxa de prenhez total (nulíparas 74,3%, primíparas 75% e multíparas 74,9%; P = 0.989). As primíparas apresentaram menor taxa de manifestação de estro e não houve diferença da taxa de prenhez entre as categorias. No segundo trabalho para compreender melhor a relação da contagem de folículos antrais (CFA) e o desempenho reprodutivo, foram realizados dois experimentos. No primeiro, o objetivo foi avaliar a repetibilidade da CFA nos dias do protocolo de indução de ovulação, enquanto no segundo foi comparar a dinâmica e hemodinâmica ovariana de vacas com baixa e alta CFA. Para avaliar a repetibilidade da CFA, 20 vacas foram submetidas à sincronização de ovulação e avaliação da CFA por ultrassonografia diariamente. Para comparar dinâmica folicular de fêmeas de alta e baixa CFA, a CFA de 80 vacas da raça Holandesa foi aferida e destas selecionadas 9 fêmeas para o grupo de baixa (≤ 15 folículos) e 9 para o grupo de alta (≥ 25 folículos). A dinâmica folicular foi acompanhada diariamente por ultrassonografia nos modos B e Doppler, durante os dias do protocolo e onze dias após a ovulação, para avaliar o corpo lúteo (CL). Para determinar a constância da CFA realizou-se o cálculo de repetibilidade. Para os dados da dinâmica, as variáveis paramétricas foram analisadas pelo teste T. Adotou-se significância quando p ≤ 0,1. A repetibilidade da CFA nos diferentes dias do protocolo foi de 0.98. Os animais de baixa CFA demonstraram maior diâmetro do folículo pré-ovulatório (FO) (16,09 x 15,00mm; P = 0.059), maior área de vascularização do FO (17,36 x 8,16mm2; P = 0.005), maior área de CL (579,10 x 405,80mm2; P = 0.0001) e maior área de perfusão sanguínea do CL (97,16 x 68,30 mm2; P = 0.021). A CFA tem alta repetibilidade nos diferentes dias do protocolo e as vacas de baixa CFA demonstraram FOs e CLs maiores e com maior perfusão sanguínea. Abstract: The objective of first study was to evaluate the effect of nulliparous, primiparous and multiparous categories on the rates of estrus and pregnancy of females who did not manifest estrus and are treated with GnRH at the time of fixed-time artificial insemination (FTAI). 531 matrices were used, all of the Nellore breed allocated by category, comprising 144 nulliparous, 132 primiparous and 255 multiparous. The matrices were submitted to an FTAI protocol. To identify the manifestation of estrus, on the eighth day of the protocol, the sacrococcygeal region was painted and on the day of artificial insemination, females that showed estrus demonstrated absence of paint in this region. Females that did not show estrus were treated with 10 μg of GnRH. The rates of estrus and pregnancy manifestation were analyzed using a logistic regression model. The rate of estrus manifestation was lower (P = 0.006) in the primiparous (61.36%) category compared to nulliparous (76.39%) and multiparous (75.69%). Pregnancy rates between categories were similar, both for those who manifested estrus (nulliparous 84.54%, primiparous 86.42% and multiparous 80.31%; P = 0.398) and for those who did not manifested estrus (nulliparous 41.18%, primiparous 56.86% and multiparous 58.06%; P = 0.244), including the total pregnancy rate (nulliparous 74.3%, primiparous 75% and multiparous 74.9%; P = 0.989). Primiparous presented a lower rate of manifestation of estrus and there was no difference in pregnancy rates between categories. In the second study to better understand the relationship between antral follicle count (AFC) and reproductive performance, two experiments were performed. In the first, the objective was to evaluate the repeatability of AFC in the days of the ovulation induction protocol, while in the second it was to compare the dynamics and hemodynamics of cows with low and high AFC. To evaluate the repeatability of the AFC, 20 cows were submitted to synchronization of ovulation and evaluation of the AFC by ultrasonography daily in the protocol and eleven days after ovulation. To compare follicular dynamics of females with high and low AFC, the AFC of 80 cows was measured and from these 9 females were selected for the low group (≤ 15 follicles) and 9 for the high group (≥ 25 follicles). Follicular dynamics were monitored daily by B-mode and Doppler ultrasonography, during the days of the protocol and eleven days after ovulation, to evaluate the corpus luteum (CL). To determine the constancy of AFC, a repeatability calculation was performed. For the dynamics data of the low and high animals, the parametric variables were analyzed by the T test. Significance was adopted when p ≤ 0.1. The repeatability of the AFC on the different days of the protocol was 0.98. The animals with low AFC showed a larger diameter of the preovulatory follicle (POF) (16.09 x 15.00mm; P = 0.059), a greater vascularization area of the POF (17.36 x 8.16mm2; P = 0.005), larger area of CL (579.10 x 405.80mm2; P = 0.0001) and greater area of blood perfusion of CL (97.16 x 68.30 mm2; P = 0.021). AFC has high repeatability on the different days of the protocol and cows with low AFC demonstrated larger POFs and CLs with greater blood perfusion.Item Relação da contagem de folículos antrais com o comportamento de estro e mérito genético da progênie de fêmeas Bos taurus indicus(Universidade Estadual de Londrina, 2020-02-19) Moraes, Fábio Lucas Zito de; Seneda, Marcelo Marcondes; Morotti, Fábio; Barca Junior, Flávio Antonio; Santos, Gustavo Martins Gomes dos; Cavalieri, Fábio Luiz BimResumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a relação da contagem de folículos antrais (CFA) de vacas Bos taurus indicus submetidas à IATF com a manifestação de estro, taxa de concepção, CFA das filhas e mérito genético de seus filhos. No primeiro estudo 450 vacas Nelore multíparas, avaliadas por ultrassonografia foram classificadas em baixa (≤ 15 folículos; n= 150), intermediária (≥ 19 e ≤ 26 folículos; n= 150) ou alta (≥ 30 folículos; n= 150) CFA. No primeiro dia do protocolo hormonal (D0), as vacas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1,2 g de progesterona e administrado via IM 2,0 mg de benzoato de estradiol. Após 8 dias (D8), os dispositivos de P4 foram removidos e foram administrados via IM 450 μg de cloprostenol sódico, 300 UI de gonadotrofina coriônica equina e 1,0 mg de cipionato de estradiol. Após 48 horas (D10), no momento da inseminação artificial (IA), foi realizada a avaliação da manifestação de estro. Trinta dias após a IA procedeu- se o diagnóstico de gestação por ultrassonografia. Os dados foram analisados por teste de regressão logística binária (p < 0.05). A taxa de concepção de fêmeas do grupo de baixa CFA (69,3%) foi maior (p < 0.05) em relação aos de intermediária (60%) e a alta (56,7%); e maior (p < 0.05) para a vacas que manifestaram cio (67,3%) em relação às que manifestaram cio parcial (58,2%) e as que não manifestaram cio (45,4%). A taxa de concepção foi influenciada pela CFA (p=0,04) e pelo cio (p=0,006), mas não houve efeito da interação entre CFA e cio (p=0,511). No segundo estudo, foram utilizados 444 animais Bos taurus indicus, da raça Nelore. Durante a estação de monta, foram avaliadas 222 vacas recém paridas quanto á CFA em baixa (≤ 15 folículos; n= 52), intermediária (≥ 16 e ≤ 29 folículos; n= 37) ou alta (≥ 30 folículos; n= 38) contagem. Avaliou- se 95 filhas e 127 filhos dessas vacas provenientes de IA, para análise de uma possível relação entre a CFA de mães e filhas e o mérito genético dos filhos. As filhas foram analisadas quantos sua CFA e os filhos foram avaliados num programa de melhoramento genético que utiliza matriz de parentesco além de dados de perímetro escrotal (PE) e peso corporal para classificação dos animais quanto seu mérito genético. Para análise da prole foi incluso o efeito paterno. O modelo linear generalizado de efeito misto (GLIMMIX) foi utilizado para análise da CFA, PE, peso e mérito genético. A CFA das filhas não teve relação com efeitos maternos e paternos e vacas de alta CFA apresentaram filhos com melhor mérito genético (p= 0,09). Embora esse estudo demonstre uma relação positiva da CFA com o mérito genético, mais estudos dever realizados sobre a atuação da CFA em provas de melhoramento animal. Contudo, em vacas selecionados geneticamente, as fêmeas de baixa CFA apresentam maior taxa de concepção à IATF Abstract: The aim of this study was to evaluate the relationship between the antral follicles count (AFC) of in Bos taurus indicus cows submitted to a TAI with the manifestation of estrus, conception rate, AFC of the female offspring and the genetic merit of their male offspring. In the first study, 450 multiparous Nelore cows, evaluated by ultrasound, were classified as low (≤ 15 follicles; n= 150), intermediate (≥ 19 and ≤ 26 follicles; n= 150) or high (≥ 30 follicles; n= 150) AFC. On the first day of the hormonal protocol (D0), the cows received an intravaginal device containing 1.2 g of progesterone and administered by IM 2.0 mg of estradiol benzoate. After 8 days (D8), the P4 devices were removed and IM 450 μg of sodium cloprostenol, 300 UI of equine chorionic gonadotrophin and 1.0 mg of estradiol cypionate were administered by IM. After 48 hours (D10), at the time of artificial insemination (AI), the evaluation of the estrus manifestation was performed. Thirty days after the AI, a pregnancy diagnosis was made by ultrasound. The data were analyzed by binary logistic regression test (p <0.05). The conception rate of females in the low AFC group (69.3%) was higher (p <0.05) in relation to intermediate (60%) and high (56.7%); and higher (p <0.05) for cows that showed estrus (67.3%) in relation to those that showed partial estrus (58.2%) and those that did not show estrus (45.4%). The conception rate was influenced by AFC (p = 0.04) and estrus (p= 0.006), but there was no effect of the interaction between AFC and estrus (p= 0.511). In the present study, the conception of Nelore cows was influenced by the estrus manifestation (67.3%) and low CFA (69.3%). In the second study, 444 Bos taurus indicus of the Nelore breed were used. During the breeding season, 222 cows recently calved for low CFA (≤ 15 follicles; n= 52), intermediate (≥ 16 and ≤ 29 follicles; n= 37) or high (≥ 30 follicles; n= 38) score were evaluated. 95 female offspring and 127 male offspring of these cows from AI were evaluated to analyze a possible relationship between the AFC of mothers and female offspring AFC and the genetic merit of their male offspring. The female offspring were analyzed about their AFC and male offspring were evaluated in a genetic improvement program that uses a kinship matrix in addition to scrotal perimeter (SP) and body weight data to classify the animals according to their genetic merit. For the analysis of offspring, the paternal effect was included. The generalized mixed effect linear model (GLIMMIX) was used to analyze AFC, SP, weight and genetic merit. The female offspring AFC was not related to maternal and paternal effects and high CFA cows had male offspring with better genetic merit (p= 0.09). Although this study demonstrates a positive relationship between AFC and genetic merit, more studies should be carried out on AFC performance in animal breeding tests. However, in genetically selected cows, females with low AFC have a higher conception rate at TAI.Item Diversidade genética, estrutura populacional e mapeamento associativo para características nutricionais e agronômicas em um painel de feijão mesoamericano brasileiro(Universidade Estadual de Londrina, 2020-11-27) Iácono, Jessica Delfini De Paula; Ruas, Paulo Maurício; Gonçalves, Leandro Simões Azeredo; Pereira, Luiz Filipe Protasio; Malone, Gaspar; Mendonça, Leandro de Freitas; Cirino, Vânia ModaResumo: O feijão (Phaseolus vulgaris L.) é um dos alimentos básicos na dieta do brasileiro, bem como é considerado uma das leguminosas mais importantes no mundo. É reconhecidamente uma excelente fonte de proteínas, carboidratos e micronutrientes, e devido aos seus atributos nutricionais e importância na alimentação em países em desenvolvimento, se torna uma cultura adequada para biofortificação. A identificação de genes e regiões genômicas relacionados com características nutricionais e agronômicas, é de grande importância para o melhoramento genético de feijão, podendo acelerar o desenvolvimento de novas cultivares. Nesse contexto, o presente trabalho teve como objetivo acessar a diversidade genética, estrutura populacional e desequilíbrio de ligação em um painel de diversidade de feijão designado Brazilian Diversity Panel (BDP), e em seguida identificar regiões genômicas associadas a características nutricionais e agronômicas. A genotipagem por sequenciamento (Genotyping by sequencing – GBS) de 219 acessos pertencentes ao BDP permitiu a identificação de 49.817 SNPs com MAF > 0,05. A análise bayesiana da estrutura populacional evidenciou a subdivisão do painel em 3 grupos, um formado por feijões de origem andina, outro formado predominantemente por feijões de origem mesoamericana pertencentes ao grupo comercial carioca, e outro por feijões de origem mesoamericana com cor da semente preta, creme, vermelho e outras. A análise do desequilíbrio de ligação evidenciou a existência de longos blocos de ligação e um baixo decaimento do LD em função da distância física entre os SNPs. Para os estudos de mapeamento associativo (Genome wide association studies -GWAS) foram utilizados 178 acessos de origem mesoamericana pertencentes ao BDP e 25.011 SNPs de boa qualidade. O painel foi fenotipado para nove nutrientes (fósforo, potássio, cálcio, magnésio, cobre, manganês, enxofre, zinco e ferro) e dez características agronômicas (altura de planta, altura de inserção da primeira vagem, número de nós, comprimento da vagem, número total de vagens por planta, número de locos por vagem, número de sementes por vagem, peso total de sementes por planta, peso de 100 sementes e rendimento de grãos) em três e quatro ambientes, respectivamente. Quatro métodos multi-locus de GWAS foram empregados nesse estudo (mrMLM, FASTmrMLM, pLARmEB e ISIS EM-BLASSO). Apenas QTNs (Quantitative Trait Nucleotide) detectados por diferentes métodos ou ambientes, foram considerados verdadeiramente significativos, resultando em 48 e 64 QTNs estáveis relacionados com o conteúdo nutricional e características agronômicas, respectivamente. QTNs pleiotrópicos e regiões genômicas sobrepostas em torno dos QTNs foram identificadas para entre diferentes características, demonstrando que os mecanismos relacionados a expressão dessas características podem estar associados. O acúmulo de alelos superiores revelou aumento gradual do teor de nutrientes no grão, bem como causaram um incremento positivo para a característica agronômicas. O BDP se mostrou eficiente para estudos de associação e a exploração de diferentes métodos e ambientes demonstrou a confiabilidade dos marcadores associados as características. Os lócus identificados no presente trabalho serão importantes para o melhoramento de feijões de origem mesoamericana e mais especificamente para os principais grupos consumidos no Brasil, preto e carioca. Abstract: The common bean (Phaseolus vulgaris L.) is one of the staple foods in the Brazilian diet, as well as being considered one of the most important legumes in the world. It is recognized as an excellent source of proteins, carbohydrates and micronutrients, and due to its nutritional attributes and importance in developing countries, it becomes a suitable crop for biofortification. The identification of genes and genomic regions related to nutritional and agronomic traits is of great importance for the genetic improvement of beans, being able to accelerate and provide more efficiency in the development of new cultivars. In this context, the present work aims to access the genetic diversity, population structure and the linkage disequilibrium in a common bean diversity panel called Brazilian Diversity Panel (BDP), and then identify genomic regions associated with nutritional and agronomic traits. Genotyping by sequencing (GBS) of 219 accessions belonging to the BDP allowed the identification of 49,817 SNPs with MAF> 0.05. The Bayesian analysis of the population structure showed that the panel was subdivided into 3 groups, one formed by common beans of Andean origin, another formed predominantly by Mesoamerican origin belonging to the carioca commercial group, and another by common beans of Mesoamerican origin with black seed color, cream, red and others. The analysis of the linkage disequilibrium showed the existence of long linkage blocks and a low LD decay due to the physical distance between the SNPs. For the genome wide association studies (GWAS) 178 accessions of Mesoamerican origin belonging to the BDP and 25,011 good quality SNPs were used. The panel was phenotyped for nine nutrients (phosphorus, potassium, calcium, magnesium, copper, manganese, sulfur, zinc and iron) and ten agronomic traits (plant height, first pod insertion height, number of nodes, pod length, total number of pods per plant, number of locules per pod, number of seeds per pod, total seed weight per plant, weight of 100 seeds and grain yield) in three and four environments, respectively. Four multi-locus GWAS methods were employed in this study (mrMLM, FASTmrMLM, pLARmEB and ISIS EM-BLASSO). Only QTNs (Quantitative Trait Nucleotide) detected by different methods or environments, were considered truly significant, resulting in 48 and 64 stable QTNs related to the mineral content and agronomic traits evaluated, respectively. Pleiotropic QTNs and overlapping of the genomic regions surrounding the QTNs were identified among different traits, demonstrating that the mechanisms related to expression between these characteristics may be associated. The accumulation of superior alleles revealed a gradual increase in the content of nutrients in the grain, as well as causing a positive increase for the agronomic traits. The BDP proved to be efficient for association studies and the exploration of different methods and environments demonstrated the reliability of the markers associated with the traits. The loci identified in the present study will be important for the breeding of common beans of Mesoamerican origin and more specifically for the main groups consumed in Brazil, black and carioca.Item Diarreia osmótica induzida em bezerros neonatos e tratamento com soluções eletrolíticas orais com diferentes composições(Universidade Estadual de Londrina, 2021-01-29) Bregadioli, Gabriela de Castro; Lisbôa, Júlio Augusto Naylor; Leal, Marta Lizandra do Rêgo; Carvalho, Antônio Último de; Ribeiro Filho, José Dantas; Gonçalves, Roberto CalderonResumo: O objetivo do estudo foi avaliar os desequilíbrios hídrico, eletrolíticos e ácido base em bezerros com diarreia osmótica e desidratação induzidas, alimentados com leite integral natural, compará-los entre bezerros com acesso livre à água ou com privação de água por 12 horas noturnas e comparar os efeitos de cinco soluções eletrolíticas orais (SEO) com diferentes composições sobre esses desequilíbrios. Para isto, dois estudos foram desenvolvidos e em ambos todos os bezerros foram submetidos ao protocolo de indução de diarreia osmótica e desidratação com leite (16,5 mL/kg) acrescido de sacarose (4 g/kg, em solução 20%), espironolactona (2 mg/kg) e hidroclorotiazida (2 mg/kg), administrados por via oral, a cada 8 horas, durante 48 horas. Foram mensurados ou calculados: PPT, glicose, lactato D, lactato L, pH, pCO2, HCO3-, BE, Na+, K+, Cl-, SID3, SIG, AG, Atot e variação percentual do volume plasmático (VVP). Exames físicos foram realizados a cada 8 horas e pesagens a cada 24 horas. Análise de variância de medidas repetidas bifatorial foi utilizada nos dois estudos. No primeiro estudo, 38 bezerros (42,89 ± 3,70 kg) com 10 dias de vida, alimentados com leite natural, foram distribuídos aleatoriamente por dois grupos: GSP (n=17) com acesso livre à água durante o período de indução e GCP (n=21) com privação de água durante as 12 horas noturnas. Colheitas de sangue venoso foram realizadas nas horas 0, 24 e 48. Todos desenvolveram diarreia osmótica, desidratação leve (GSP) a moderada (GCP), hiponatremia e hipercloremia relativa e acidose metabólica moderada (GSP) a acentuada (GCP). Potassemia e glicemia não se alteraram, AG e lactato D foram mais altos no GCP, SIG foi mais baixo no GCP, e não houve hiperlactatemia L ou D. Estes desequilíbrios eletrolíticos e ácido base assemelham-se aos observados em casos naturais de diarreia. O protocolo de indução de diarreia osmótica e desidratação deve ser aplicado em bezerros alimentados com leite integral que não sejam completamente privados de água. No segundo estudo, 30 bezerros (43,12 ± 0,70 kg), com 10 dias de vida, alimentados com leite natural, foram distribuídos, por meio de sorteio, em cinco grupos de tratamento (n=6) de acordo com a SEO testada (comerciais: SEO A, B, C e D; e não comercial: SEO UEL). No dia do tratamento os bezerros continuaram recebendo leite e sacarose a cada 8 horas e receberam 6 L da SEO, divididos em duas vezes. Amostras de sangue venoso foram colhidas nas horas: -48, -24, 0, 8, 16, 24, 48 e 72. Todos os bezerros desenvolveram diarreia profusa, desidratação leve a moderada, hiponatremia e hipercloremia relativa e acidose metabólica moderada a acentuada. As SEO estudadas foram bem aceitas pelos bezerros e eficientes para a correção da desidratação, dos desequilíbrios eletrolíticos e da acidose metabólica. A SEO D não foi capaz de corrigir completamente a hiponatremia, e a SEO B provocou hiperglicemia transitória. Todas as SEO testadas são seguras e eficazes para o tratamento de bezerros diarreicos com graus moderados de desidratação e de acidose metabólica, o que indica que possuem composição adequada para esta finalidade. Abstract: The aim of the study was to evaluate water, electrolyte and acid-base imbalances in calves with induced osmotic diarrhea and dehydration, fed with natural whole milk, compare them between calves with free access to water or with water deprivation for 12 hours at night and compare the effects of five oral electrolyte solutions (OES) with different compositions on these imbalances. For this, two studies were developed and in both calves they were submitted to the protocol of induction of osmotic diarrhea and dehydration with milk (16.5 ml/kg) plus sucrose (4 g/kg, in 20% solution), spironolactone (2 mg/kg) and hydrochlorothiazide (2 mg/kg), administered orally, every 8 hours, for 48 hours. Were measured or calculated: TPP, glucose, D-lactate, L-lactate, pH, pCO2, HCO3-, BE, NA+, K+, Cl-, SID3, SIG, AG, Atot and percentage change in plasma volume (%PV). Physical exams were performed every 8 hours and weighings every 24 hours. Two-way repeated measures ANOVA was used in both studies. In the first study, 38 calves (42.89 ± 3.70 kg) aged 10 days old, fed natural milk, were randomly assigned into two groups: FWG (n=17) with free access to water during the induction period and DWG (n=21) with water deprivation during 12 hours at night. Venous blood samples were taken at hours 0, 24 and 48. All calves developed osmotic diarrhea, mild (FWG) to moderate (DWG) dehydration, hyponatremia and relative hyperchloremia and moderate (FWG) to severe (DWG) metabolic acidosis. Plasma K+ and glucose did not change, AG and D-lactate were higher in DWG, SIG was lower in DWG, and there was no L- and D-hyperlactatemia. These electrolyte and acid-base imbalances are similar to those observed in natural cases of diarrhea. The protocol for inducing osmotic diarrhea and dehydration should be applied to calves fed whole milk that are not kept totally deprived of water. In the second study, 30 calves (43.12 ± 0.70 kg), 10 days old, fed natural milk, were distributed, by lot, into five treatment groups (n=6) according to tested OES (commercial: OES A, B, C and D; non-commercial: OES UEL). On the day of treatment the calves continued to receive milk and sucrose every 8 hours and received 6 L of OES, divided twice. Venous blood samples were collected at -48, -24, 0, 8, 16, 24, 48 and 72. All calves developed profuse diarrhea, mild to moderate dehydration, hyponatremia and relative hyperchloremia and moderate to severe metabolic acidosis. The studied OES were well accepted by the calves and were effective in reversing the dehydration, the electrolyte imbalances and the metabolic acidosis. OES D was unable to completely correct hyponatremia, and OES B caused transient hyperglycemia. All tested OES are safe and effective for the treatment of diarrheal calves with moderate degrees of dehydration and metabolic acidosis, which indicates that they have adequate composition for this purpose.Item Caracterização de isolados de Corynespora cassii cola e sintomatologia de mancha alvo em diferentes cultivares de soja(Universidade Estadual de Londrina, 2021-02-18) Puia, Jacqueline Dalbelo; Canteri, Marcelo Giovanetti; Leite Junior, Rui Pereira; Peña, Maria Isabel Balbi; Vigo, Sandra CristinaResumo: A mancha alvo da soja causada pelo fungo Corynespora cassiicola ocorre em todas as regiões sojícolas do Brasil, causando reduções de produtividade até 45% e perdas significativas na cultura. O objetivo do estudo foi caracterizar os parâmetros monocíclicos, resultantes da interação entre oito isolados de C. cassiicola e oito cultivares comerciais de soja, bem como determinar os sintomas exibidos pelas plantas inoculadas neste patossistema. Dois experimentos foram instalados, um in vitro e outro sob condições de câmara climatizada. O delineamento experimental do ensaio in vitro foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 8 (meios de cultura x isolados), com cinco repetições. Os isolados foram repicados em placas de Petri contendo os meios de cultura BDA e Suco V8 Ágar. Foram avaliadas a coloração, aspecto e taxa do crescimento micelial, produção, dimensões e número de septos dos conídios. O delineamento experimental do ensaio em câmara climatizada foi de blocos casualizados em arranjo fatorial 8 x 8 (isolados de C. cassiicola x cultivares de soja), com cinco repetições. Plantas em estádio fenológico V4, foram inoculadas com suspensão de cada isolado (2 x 104 conídios mL-1). Para cada combinação isolado e cultivar de soja, foram quantificados o número de lesões, período de incubação, a incidência e tipo de manchas necróticas em órgãos vegetativos. No ensaio in vitro, verificou-se que o meio de cultura em que C. cassiicola é submetido influencia a cor e taxa de crescimento, mas não influencia o aspecto de micélio da colônia. Os aspectos de micélio aparentam estar relacionados ao hospedeiro de origem. Isolados oriundos de plantas de algodão apresentaram aspecto de micélio plano, enquanto isolados provenientes de plantas de soja tendem a apresentar micélio aéreo cotonoso. O meio Suco V8 Ágar proporcionou a maior taxa de crescimento para os isolados de C. cassiicola quando comparado ao meio BDA. A produção de conídios em isolados oriundos de plantas de soja é equivalente ou maior quando cultivados em meio Suco V8 Ágar. As características morfológicas dos conídios de C. cassiicola apresentaram grande variabilidade em relação ao próprio isolado e ao meio de cultivo. Quanto ao segundo ensaio, a severidade e período de incubação de mancha alvo são influenciados pelos isolados de C. cassiicola, cultivares de soja e a posição do trifólio nas plantas. O isolado ISO 4S ocasiona maior severidade de mancha alvo, em relação aos isolados ISO 2A, ISO 2S e ISO 11S. Menor severidade da doença ocorre para os cultivares de soja BMX Potência RR, BMX Força RR e NA 5909 RG, em relação ao cultivar BMX Elite IPRO. Independente do cultivar avaliado, o período de incubação tende a ser maior para o isolado ISO 4S. A quantidade de lesões e o período de incubação de C. cassiicola é maior no trifólio inferior e menor no trifólio superior das plantas. Cinco padrões de lesões foram identificados. Os isolados ISO 1S, ISO 4S e ISO 11S ocasionam sintomas mais severos. Maior porcentagem de folhas com lesões ocorreu nos cultivares BMX Elite IPRO, BRS 284, BMX Garra IPRO e NA 5909 RG. Lesões com menor severidade ocorreram nos trifólios da posição média das plantas de soja. Sintomas nos cotilédones, folhas unifolioladas, pecíolos e haste das plantas foram observados. O isolado ISO 4S inoculado nos cultivares BMX Potência RR e BMX Força RR ocasionou maior incidência de lesões. A incidência de lesões nos pecíolos, aumentou conforme a posição em que o pecíolo é inserido na haste principal. Abstract: Soybean target spot caused by the fungus Corynespora cassiicola occurs in all soybean regions in Brazil, causing yield reductions of up to 45% and significant crop losses. The objective of the study was to characterize the monocyclic parameters resulting from the interaction between eight isolates of C. cassiicola and eight commercial soybean cultivars, as well as to determine the symptoms exhibited by inoculated plants in this pathosystem. Two experiments were set up, one in vitro and the other under climate-controlled chamber conditions. The experimental design of the in vitro test was entirely randomized in a 2 x 8 factorial scheme (culture media x isolates), with five repetitions. The isolates were plated on Petri plates containing BDA and Juice V8 Agar culture media. The coloration, appearance and rate of mycelial growth, production, dimensions and number of septa of the conidia were evaluated. The experimental design of the chamber test was a randomized block design with an 8 x 8 factorial arrangement (C. cassiicola isolates x soybean cultivars), with five repetitions. Plants in the V4 phenological stage were inoculated with a suspension of each isolate (2 x 104 conidia mL-1). For each isolate and soybean cultivar combination, the number of lesions, incubation period, incidence and type of necrotic spots on vegetative organs were quantified. In the in vitro assay, it was found that the culture medium in which C. cassiicola is subjected influences the color and growth rate, but does not influence the mycelium appearance of the colony. The mycelium aspects appear to be related to the host of origin. Isolates from cotton plants had a flat mycelium appearance, while isolates from soybean plants tended to have cottony aerial mycelium. Juice V8 Agar medium provided the highest growth rate for C. cassiicola isolates when compared to BDA medium. The production of conidia in isolates from soybean plants is equivalent or greater when grown on Juice V8 Agar medium. The morphological characteristics of C. cassiicola conidia showed great variability in relation to the isolate itself and the culture medium. As for the second assay, the severity and incubation period of target spot are influenced by C. cassiicola isolates, soybean cultivars and the position of the trefoil on the plants. The isolate ISO 4S causes higher target spot severity, compared to isolates ISO 2A, ISO 2S and ISO 11S. Lower severity of the disease occurs for the soybean cultivars BMX Potência RR, BMX Força RR and NA 5909 RG, in relation to the cultivar BMX Elite IPRO. Regardless of the cultivar evaluated, the incubation period tends to be longer for the isolate ISO 4S. The amount of lesions and the incubation period of C. cassiicola is greater in the lower trefoil and less in the upper trefoil of the plants. Five patterns of lesions were identified. The isolates ISO 1S, ISO 4S and ISO 11S cause more severe symptoms. The highest percentage of leaves with lesions occurred on BMX Elite IPRO, BRS 284, BMX Garra IPRO, and NA 5909 RG. Less severe lesions occurred on the midrib trifoli in soybean plants. Symptoms on the cotyledons, unifoliolate leaves, petioles and stem of the plants were observed. The isolate ISO 4S inoculated on the cultivars BMX Potência RR and BMX Força RR caused the highest incidence of lesions. The incidence of lesions on petioles increased according to the position in which the petiole is inserted in the main stem.Item Modelagem e simulação como ferramentas para avaliar estratégias de manejo de resistência a fungicidas no patossistema soja-Phakopsora pachyrhizi(Universidade Estadual de Londrina, 2021-02-19) Fantin, Lucas Henrique; Canteri, Marcelo Giovanetti; Bergamin Filho, Armando; Peña, Maria Isabel Balbi; Fonseca, Inês Cristina de Batista; Natti, Paulo LaerteResumo: Reduções de sensibilidade do fungo Phakopsora pachyrhizi, causador da ferrugem asiática da soja (FAS), aos principais grupos químicos de fungicidas utilizados para controle no Brasil tem sido relatadas desde 2010. Sem previsão de lançamento de ingredientes ativos com novos mecanismos de ação nos próximos anos, os esforços da pesquisa têm sido voltados para uso de misturas de dois e três ingredientes ativos, além de alterações no momento, dose e número de aplicações dos fungicidas registrados atualmente. Pouco se sabe sobre os impactos dessas medidas na dinâmica e seleção de indivíduos resistentes de P. pachyrhizi. O objetivo do presente estudo foi desenvolver modelos matemáticos para avaliar o controle de FAS através de aplicações de fungicidas inibidores da succinato desidrogenase (SDHI) e sua influência na seleção de indivíduos resistentes de P. pachyrhizi. Para isso, programas solo e misturas com fungicidas mutlissítios e inibidores da demetilase (DMI) foram adotados. Cenários foram criados para (i) avaliar o efeito da frequência inicial de resistentes; (ii) nível de sensibilidade dos resistentes (shift); (iii) custo biológico da resistência e (iv) número de aplicações e dose dos produtos na seleção de indivíduos resistentes a SDHI. As rotinas foram desenvolvidas com auxílio do software R. Foi adotado o modelo SLIR (Suscetível-Latente-Infeccioso-Removido) composto por um sistema de equações diferenciais ordinais (EDO) e modificado para simular o efeito dos fungicidas na população do patógeno. Os parâmetros relacionados ao hospedeiro, patógeno e fungicida foram ajustados através de resultados de ensaios de campo e laboratório. A variável resposta foi o tempo (safras) para que a frequência de resistentes a SDHI na população alcance 50% foi utilizada (T50). Artigo A - Os resultados apresentaram relação inversa entre frequência inicial de resistentes e T50, da mesma forma, o nível de sensibilidade dos resistentes (shift). Houve acréscimo de 14, 8 e 5 safras quando o shift passou de 50 para 90% em programas solo com uma, duas e três aplicações, respectivamente. A pressão de seleção imposta pelo aumento do número de aplicações de um para três reduziu o T50. Da mesma forma, o aumento da dose de SDHI favoreceu a seleção de resistentes. A penalidade biológica de um dia no período latente de resistentes prolongou o T50 em duas safras. Penalidades de três e cinco dias prolongaram o T50 em 16 safras. Artigo B – A associação de DMI ou mutlissítio ao SDHI prolongou T50. O aumento da dose do fungicida parceiro reduziu a seleção de resistentes. Cenário com 200% da dose de multissítio prolongou sete safras até T50 em relação a dose de 50%. O mesmo comportamento foi observado para aumento da dose de DMI. Houve acréscimo de três safras com o dobro da dose de DMI em programa com uma aplicação de SDHI. A presença de penalidade biológica prolongou o T50. Nos cenários simulados, o limiar de shift para seleção de indivíduos resistentes foi de 70%, ou seja, a seleção de indivíduos resistentes não ocorreu quando os indivíduos apresentaram sensibilidade de 70% ao fungicida SDHI. Os resultados mostram que a combinação de multissítios reduz a seleção de resistentes a SDHI, tendo a dose do fungicida na mistura um efeito determinante no manejo anti-resistência. O tempo entre introdução do fungicida e resistência está relacionada com a sensibilidade dos indivíduos resistentes, número de aplicações e o momento em que as medidas são adotadas. A penalidade biológica de indivíduos resistentes prolongou a vida útil dos fungicidas SDHI e indicou ser limitante na seleção de indivíduos. Os resultados sugerem que a adoção de medidas anti-resistência deve ser planejada antes do lançamento do ingrediente ativo e a vida útil do produto varia de acordo com o grau de resistência. Os modelos podem auxiliar pesquisadores a entender como diferentes modos de ação podem afetar a seleção de indivíduos. Abstract: Sensitivity losses of the fungus Phakopsora pachyrhizi, the causal agent of Asian soybean rust (ASR), to the main chemical groups used in Brazil have been reported since 2010. With no forecast of launching active ingredients with new mechanisms of action in the coming years, research efforts have been focused on the use of mixtures of two and three active ingredients, in addition to changes in the moment, dose and number of applications of the currently registered fungicides. Little is known about the impacts of these measures on the dynamics and selection of resistant P. pachyrhizi individuals. The aim of the present study was to develop mathematical models to evaluate the control of FAS through applications of succinate inhibitors of succinate dehydrogenase (SDHI) and its influence on the selection of resistant individuals of P. pachyrhizi. For that, soil programs and mixtures with multi-site fungicides and demethylase inhibitors (DMI) were adopted. Scenarios were created to (i) evaluate the effect of the initial frequency of resistance; (ii) the sensitivity level of the resistance (shift); (iii) biological cost of resistance and (iv) number of applications and dose of products in the selection of individuals resistant to SDHI. The routines were developed with the aid of R software. The SLIR model (Susceptible-Latent-Infectious-Removed) composed by a system of ordinal differential equations (ODE) was adopted and modified to simulate the effect of fungicides on the pathogen population. The parameters related to the host, pathogen and fungicide were adjusted through results of field and laboratory tests. The response variable was the time (harvests) for the frequency of resistant to SDHI in the population to reach 50% (T50). Article A - The results showed an inverse relationship between the initial frequency of resistors and T50, in the same way, the resistance level (shift). There was an increase of 14, 8, and 5 seasons when the shift went from 50 to 90% in solo programs with one, two, and three applications, respectively. The selection pressure imposed by increasing the number of applications from one to three reduced T50. Likewise, the increase in the dose of SDHI increased the selection of resistant individuals. The one-day biological penalty in the latent resistant period prolonged T50 in two seasons. Penalties of three and five prolonged T50 in 16 seasons. Article B - The addition of a DMI and Multisite partner extended T50. Increasing the partner's dose reduced the selection of resistance. Scenario with the 200% dose of Multisite prolonged seven seasons until T50 in relation to the dose of 50%. The same was observed for increasing the dose of DMI. Three seasons were added with double the dose of DMI in a program with an application of SDHI. The presence of a biological penalty prolonged T50. In the simulated scenarios, the shift threshold for the selection of resistant individuals was 70%, that is, the selection of resistant individuals did not occur when the individuals presented 70% sensitivity to the SDHI fungicide. The results demonstrate that the combination of multisite reduces the selection of resistance to SDHI, being the dose of the fungicide in the mixture determinant to present effect in the anti-resistance management. The time between introduction and resistance is related to the sensitivity of resistant individuals, the number of applications, and the moment when the measures are adopted. The biological penalty of resistant individuals prolonged the life of the SDHI and indicated to be limited in the selection of individuals. The results suggest that the adoption of anti-resistance measures should be planned before the launch of the active ingredient and the product's life varies according to the degree of resistance. Models results can help researchers understand how different modes of action can affect the selection of individuals.Item Efeito da suplementação com antioxidantes no cultivo in vitro de folículos ovarianos pré-antrais de fêmeas Bos taurus indicus(Universidade Estadual de Londrina, 2021-02-19) Bergamo, Larissa Zamparone; Seneda, Marcelo Marcondes; Landim, Fernanda da Cruz; Silva-Santos, Katia Cristina; Blaschi, Wanessa; Morotti, FábioResumo: A adição de antioxidantes no meio de cultivo in vitro de folículos ovarianos préantrais bovinos contribui para o adequado desenvolvimento dos folículos, para a manutenção da integridade folicular e do estresse oxidativo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com antioxidantes no desenvolvimento e na manutenção da integridade folicular e do estresse oxidativo no cultivo in vitro de folículos ovarianos pré-antrais de fêmeas Bos taurus indicus. Para a realização do experimento A (Ácido Ascórbico) e do experimento B (Ácido Alfa Lipóico), ovários (n=20 e n=24, respectivamente) obtidos em abatedouro foram fragmentados e um fragmento, escolhido aleatoriamente de cada par de ovário, foi fixado em Bouin (controle não cultivado; D0). Esses fragmentos foram destinados para análise da morfologia e do crescimento folicular (histologia clássica). Um fragmento, escolhido aleatoriamente de cada par de ovário, foi congelado a -80º C (controle não cultivado; D0), para análise do estresse oxidativo (TBARS, NBT e FRAP). Os demais fragmentos foram cultivados in vitro por 6 (D6) ou 12 (D12) dias, em Meio Essencial Mínimo (MEM+) ou MEM+ suplementado com Ácido Ascórbico (50 ou 100 ng/mL) ou Ácido Alfa Lipóico (50, 100 ou 250 ng/mL), com uma matriz extracelular de gel de agarose, em estufa a 38,5º C, com ar e umidade saturada. A cada dois dias, realizou-se a troca total do meio de cultivo por meio fresco. Diferenças entre as proporções de folículos primordiais e em desenvolvimento (primário e secundário), para cada tratamento (controle não cultivado, controle cultivado e diferentes concentrações de antioxidantes testadas nos diferentes tempos), foram analisadas pelo teste de Qui-quadrado e/ou teste Exato de Fisher. Na ocorrência de um efeito significativo, as proporções foram comparadas por um teste de proporção 2x2 para se estabelecer o ranking entre os tratamentos. Os dados das análises de estresse oxidativo foram submetidos à ANOVA seguido pelo teste de Bonferroni. Os valores foram considerados significativos quando p ≤ 0,05. No experimento A, a suplementação com 100 ng/mL (33,56%; 49/146; p < 0,0001) de Ácido Ascórbico no meio de cultivo in vitro de folículos ovarianos pré-antrais, após 6 dias de cultivo, foi a mais eficiente em promover o desenvolvimento, manter a integridade folicular e os níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs) estáveis. No experimento B, a suplementação com 100 ng/mL (36,88%; 52/141; p < 0,0001) de Ácido Alfa Lipóico, aos 6 dias de cultivo in vitro foi a mais eficiente em promover o desenvolvimento, manter a integridade folicular e os níveis de EROs estáveis. Conclui-se que os folículos ovarianos pré-antrais inclusos em fragmentos ovarianos bovinos, provenientes de abatedouro, podem ser cultivados in vitro ao longo de 6 dias, com meio suplementado com antioxidantes, o que permite o desenvolvimento e a manutenção da integridade folicular e níveis de espécies reativas de oxigênio estáveis. Abstract: The addition of antioxidants in the in vitro culture medium of bovine preantral ovarian follicles contributes to the adequate development of the follicles, maintenance of follicular integrity and oxidative stress. Thus, our objective was to evaluate the effect of supplementation with antioxidants on the development and maintenance of follicular integrity and oxidative stress in the in vitro culture of preantral ovarian follicles from Bos taurus indicus females. For the experiment A (Ascorbic Acid) and experiment B (Alpha Lipoic Acid), ovaries (n=20 and n=24, respectively) obtained from a slaughterhouse were fragmented and a randomly obtained fragment from each pair of ovaries, was fixed in Bouin (non-cultivated control; D0). These fragments were submitted to the analysis of morphology and folicular growth (classical histology). A randomly obtained fragment from each pair of ovaries was frozen at - 80º C (non-cultivated control; D0) for analysis of oxidative stress (TBARS, NBT and FRAP). The other fragments were in vitro cultured for 6 (D6) or 12 (D12) days, in Minimum Essential Medium (MEM+) or MEM+ supplemented with Ascorbic Acid (50 or 100 ng/mL) or Alpha Lipoic Acid (50, 100 or 250 ng/mL), with an extracelular matrix of agarose gel, in an oven at 38.5º C, with air and saturated humidity. Every two days, 100% of the culture medium was replaced. Differences between the proportions of primordial and developing follicles (primary and secondary), for each treatment (uncultivated control, cultured control and different concentrations of antioxidants tested at different times), were analyzed using the Chi-square test and/or Exact Fisher test. In the event of a significant effect, the proportions were compared using a 2x2 proportion test to establish the ranking between treatments. The oxidative stress analysis data were submitted to ANOVA followed by the Bonferroni test. Values were considered significant when P ≤ 0.05. In experiment A, supplementation with 100 ng/mL (33.56%; 49/146; P < 0.0001) of Ascorbic Acid in the in vitro culture medium of preantral ovarian follicles, after 6 days of culture, was the most efficient in promoting development, maintaining integrity follicular and reactive oxygen species (ROS) levels stability. In experiment B, supplementation with 100 ng/mL (36.88%; 52/141; P < 0.0001) of Alpha Lipoic Acid, at 6 days of in vitro culture, was the most efficient in promoting development, maintaining folicular integrity and ROS levels stability. It is concluded that the preantral ovarian follicles included in bovine ovarian fragments, from slaughterhouse, can be grown in vitro over 6 days, with medium supplemented with antioxidants, which allows the development and maintenance of follicular integrity and levels of stable reactive oxygen species.Item Ocorrência do vírus da febre catarral maligna em bovinos do estado do Paraná, sul do Brasil: um estudo imuno-histoquímico retrospectivo(Universidade Estadual de Londrina, 2021-02-19) Xavier, Ana Aparecida Correa; Headley, Selwyn Arlington; Okano, Werner; Lisboa, Julio Augusto NaylorResumo: A febre catarral maligna (FCM) é uma doença infecciosa viral causada por diversos agentes do grupo do complexo de vírus da febre catarral maligna (VFCM). No Brasil, gammaherpesvirus ovino tipo 2 (OvHV-2), até o momento, é o único agente desse complexo associado ao desenvolvimento de FCM em ruminantes. O objetivo desse estudo foi determinar a prevalência do VFCM nos bovinos do estado do Paraná entre 2010 a 2019, demonstrar a distribuição geográfica da ocorrência do VFCM, caracterizar os achados histopatológicos nos rins dos bovinos infectados pelo VFCM, além de associar as lesões histológicas encontradas com a presença intralesional do vírus identificado por ensaios imuno-histoquímicos. O diagnóstico da infecção foi determinado pela imunorreatividade positiva para os antígenos intralesionais nos tecidos renais de bovinos através de ensaios imuno-histoquímicos utilizando um anticorpo monoclonal que detecta todos os membros do grupo de VFCM. Os antígenos intracitoplasmáticos de VFCM foram identificados em 39,6% (n=44) dos 111 rins de bovinos avaliados durante o período de 10 anos. As taxas de morbidade, mortalidade e letalidade foram 5,2%, 3,6% e 86,5%, respectivamente, com a predominância de casos na mesorregião Norte Central. Não foram identificados predominância sexual, racial e sazonalidade significativas, porém, bovinos com idade igual ou menor de 12 meses foram mais frequentemente acometidos. Nefrite intersticial linfocítica (93,2%; 41/44), degeneração vascular renal (84,1%; 37/44) e degeneração balonosa dos túbulos renais (81,8%; 36/44) foram os achados histopatológicos mais frequentemente observados em associação à infecção imunorreatividade positiva pelo VFCM. Os resultados sugerem que os bovinos foram infectados pelo VFCM, provavelmente OvHV-2, sendo endêmico no estado do Paraná. A utilização de um diagnóstico in situ resultou numa quantidade maior de casos de infecção do que foi anteriormente descrito e o rim deve ser coletado quando houver suspeita de infecção por OvHV-2 em bovinos. Adicionalmente, alterações degenerativas renais devem ser consideradas no diagnóstico histológico da infecção pelo VFCM em bovinos. Abstract: Malignant Catarrhal Fever (FCM) is a viral infectious disease caused by several agents of the Malignant Catarrhal Fever Virus (MCFV) complex group. In Brazil, gammaherpesvirus ovine-2 (OvHV-2), is the only agent of this complex associated with the development of MCF in ruminants. The objectives of this study were to determine the prevalence of MCFV in cattle in the state of Paraná between 2010 and 2019, to demonstrate the geographic distribution of the occurrence of MCFV, to characterize the histopathological findings in the kidneys of bovines infected with MCFV, and to associating the histological lesions found with the intralesional identification of MCFV antigens by immunohistochemistry. The diagnosis of the infection was determined by positive immunoreactivity for intralesional antigens in renal tissues of cattle using an immunohistochemical assay with a monoclonal antibody that detects all members of the MCFV. Intracytoplasmic MCFV antigens were identified on 39.6% (n = 44) of the 111 bovine kidneys evaluated athwart the 10-year period. The morbidity, mortality and lethality rates were 5.2%, 3.6% and 86.5%, respectively, with the predominance of cases in the North Central Paranaense mesoregion. Significant differences in sexual, cattle breeds, and seasonal predominance were not identified; however, calves with 12 months of age or younger were more frequently affected. Lymphocytic interstitial nephritis (93.2%; 41/44), renal vascular degeneration (84.1%; 37/44) and ballooning degeneration of the renal tubules (81.8%; 36/44) were principal histopathological findings in association with positive immunoreactivity to MCFV. The results suggest that the cattle were infected with a MCFV, probably OvHV-2, and MCFV is endemic in state of Paraná. The usage of in situ diagnosis has resulted in a greater number of cases of MCF than previously described and the kidney should be collected in cases of suspected infection with OvHV-2 in cattle. Additionally, renal degenerative changes should be considered in the histological diagnosis of MCFV-induced infections in cattle.Item Arranjo de plantas na produtividade e potencial fisiológico de sementes de chia(Universidade Estadual de Londrina, 2021-02-26) Catelan, Luana de Carvalho; Takahashi, Lúcia Sadayo Assari; Krohn, Nadia Graciele; Freiria, Gustavo HenriqueResumo: Salvia hispanica L. é uma espécie da família Lamiaceae, com destaque devido ao valor nutricional de seus grãos. Variações nos espaçamentos e densidades de semeadura, bem como a interação entre estes fatores, por alterarem a disponibilidade de recursos do ambiente, refletem diretamente no crescimento, desenvolvimento, rendimento e na qualidade de sementes. Neste sentido, objetivouse avaliar a produtividade e o potencial fisiológico de sementes de chia cultivadas sob diferentes espaçamentos e densidades de semeadura. Dois experimentos independentes, com dois espaçamentos (0,25 m e 0,45 m), foram conduzidos com delineamento experimental em blocos ao acaso, com quatro repetições. Ambos os experimentos constaram de cinco densidades de semeadura (8, 12, 16, 20 e 24 plantas m-1). Foram avaliados o desempenho produtivo da cultura (altura de plantas, massa seca de plantas e produtividade de sementes) e o potencial fisiológico de sementes (germinação, primeira contagem da germinação, comprimento e massa seca de plântula). Os dados foram submetidos à análise de variância, e se constatada diferença significativa, as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. A densidade de semeadura não influenciou na qualidade fisiológica das sementes de chia, enquanto para a produtividade o cultivo mais adensado (24 plantas m-1), em ambos os experimentos, resultou em maior produtividade de sementes. Abstract: Salvia hispanica L. is a species of the Lamiaceae family, which has been gaining prominence due to the nutritional value of its grains. Variations in spacing and sowing densities, as well as the interaction between these factors, as they alter the availability of environmental resources, directly reflect on growth, development, yield and seed quality. In this sense, the objective was to evaluate the productivity and the physiological potential of chia seeds grown under different spacing and sowing densities. Two independent experiments, with two spacings (0.25m and 0.45m), were conducted with a randomized block design with four replications. Both experiments consisted of five sowing densities (8, 12, 16, 20 and 24 plants m-1). The productive performance of the crop (height of plants, dry mass of plants and seed productivity) and the physiological potential of seeds (germination, first count of germination, length and dry mass of seedling) were obtained. The data were found in the analysis of variance, and if a summary difference was found, how averages were compared by the Tukey test at 5% probability. The sowing density did not influence the physiological quality of the chia seeds, whereas for productivity the denser cultivation (24 plants m-1), in both experiments, resulted in higher seed productivity.Item Transmissão interespécies de Edwardsiella ictaluri em três espécies de peixes (Oreochromis niloticus, Pseudoplatystoma corruscans e Clarias gariepinus)(Universidade Estadual de Londrina, 2021-02-26) Costa, Arthur Roberto da; Pereira, Ulisses de Pádua; Lorenzetti, Elis; Laterça, Maurício MartinsResumo: A piscicultura Brasileira alcança novos patamares a cada ano, com a tilápia-do-Nilo (Oreochromis niloticus) como espécie mais produzida, seguida pelos peixes nativos, como o tambaqui (Colossoma macropomum), o pintado (Pseudoplatystoma corruscans) e o pirarucu (Arapaima gigas). A intensificação da produção, a importação e fuga de espécies exóticas, podem contribuir para o estabelecimento de doenças alóctones no país, como os casos recentes de franciselose e Vírus da necrose infecciosa de baço e rim (ISKNV). Edwardsiella ictaluri é a bactéria responsável por ocasionar a septicemia entérica do bagre do canal (ESC), doença que causa prejuízos de milhões de dólares na indústria do bagre do canal (Ictalurus punctatus) nos Estados Unidos e, recentemente, se tornou um risco para a indústria do panga (Pangasianodon hypophthalmus) na Ásia e para a fauna nativa da Austrália, contudo, pouco se sabe sobre este patógeno na piscicultura nacional. No mês de abril de 2020, uma cepa de Edwardsiella sp. foi isolada causando doença em pintados, em uma piscicultura no noroeste do estado do Paraná. Os animais apresentavam ascite e sinais neurológicos, além de taxa de mortalidade maior que 50%. O objetivo deste trabalho foi confirmar se a bactéria se tratava de uma E. ictaluri e verificar se foi a responsável pela mortalidade dos animais; além de, avaliar se espécies exóticas introduzidas na região podem ter atuado como vetores para a disseminação deste patógeno nas pisciculturas locais. Foi conduzido um experimento de infecção por imersão e inoculação intraperitoneal, com pintados, tilápias do Nilo e bagres Africanos. Quarenta e oito animais de cada espécie foram divididos em seis aquários por espécie, contendo oito animais cada. Em paralelo, um experimento de infecção por coabitação com peixes de outras espécies previamente infectados foi realizado em três aquários contendo quatro peixes de cada espécie. Após o sequenciamento do gene 16S, a bactéria foi classificada como E. ictaluri. Todos os pintados desafiados por via intraperitoneal e imersão vieram a óbito em um período de onze e quinze dias, respectivamente. Houve mortalidade também nas coabitações entre todas as espécies. Os sinais clínicos observados foram compatíveis com os relatados na piscicultura e descritos na literatura como ESC. Nas análises histopatológicas foi possível notar a presença de infiltrado inflamatório, principalmente eosinófilos no cérebro de todas as espécies e no olho de tilápias; o fígado, principalmente dos pintados, apresentou alta depleção de glicogênio, congestão e necrose. A bactéria foi reisolada com sucesso de todas as espécies presentes no experimento, mostrando que mesmo os animais que não vieram a óbito se tornaram carreadores do patógeno. Com isto, comprovamos a suscetibilidade do pintado a E. ictaluri, adicionando-o a lista de espécies que podem ser acometidas por esta bactéria. Mais, demonstramos a capacidade de espécies exóticas invasivas, de atuarem como vetores desta bactéria. Abstract: Brazilian aquaculture keeps growing year after year, with Nile tilapia (Oreochromis niloticus) as the most produced species, followed by the native fishes, such as tambaqui (Colossoma macropomum), pintado (Pseudoplatystoma corruscans) and pirarucu (Arapaima gigas). The intensification of production and introduction of exotic species can contribute to the establishment of alien diseases, as seen in the recente cases of francisellosis and Infectious spleen and kidney necrosis virus (ISKNV). Edwardsiella ictaluri is the bacterial pathogen for the enteric septicemia of channel catfish (ESC), a disease responsible for losses of millions of dollars in the channel catfish (Ictalurus punctatus) industry in the United States and, recently became a risk for the panga (Pangasianodon hypophthalmus) production in Asia and for the Australia’s native fauna, however, little is known about this pathogen in the national pisciculture. In April 2020, a strain of Edwardsiella sp. was isolated causing disease in pintados, in a fish farm in the northwest of the Parana state. The diseased animals showed ascites and neurological signs, with q mortality rate greater than 50%. The objective of this work was to confirm if the bacterium was an E. ictaluri and to verify if it was the responsible for the fish mortality; in addition, to evaluate whether the exotic species introduced in the region could have acted as vectors for the spread of this pathogen in local fish farms. For this, an experimental infection by immersion and intraperitoneal inoculation was carried with pintado, Nile tilapia and African walking catfish. Forty-eight 48 animals of each specie were divided into six aquariums per species with eight individuals each. In parallel, a cohabitation infection experiment was carried in three aquariums with four fish from each species. After sequencing the 16S gene, the bacterium was identified as E. ictaluri. All pintados challenged by the intraperitoneal and immersion routes died after eleven and fifteen days, respectively. Also, mortality was verified in the cohabitation among all species. Observed clinical signs were compatible with those reported in the farm, and the ones described in the literature as ESC. Histopathology showed the presence of inflammatory infiltrate, mainly eosinophils, in the brain of all species and in the tilapia eye; the liver, especially the for pintado, showed high glycogen depletion, congestion and necrosis. The bacterium has been successfully reisolated from all the fish species, showing that even surviving animals can become carriers of the pathogen. With this, we proved the susceptibility of pintado to E. ictaluri, adding it to species that can be affected by this bacterium. Furthermore, we demonstrate the ability of invasive alien species to act as vectors for this bacterium.Item ‘Candidatus Mycoplasma haematohydrochoerus’ e Bartonella spp. em Capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) do Município de Pinhais, Paraná, Brasil(Universidade Estadual de Londrina, 2021-05-21) Santos, Nelson Jessé Rodrigues dos; Vieira, Rafael Felipe da Costa; Barros, Luiz Daniel de; Almeida, Jonatas Campos de; André, Marcos Rogério; Barros Filho, Ivan Roque deResumo: As capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris), maior espécie de roedor do mundo, estão distribuídas em todos os países da América do Sul que ficam a leste da Cordilheira dos Andes. Os desequilíbrios ecológicos causados pela presença humana provocam o deslocamento e expansão de suas populações, que convivem nos campos de cultivo e em parques urbanos, além das matas nativas. Esta espécie é fortemente associada ao parasitismo por carrapatos, potenciais transmissores de agentes infecciosos a animais e seres humanos. Existe, no entanto, uma lacuna a respeito de dois gêneros de bactérias hemotrópicas nestes roedores, a saber: Bartonella spp., reconhecida em várias espécies da mesma ordem, e os micoplasmas hemotrópicos (hemoplasmas), já descritos em capivaras. Neste sentido, o presente estudo objetivou detectar e caracterizar molecularmente hemoplasmas e verificar a ocorrência de Bartonella spp. em grupo de capivaras de vida livre. Para execução do estudo foram capturadas 17 capivaras (10 fêmeas e 7 machos) em armadilha tipo curral, instalada às margens de fragmento da Mata Atlântica, no município de Pinhais, Paraná. Após contenção química com uso de zarabatana e dardos contendo associação de anestésicos, foram anotados os dados de cada animal e coletadas amostras de sangue total e carrapatos. Uma alíquota de sangue de cada amostra foi submetida à avaliação de hematócrito e proteínas plasmáticas totais, outra submetida à extração de DNA para testes moleculares. Todos os carrapatos encontrados nos animais foram coletados e identificados por suas características morfológicas. Destes, onze tiveram suas glândulas salivares dissecadas e testadas pela PCR. Todas as amostras de sangue foram inicialmente submetidas à PCR para gene endógeno gapdh. Na sequência foram testadas para o gene 16S rRNA de Mycoplasma coccoides e 16S rRNA para o grupo dos hemoplasmas por meio de ensaios de PCR convencional. Aquelas que apresentaram resultado positivo foram testadas para o gene 23S rRNA de hemoplasmas. Para investigação de Bartonella spp. foi utilizada a PCR em tempo real (qPCR) baseada no gene nuoG. Todos os animais apresentavam parasitismo por carrapatos no momento da coleta, os quais foram identificados como Amblyomma dubitatum (26 machos, 16 fêmeas, 122 ninfas e 3 larvas; taxa de infestação: 9,82). Todas as amostras de sangue foram positivas para o gene gapdh e 16/17 (94,12%; IC 95% 73,02 - 98,95%) foram positivas para hemoplasmas, porém nenhuma foi positiva para Bartonella spp. Todas foram positivas para o gene gapdh e uma (9,09%) para o gene 16S rRNA. Oito amostras foram sequenciadas pelo método de Sanger em ambos os genes testados e apresentaram query coverage entre 97% e 100% para sequência de micoplasmas hemotrópicos depositadas no GenBank. Sequências do gene 16S rRNA dos hemoplasmas detectados demonstraram identidade variando de 99 -100% com hemoplasmas associados às capivaras. As sequências do gene 23S rRNA demonstraram identidade variando de 91,7% a 92,4% com ‘Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus’. Os dados indicam a existência de uma nova espécie de hemoplasma em capivaras do Brasil, aqui proposta como ‘Candidatus Mycoplasma haematohydrochaeris’. Com os achados também não é possível provar a participação das capivaras na epidemiologia de Bartonella spp. Abstract: Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris), largest living rodent in the world, are widely distributed for all South America countries located in East Andes. The ecological imbalances caused by human presence favor the displacement and expansion of its population, who live in cultivated fields and in urban parks, in addition to native habitat. This species is strongly associated with tick parasitism, potential vectors of infectious agents to animals and humans. However there is a gap regarding two genera of hemotropic bacteria in these rodents, Bartonella spp., recognized in several species of the same order, and the group of hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas), already described in capybaras. Thereby, the present study aimed to detect and molecularly characterize of hemoplasmas and to verify the occurrence of Bartonella spp. in a group of free-living capybaras. For the study execution, 17 capybaras (10 females and 7 males) were captured in a corral trap, positioned by side of an Atlantic Forest fragment, in the municipality of Pinhais, Paraná. After chemical restraint with blowguns and darts containing an association of anesthetic, the data of each animal were recorded and whole blood and tick samples were collected. One aliquot of blood of each sample was evaluated for packed cell volume and total plasma proteins, another was subjected to DNA extraction for molecular tests. All ticks found on animals were colected and identified by their morphological characteristics. Of these, eleven had their salivary glands dissected and tested by PCR. All blood samples were initially tested for endogenous gene gapdh by PCR. After, the 16S rRNA of Mycoplasma coccoides and the 16S rRNA for the group of hemoplasmas were tested by conventional PCR. Those that tested positive were also tested for the 23S rRNA hemoplasma gene. For Bartonella spp. screening a quantitative PCR (qPCR) was used based on nuoG gene. All animals presented tick parasitism at the time of sampling, which were identified as Amblyomma dubitatum (26 males, 16 females, 122 nymphs and 3 larvae; infestation rate: 9.82); All blood samples were positive for gapdh gene and 16/17 (94.12; CI: 73.02 - 98.95%) were positive for hemoplasmas, but none were positive for Bartonella spp. All salivary glands were positive for gapdh gene and one (9.09%) for 16S rRNA gene. Eight samples were sequenced by Sanger method in both tested genes and showed query coverage between 97% and 100% for hemotropic mycoplasma sequences archived on GenBank. Sequences of 16S rRNA gene of hemoplasmas detected showed identity ranging from 99% to 100% with capybaras-associated hemoplasmas. The sequences of 23S rRNA gene showed identity ranging from 91.7% to 92.4% to 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus'. The data indicate the existence of a new species of hemoplasma in capybaras from Brazil, here proposed as ‘Candidatus Mycoplasma haematohydrochaeris’. By the findings it is also not possible to prove the participation of capybaras in the epidemiology of Bartonella spp.Item Dosagem de Dimetilarginina Simétrica (SDMA) e a ultrassonografia Doppler de artéria renal e uterina em cadelas com complexo hiperplasia endometrial cística-piometra(Universidade Estadual de Londrina, 2021-06-07) Correia, Letícia Amanda dos Santos; Martins, Maria Isabel Mello; Gava, Fábio Nelson; Lopes, Maria DeniseResumo: O Complexo Hiperplasia Endometrial Cística (HEC)– piometra é uma afecção frequente de trato reprodutivo feminino de cadelas de caráter urgente e a lesão renal aguda é de comum ocorrência. Este estudo teve como objetivo a realização de exames hematológicos, bioquímicos, mensuração da SDMA, avaliação Dopplervelocimétrica de artérias uterinas e renais de paciente com complexo Hiperplasia Endometrial Cística-piometra no momento do diagnóstico e a média 6 meses para avaliação renal. Foram avaliadas cadelas em dois momentos: M1 (dia do diagnóstico de HEC-piometra) com n=36 e M2 (retorno médio após 6 meses após tratamento) com n=16. Para o grupo controle foram selecionadas seis cadelas sem alterações em exames hematológicos e bioquímicos, sem histórico de doenças anteriores, nas quais foram realizadas avaliação ultrassonográfica Doppler de artéria uterina e artérias renais. Em M1 foi realizado hemograma, creatinina, ureia, e SDMA sérico (n=15), relação proteína-creatinina urinária (UPC), aferição de pressão arterial sistólica, ultrassom Doppler de artéria uterina e das artérias renais, cultura de secreção uterina. Em M1 as pacientes foram classificadas em azotêmicas (AZO) e não azotêmicas (NAZO). No M2 foi realizado hemograma, creatinina, ureia, e SDMA sérico (n=16), UPC, aferição de pressão arterial sistólica e ultrassom Doppler de artérias renais (n=13). A comparação entre o M1 e M2 foi realizada entre os animais que estiveram presente nos dois momentos. Para avaliação de significância estatística foi considerado p<0,05. No M1 não houve diferença entre pacientes AZO e NAZO para leucócitos (p= 0,092), SDMA (p=0,059), porém as médias de SDMA estavam acima do limite de referência nos dois grupos. Em cadelas com complexo HEC -piometra o SDMA sérico obteve diferença (p=0,009) com valores superiores quando cérvix fechada comparadas a aberta. Em M2 os valores médios de creatinina, ureia e SDMA séricos foram de 0,92 mg/dL, 33,8 mg/dL, e 11,8μg/dL, respectivamente, e não houve azotemia em nenhum dos casos avaliados, porém houve aumento dos limites de referência do SDMA em duas cadelas (15 μg/dL) totalizando 12,5% dos animais. A comparação entre M1 e M2 foi significativa para SDMA e ureia (p=0,008 e p=0,037) e não significativa entre creatinina (p= 0,058). A UPC média dos animais de M1 foi de 0,82±0,35, com 71,5% considerado proteinúrico e 28,5% proteinúricos limítrofes, e em M2 a média foi de 0,25±0,17 com apenas uma paciente considerada proteinúrica. A média da pressão arterial sistólica em M1 e M2 foi de 123,86±28,77 e 144,58±11,37 respectivamente, onde a maioria das cadelas (66,6%) obtiveram pressão arterial em M2 classificada em pré-hipertensas e hipertensas com diferença estatística (p=0,021). Para avaliação ultrassonográfica houve diferença estatística entre animais controle e animais com HEC-piometra nos parâmetros velocidade de pico sistólico (PSV) artéria uterina (p=0,001), velocidade final diastólica (EDV) de artéria uterina (p<0,001), índice de pulsatilidade (PI) de artéria uterina (p=0,003), índice de resistividade (RI) de artéria uterina (p=0,001). Houve diferença significativa entre o grupo AZO E NAZO em PI de artéria renal esquerda e direita e RI de artéria renal direita (p=0,008), porém na comparação entre os momentos M1 e M2 não houve diferença, demonstrando persistência das alterações Dopplervelocimétricas renais a longo prazo. A presença de correlações em M1 foi observada entre SDMA e Creatinina (r= 0,721), SDMA e ureia (r= 0,808), SDMA e EDV ART UTER (r= 0,722), SDMA e PI RD (r=0,789), SDMA e PSV RIM ESQ (r=0,840) e SDMA e EDV RIM ESQ (r= 0,660), sendo correlações positivas fortes e moderadas. Este trabalho permite afirmar que o SDMA se encontra aumentado em pacientes com complexo HEC-piometra não azotêmicos e que a pressão arterial na maioria dos animais pode estar aumentada a longo prazo. Além das mensurações Dopplervelocimétricas de artéria uterina se encontram aumentadas em cadelas com HEC-Piometra e possuir altas correções com aumento de EDV de artéria uterina com SDMA e há aumento do fluxo sanguíneo de artérias renais no momento do diagnóstico e a média 6 meses. Abstract: The Cystic Endometrial Hyperplasia Complex (CEC) – pyometra is a frequent affection of the female reproductive tract of urgent female dogs and acute kidney injury is a common occurrence. This study aimed to carry out hematological and biochemical tests, measurement of SDMA, Dopplervelocimetric assessment of uterine and renal arteries of a patient with Cystic Endometrial Hyperplasia-pyometra complex at the time of diagnosis and an average of 6 months for renal assessment. Bitches were evaluated in two moments: M1 (day of diagnosis of HEC-pyometra) with n=36 and M2 (mean return after 6 months after treatment) with n=16. For the control group, six bitches without alterations in hematological and biochemical exams, with no history of previous diseases, were selected, in which Doppler ultrasound evaluation of the uterine artery and renal arteries was performed. In M1, blood count, creatinine, urea, and serum SDMA (n=15), urinary protein-creatinine ratio (UPC), systolic blood pressure measurement, Doppler ultrasound of the uterine artery and renal arteries, and culture of uterine secretion were performed. In M1 the patients were classified as azotemic (AZO) and non-azotemic (NAZO). In M2, blood count, creatinine, urea, and serum SDMA (n=16), UPC, systolic blood pressure measurement and Doppler ultrasound of renal arteries (n=13) were performed. The comparison between M1 and M2 was performed between the animals that were present at both times. For the evaluation of statistical significance, p<0.05 was considered. At M1 there was no difference between AZO and NAZO patients for leukocytes (p=0.092), SDMA (p=0.059), but the SDMA means were above the reference limit in both groups. In bitches with HEC-pyometra complex, serum SDMA had a difference (p=0.009) with higher values when cervix closed compared to open. In M2, the mean values of serum creatinine, urea and SDMA were 0.92 mg/dL, 33.8 mg/dL, and 11.8 μg/dL, respectively, and there was no azotemia in any of the cases evaluated, but there was an increase of the SDMA reference limits in two bitches (15 μg/dL) totaling 12.5% of the animals. The comparison between M1 and M2 was significant for SDMA and urea (p=0.008 and p=0.037) and not significant for creatinine (p= 0.058). The mean UPC of the animals in M1 was 0.82±0.35, with 71.5% considered proteinuric and 28.5% borderline proteinuric, and in M2 the mean was 0.25±0.17 with only one patient considered proteinuric. The mean systolic blood pressure in M1 and M2 was 123.86±28.77 and 144.58±11.37 respectively, where most bitches (66.6%) had blood pressure in M2 classified as pre-hypertensive and hypertensive with statistical difference (p=0.021). For ultrasonographic evaluation, there was statistical difference between control animals and animals with HEC-pyometra in the parameters of peak systolic velocity (PSV) uterine artery (p=0.001), end diastolic velocity (EDV) of uterine artery (p<0.001), pulsatility index (PI) of uterine artery (p=0.003), resistivity index (RI) of uterine artery (p=0.001). There was a significant difference between the AZO and NAZO group in PI of the left and right renal artery and RI of the right renal artery (p=0.008), but when comparing moments M1 and M2 there was no difference, demonstrating the persistence of long-term renal Doppler velocimetric alterations deadline. The presence of correlations in M1 was observed between SDMA and Creatinine (r= 0.721), SDMA and urea (r= 0.808), SDMA and EDV ART UTER (r= 0.722), SDMA and PI RD (r=0.789), SDMA and PSV RIM ESQ (r=0.840) and SDMA and EDV RIM ESQ (r= 0.660), with Strong and moderate positive correlations. This work allows us to affirm that SDMA is increased in patients with non-azotemic HEC-pyometra complex and that blood pressure in most animals may be increased in the long term. In addition to Doppler velocimetric measurements of the uterine artery, they are increased in bitches with HEC-Piometra and have high corrections with an increase in uterine artery EDV with SDMA and there is increased blood flow to renal arteries at the time of diagnosis and an average of 6 months.Item Compatibilizantes para materiais biodegradáveis de amido e poli (ácido lático) produzidos por extrusão e injeção termoplástica(Universidade Estadual de Londrina, 2021-06-14) Silva, Samuel Camilo da; Yamashita, Fábio; Grossmann, Maria Victoria Eiras; Shirai, Marianne AyumiResumo: Nos últimos anos muitos estudos têm focado no desenvolvimento de materiais biodegradáveis que sejam capazes de substituir os plásticos provenientes de petróleo. Pesquisas envolvendo a aplicação de amido para produção de materiais biodegradáveis demonstrou ser interessante, devido ao seu baixo custo em relação aos polímeros biodegradáveis comerciais, como o poli (ácido lático) (PLA), e grande disponibilidade. No entanto materiais a base de amido não têm propriedades mecânicas e processabilidade adequadas para produção e uso em escala comercial, necessitando de misturas (blendas) com outros polímeros biodegradáveis para melhorar essas propriedades. Entretanto, estas blendas necessitam de compatibilizantes devido à imiscibilidade entre o amido e o polímero, que prejudica as propriedades mecânicas e processabilidade. A principal ação dos compatibilizantes é atuar na região interfacial de blendas poliméricas, reduzindo sua tensão e melhorando as propriedades do material. O objetivo do estudo foi estudar diferentes compatibilizantes (3-metacriloxipropiltrimetoxisilano, ácido cítrico e anidrido maleico) sobre as propriedades funcionais de materiais biodegradáveis de amido e poli (ácido lático) (PLA) produzidas por injeção termoplástica. O ácido cítrico foi considerado o melhor compatibilizante para estes materiais, pois melhorou a processabilidade e os materiais apresentaram propriedades adequadas para aplicações onde são exigidas boa resistência mecânica e menor taxa de biodegradação. Além disso os materiais contendo ácido cítrico e anidrido maleico foram mais uniformes, do ponto de vista morfológico. Abstract: In recent years, many studies have focused on developing biodegradable materials to replace petroleum-based plastics. Studies using starch to produce biodegradable materials have proved attractive due to its low cost in relation to comercial biodegradable polymers, such as poly (lactic acid) (PLA), and availability. However, starch-based materials do not have adequate mechanical properties and processability for production and use on a commercial scale, requiring mixtures (blends) with other biodegradable polymers to improve these properties. However, these blends need compatibilizers due to the immiscibility between the starch and the polymer, impairing the materials' mechanical properties and processability. The main action of the compatibilizers is to act in the interfacial region of polymeric blends, reducing their tension and improving the material's properties. The study aimed to study different compatibilizers (3-(trimethoxysilyl)propyl methacrylate, citric acid, and maleic anhydride) on the functional properties of biodegradable starch and poly (lactic acid) (PLA) materials produced by thermoplastic injection. Citric acid was considered the best compatibilizer for these materials because it improved the processability, and the materials presented properties suitable for applications Where good mechanical resistance and lower biodegradation speed are required. In addition, the materials containing citric acid and maleic anhydride were more uniform from the morphological point of view.Item Microbiota vaginal avaliada por sequenciamento de DNA de nova geração e aspectos reprodutivos de vacas leiteiras(Universidade Estadual de Londrina, 2021-06-18) Candotti, Anne Kemmer Souza; Seneda, Marcelo Marcondes; Costa, Márcio Carvalho da; Chiaratti, Marcos Roberto; Lorenzetti, Elis; Zangirolamo, Amanda FonsecaResumo: A microbiota vaginal tem demonstrado relevância no âmbito da reprodução de bovinos pois alterações em sua composição podem influenciar a fertilidade. A tecnologia de sequenciamento de nova geração (SNG), Illumina, tem sido utilizada como padrão, contudo, para uma maior precisão nas análises, a tecnologia de leituras longas, PacBio, vem sendo utilizada para melhorar a sensibilidade e especificidade do perfil taxonômico, além de reduzir o risco de falsos positivos. Com o objetivo de caracterizar a microbiota vaginal de vacas leiteiras por SNG e relacionar com aspectos reprodutivos, dois estudos foram desenvolvidos. Em ambos, após o SNG, foi analisado a abundância relativa das bactérias, e calculado os índices de Alfa e Beta diversidade. O primeiro estudo identificou a microbiota vaginal de vacas da raça holandês preto e branco (HPB; n = 13) por meio do sequenciamento de leituras longas de DNA (PacBio sequencing) e comparou os dados com a técnica convencional de leituras curtas (Illumina sequencing). Este é um dos primeiros estudos a buscar leituras em nível de espécie nas bactérias do ambiente vaginal de vacas. Por meio da plataforma PacBio foram obtidas 366.509 leituras e 631.586 leituras pela Illumina. Foi possível a identificação de 27 versus 28 filos e 677 versus 662 gêneros, no sequenciamento por PacBio e Illumina, respectivamente. Ainda, foram identificadas 677 espécies pelo PacBio. A alfa diversidade demonstrou uma forte correlação (r= 0,758), de maneira significativa (p=0,003), entre o número de espécies (PacBio) e gêneros (Illumina) considerando as diferentes técnicas. O segundo estudo teve como objetivo investigar a microbiota vaginal em vacas gestantes e não gestantes por meio da plataforma de sequenciamento PacBio. Para esse estudo foram colhidos swabs vaginais de vacas leiteiras (n=13), das quais 5 ficaram gestantes (GE) e 8 permaneceram não gestantes (NG) após a inseminação artificial realizada posterior à identificação de cio natural nessas fêmeas. Foram obtidas 366.509 leituras bacterianas, sendo agrupadas em 27 filos e 677 gêneros. Os filos mais abundantes em todas as amostras avaliadas foram Firmicutes (58%) e Bacterioidetes (32%). Na análise de beta diversidade foi observado diferença comparando as comunidades bacterianas dos grupos GE (p = 0,004) e NG (p = 0,011). Além disso, houve um agrupamento evidente das vacas que permaneceram não gestantes, demostrando que suas comunidades bacterianas são mais semelhantes quando comparado com aquelas presentes em vacas gestantes. Abstract: The vaginal microbiota has been shown to be relevant in the field of bovine reproduction, as changes in its composition can influence fertility. The next generation sequencing technology (NGS), Illumina, has been used as a standard, however, for greater accuracy in the analysis, the long-read technology, PacBio, has been used to improve the sensitivity and specificity of the taxonomic profile, in addition to reduce the risk of false positives. To characterize the vaginal microbiota of dairy cows by NGS and relate it to reproductive aspects, two studies were developed. In both, after NGS, the relative abundance of bacteria was analyzed, and the Alpha and Beta diversity indices were calculated. The first study identified the vaginal microbiota of black and white Dutch cows (HPB; n = 13) by sequencing long DNA reads (PacBio sequencing) and compared the data with the conventional technique of short readings (Illumina sequencing). This is one of the first studies to look for species-level readings on bacteria in the vaginal environment of cows. Through the PacBio platform, 366,509 readings and 631,586 readings were obtained by Illumina. It was possible to identify 27 versus 28 phyla and 677 versus 662 genera, in sequencing by PacBio and Illumina, respectively. Furthermore, 677 species were identified by PacBio. Alpha diversity showed a strong correlation (r= 0.758), significantly (p=0.003), between the number of species (PacBio) and genera (Illumina) considering the different techniques. The second study aimed to investigate the vaginal microbiota in pregnant and non-pregnant cows using the PacBio sequencing platform. For this study, vaginal swabs were collected from dairy cows (n=13), of which 5 became pregnant (PG) and 8 remained non-pregnant (NP) after artificial insemination performed after the identification of natural heat in these females. 366,509 bacterial readings were obtained, being grouped into 27 phyla and 677 genera. The most abundant phyla in all samples evaluated were Firmicutes (58%) and Bacterioidetes (32%). In the beta diversity analysis, a difference was observed comparing the bacterial communities of the PG (p = 0.004) and NG (p = 0.011) groups. Furthermore, there was a clear grouping of cows that remained NP, demonstrating that their bacterial communities are more similar when compared to those present in PG cows.Item Desenvolvimento de materiais biodegradáveis contendo amido e casca de soja (Glycine max (L.)) produzidos por injeção termoplástica(Universidade Estadual de Londrina, 2021-06-21) Bortolatto, Rubiane; Yamashita, Fábio; Zanela, Juliano; Garcia, Patrícia Salomão; Spier, Michele Rigon; Oliveira, Suzana Mali de; Bittencourt, Paulo Rodrigo StivalResumo: Tendo em vista a importância de se desenvolver materiais biodegradáveis para substituir os produzidos com plásticos convencionais, e o fato de a casca de soja ser um resíduo agroindustrial abundante no Brasil e no mundo, com potencial para uso em larga escala, o objetivo deste trabalho foi estudar o uso de casca de soja moída (CS) e fibras de celulose extraídas da casca de soja (FC) na composição de materiais de amido termoplástico (ATp) e de ATp + álcool polivinílico (PVA). Foram desenvolvidas 20 formulações e 2 controles, e os materiais foram produzidos por extrusão seguida de injeção termoplástica, para produção de corpos-de-prova rígidos. As formulações foram divididas em 5 grupos: ATp + CS (4 a 19%); ATp + 6% de PVA + CS (4 a 19%); ATp + FC (4 a 19%); ATp + 6% de PVA + FC (4 a 19%). A formulação dos materiais controles foram de ATp e ATp + 6% de PVA. A casca de soja e as fibras de celulose foram caracterizadas por espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os corpos-de-prova foram analisados por FTIR, ensaios mecânicos, perda de massa em água e variação dimensional após injeção. A adição de CS ao amido termoplástico não diminuiu a processabilidade do material. Teores de FC acima de 10% dificultaram a injeção do material, deixando-o quebradiço. O uso de PVA nas formulações melhorou o acabamento dos corpos-de-prova. Tanto a FC quanto a CS reduziram a capacidade de alongamento dos materiais em relação aos seus controles, e a formulação contendo ATp + 6% PVA + 19% FC apresentou a mais baixa capacidade de alongamento (39,8%), 74,9% menor que o controle e a mais alta resistência à tração (3,9 MPa), 22% maior que o controle. Tanto a CS quanto a FC diminuíram a variação dimensional dos materiais quando comparado com os controles, e quanto maior a concentração menor a variação. Materiais contendo PVA apresentaram maior estabilidade dimensional, principalmente com teores mais altos (15 e 19%) de CS ou FC. A adição de CS e FC aumentou a rigidez dos materiais em relação aos controles. ACS apresentou efeito reforçador nos materiais nas concentrações entre 8% e 15%, e a FC, na concentração de 11%, e a FC associada ao PVA, nas concentrações de 11% e 19%. A casca de soja não diminuiu a processabilidade dos materiais produzidos com ATp e ATp + PVA,além de não precisar de tratamento prévio como as fibras de celulose. Desta forma, os materiais biodegradáveis rígidos de amido termoplástico contendo casca de soja moída têm um excelente potencial para serem produzidos por extrusão e injeção termoplástica em escala comercial. Abstract: Considering the importance of developing biodegradable materials to replace those produced with conventional plastics and the fact that soybean hull is an abundant agro-industrial residue in Brazil and worldwide, with potential for large-scale use, the objective of this work was to study ground soybean hull (SH) and cellulose fiber extracted from soybean hull (CF) in the composition of thermoplastic starch (TpS) and TpS + polyvinyl alcohol (PVA) materials. 20 formulations and 2 controls were developed, and the materials were produced by extrusion and thermoplastic injection to produce rigid specimens. The formulations were divided into 5 groups: TpS + SH (4 to 19%); TpS + 6% PVA + SH (4 to 19%); TpS + CF (4 to 19%); TpS + 6% PVA + CF (4 to 19%). The formulations of the control materials were TpS and TpS + 6% PVA. Soybean hull and cellulose fibers were characterized by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and scanning electron microscopy (SEM). The specimens were analyzed by FTIR, mechanical testing, mass loss in water, and dimensional variation after injection. The addition of soybean hull to thermoplastic starch did not reduce the material's processability. CF contents above 10% made it difficult to inject the material, leaving it brittle. The use of PVA in the formulations improved the finish of the specimens. Both cellulose fiber and soybean hull reduced the elongation capacity of the materials compared to their control ones, and the formulation containing TpS + 6% PVA + 19% CF had the lowest elongation capacity (39.8%), 74.9% lower than the control material and the highest tensile strength (3.9 MPa), 22% higher than the control material. Both SH and CF decreased the dimensional variation of materials compared to the control ones, and the higher the concentration, the smaller the variation. Materials containing PVA showed greater dimensional stability, especially with higher contents of SH or CF (15 and 19%). The addition of SH and CF increased the stiffness of the materials compared to the control ones. SH had a reinforcing effect on materials at concentrations between 8% and 15%, CF at a concentration of 11%, and CF associated with PVA at concentrations between 11% and 19%. Soybean hull did not reduce the processability of TpS and TpS + PVA materials and did not need prior treatment like cellulose fibers. Thus, rigid biodegradable thermoplastic starch materials containing ground soybean hull have an excellent potential to be produced by thermoplastic extrusion and injection on a commercial scale.Item Relação da concentração de proAKAP4 e fertilidade do sêmen bovino Bos indicus empregado em programas de IATF(Universidade Estadual de Londrina, 2022-02-17) Almeida, Ana Beatriz Marques; Martins, Maria Isabel Mello; Rizzoto, Guilherme; Crespilho, André Maciel; Barreiros, Thales Ricardo Rigo; Morotti, FábioResumo: O sucesso da Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) se deve, em parte, a touros férteis que produzem doses de sêmen de qualidade. A avaliação seminal pré e pós descongelação, podem ser conduzidas por meio da cinética espermática, morfologia e morfo funcionalidade. Entretanto, estudos têm demonstrado que somente estas análises in vitro não são suficientes para predizer a fertilidade de um ejaculado. Neste contexto, nos últimos anos, experimentos têm buscado por biomarcadores proteicos que apresentem relação com a fertilidade. A AKAP4 e sua precursora, proAKAP4, ganharam destaque, por serem polipeptídios de presentes no flagelo espermático, que demonstraram, relação com a motilidade dos espermatozoides e com taxas de fertilidade a campo. Diante do exposto, objetivou-se quantificar as concentrações de proAKAP4 em doses convencionais (n:8) e sexadas (n:6) de espermatozoides criopreservados de reprodutores Bos indicus; além de relacionar a proAKAP4 em doses de sêmen de touros Nelore (n:9) a taxas de prenhez obtidas por meio de programa de IATF. Além disso, 1507 vacas foram inseminadas artificialmente em tempo fixo com doses de 9 partidas de sêmen convencional avaliadas. As doses foram descongeladas à 37ºC por 30 segundos, em seguida foi conduzida a análise da cinética espermática, morfologia e morfo funcionalidade. As concentrações de proAKAP4 foram mensuradas por meio de kit ELISA seguindo as recomendações do fabricante. O teste T foi utilizado para comparar variáveis entre dois grupos (sêmen sexado para fêmea vs. sêmen convencional), a correlação de Pearson avaliou as relações entre a proAKAP4 e as características cinéticas e morfofuncionais, e para mensurar a influência da proAKAP4 sobre parâmetros in vitro foi conduzida uma regressão linear. Considerou-se significância estatística quando p<0,05. As doses de sêmen sexadas carreadoras do cromossomo X apresentaram maior concentração de proAKAP4 (67,54±17,40 ng/106 de espermatozoides) quando comparadas às doses convencionais (29,76±4,16 ng/106 de espermatozoides) (p=0,033). Contudo, não foram encontradas relações entre a quantidade de proAKAP4 e as variáveis cinéticas e morfofuncionais nos espermatozoides sexados (p>0,05). Nas doses seminais convencionais a proAKAP4 influenciou a motilidade espermática (TM: r2 = 0.49, P = 0.03); PM: r2 = 0.63, P=0.01) e as taxas de concepção obtidas na IATF (r2 = 0.51, P=0.03). Finalmente, concluiu-se que a proAKAP4 não é um biomarcador fidedigno para sêmen sexado para fêmea, contudo é um excelente indicador de fertilidade em doses de sêmen convencional, e assim, acredita-se que futuramente poderá ser uma ferramenta na seleção de touros Bos indicus férteis. Abstract: The success of Fixed Time Artificial Insemination (FTAI) is related to fertile bulls which produces sperm presenting high quality. The sperm evaluation before and post thawing is conducted through sperm kinetics, morphology and morphofunctionality. However, studies have shown that these in vitro analyzes may not be sufficient to predict the fertility of an ejaculate. In recent years, experiments have searched for protein biomarkers that are related to fertility. AKAP4 and its precursor, proAKAP4, are being recognized, since these polypeptides are present in the sperm flagellum, and demonstrated relationship to sperm motility and fertility rates. The study aimed to quantify the concentrations of proAKAP4 in conventional (n:8) and X-sorted (n:6) doses of cryopreserved sperm from Bos indicus breeders; in addition to relating the proAKAP4 from sperm straws of Nelore bulls (n:9) to pregnancy rates obtained by a FTAI program. Besides, 1507 cows were artificially inseminated at a fixed time with doses of 9 batches of conventional semen evaluated. The doses were thawed at 37ºC for 30 seconds, then the analysis of sperm kinetics, morphology and morphofunctionality was conducted. ProAKAP4 concentrations were measured using an ELISA kit following the manufacturer's recommendations. The T test was used to compare variables between two groups (X-sorted sperm vs. conventional sperm), the Pearson's correlation evaluated the relationships between proAKAP4 and kinetic and morphofunctional characteristics, and to measure the influence of proAKAP4 on in vitro parameters a linear regression was carried out, considering statistical significance when P<0.05. The X-sorted sperm had a higher concentration of proAKAP4 (67.54±17.40 ng/106spermatozoa) when compared to conventional doses (29.76±4.16 ng/106spermatozoa) (P= 0.033). However, no relationships were found between the proAKAP4 and the kinetics or morphofunctional variables in X-sorted sperm (P>0.05). At conventional sperm straws, proAKAP4 influenced sperm motility (TM: r2=0.49, P=0.03); PM: r2=0.63, P=0.01) and the conception rates obtained in the FTAI (r2=0.51, P=0.03). Finally, it was concluded that proAKAP4 is not a reliable biomarker for X-sorted sperm, however it is an excellent indicator of fertility in conventional sperm samples, and thus, it is believed that in the future it may be a helpful tool to selecting Bos indicus bulls.Item Mycoplasma ovis e patógenos transmitidos por carrapatos em cavalos e carrapatos de um assentamento rural do sul do Brasil(Universidade Estadual de Londrina, 2022-02-21) Kakimori, Monica Tiemi Aline; Vieira, Rafael Felipe da Costa; Garcia, João Luís; Otomura, Flávio Haragushiku; Barros, Luiz Daniel deResumo: Patógenos transmitidos por carrapatos (PTC) são um importante grupo de organismos que podem afetar animais e seres humanos na América do Sul. Hemoplasmose em cavalos pode ser considerada uma infecção acidental ou incomum. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar a ocorrência dos agentes como Theileria equi, Babesia caballi e Ehrlichia sp., e hemoplasmas em equinos de um assentamento rural, localizado no Sul do Brasil, identificar as espécies de carrapatos e determinar os fatores associados à exposição/infecção. Amostras de sangue de 22 cavalos foram triadas para anti-T. equi e anti-Ehrlichia spp. anticorpos por ensaios de anticorpos fluorescentes indiretos (IFA). As amostras também foram testadas por ensaios de PCR visando o gene 18S rRNA de T. equi e B. caballi, e o gene 16S rRNA de hemoplasmas. Além disso, ensaios de PCR direcionados ao gene 16S rRNA, proteína formadora de ligação dissulfeto (dsb) de Ehrlichia spp. também foram realizados. Carrapatos foram coletados dos animais (inspeção) e do ambiente (arrasto de flanela e armadilhas de gelo seco), estes foram identificados por meio de chave de identificação. Adicionalmente 28 carrapatos adultos provenientes dos animais e 4 ninfas provenientes do ambiente, tiveram as glandulas salivares extraídas e triadas para Ehrlichia spp. (dsb gene) e Mycoplasma spp. (16S gene). Anticorpos para T. equi e Ehrlichia spp. foram detectados em 22/09 (40,91%; IC 95%: 23,26-61,27%) e 22/07 (31,81%; IC 95%: 16,36-52,68%) cavalos, respectivamente. DNA de T. equi, B. caballi e Mycoplasma spp. foram encontrados em 13/22 (59,09%), 1/22 (4,55%) e 11/22 (50%) cavalos, respectivamente, e todos foram negativos para Ehrlichia spp. Todas as sequências apresentaram ≥99% de identidade com múltiplas sequências de T. equi (18S rRNA), B. caballi (rap-1) e Mycoplasma ovis (16S rRNA) depositadas no GenBank. Todos os carrapatos adultos foram identificados como Dermacentor nitens 44/47 (93,62%) e Rhipicephalus microplus 3/47 (6,38%). Todas as glândulas salivares foram negativas para o gene dsb de Erhlichia spp. Dois de 28 (7,14%) glândulas provenientes de adultos dos animais foram positivos por PCR convencional, 11/28 (39,29%) e duas de 4 ninfas (50%) provenientes do ambiente foram positivos por PCR real time para o gene 16S rRNA para Mycoplasma spp. Este é o primeiro relato de infecção por M. ovis em equinos no Brasil, utilizando técnicas moleculares. Mycoplasma spp. foi detectada em glândulas salivares de D. nitens e R. microplus, sendo necessários mais estudos para esclarecer a ação vetorial dessas espécies. Foi possível observar uma baixa ocorrência de Ehrlichia spp. e ausência de PCR positivo em região onde não foram encontrados carrapatos Amblyomma sculptum. Abstract: Tick-borne pathogens (TBP) are an important group of organisms that can affect animals and humans in South America. Hemoplasma in horses can be considered an accidental or unusual infection. Therefore, this study aimed to determine the occurrence of agents such as Theileria equi, Babesia caballi and Ehrlichia sp., and hemoplasmas in horses from a rural settlement located in southern Brazil, identify the tick species and determine the factors associated with exposure/infection. Blood samples from 22 horses were screened for anti-T. equi and anti-Ehrlichia spp. antibodies by indirect fluorescent antibody (IFA) assays. The samples were also tested by PCR assays targeting the 18S rRNA gene from T. equi and B. caballi, and the 16S rRNA gene from hemoplasmas. In addition, PCR assays targeting the 16S rRNA gene, a disulfide bond forming protein (dsb) from Ehrlichia spp. were also carried out. Ticks were collected from the animals (inspection) and from the environment (flannel trawling and dry ice traps), and they were identified by means of an identification key. Additionally, 28 adult ticks from the animals and 4 nymphs from the environment had their salivary glands extracted and screened for Ehrlichia spp. (dsb gene) and Mycoplasma spp. (16S gene). Antibodies to T. equi and Ehrlichia spp. were detected in 09/22 (40.91%; 95% CI: 23.26-61.27%) and 07/22 (31.81%; 95% CI: 16.36-52.68%) horses, respectively. DNA from T. equi, B. caballi and Mycoplasma spp. were found in 13/22 (59.09%), 1/22 (4.55%) and 11/22 (50%) horses, respectively, and all were negative for Ehrlichia spp. All sequences showed ≥99% identity with multiple T. equi (18S rRNA), B. caballi (rap-1) and Mycoplasma ovis (16S rRNA) sequences deposited in GenBank. All adult ticks were identified as Dermacentor nitens 44/47 (93.62%) and Rhipicephalus microplus 3/47 (6.38%). All salivary glands were negative for Erhlichia spp. by dsb gene. Two of 28 (7.14%) glands from adult animals were positive by conventional PCR, 11/28 (39.29%) and two of 4 nymphs (50%) from the environment were positive by real time PCR for the gene 16S rRNA for Mycoplasma spp. This is the first report of M. ovis infection in horses in Brazil, using molecular techniques. Mycoplasma spp. was detected in salivary glands of D. nitens and R. microplus, and further studies are needed to clarify the vectorial action of these species. It was possible to observe a low occurrence of Ehrlichia spp. and absence of positive PCR in region where Amblyomma sculptum ticks were not found.Item Uso de silagem de grão de milho reidratado com soro de leite na alimentação de leitões desmamados(Universidade Estadual de Londrina, 2022-02-24) Zanin, Ediane; Bumbieris Junior, Valter Harry; Carvalho, Rafael Humberto; Oba, Alexandre; Santos, José Maurício Gonçalves dos; Silva, Marcos Augusto Alves da; Silva, Caio Abércio daResumo: Leitões desmamados necessitam de dietas que assegurem seu desempenho zootécnico e estimulem a iniciação alimentar. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos do soro de leite fluído na qualidade da silagem de grãos de milho reidratados, bem como o uso da silagem sob o desempenho zootécnico e a preferência alimentar de leitões desmamados. Foram realizados dois experimentos, no primeiro foi avaliado a qualidade de silagens de grãos de milho reidratados com Água; Soro de leite em pó (SLP); Soro de leite fluído (SLF); Soro de leite em pó, acrescido de aditivo (SLPA); e Soro de leite fluído, acrescido de aditivo (SLFA). A SLP apresentou o menor valor de FDA (14,7 g/kg) e a SLF apresentou os menores valores de lignina (3,3 g/kg) e das N-NH3 às 240 horas de exposição ao ar (0,7 g/kg), com valor de pH final de 4,40. O uso de soro de leite se apresenta como alternativa sustentável à água para reidratar grãos de milho, além de proporcionar boa qualidade e estabilidade das silagens. No segundo experimento foram avaliados 120 leitões com 21 dias de idade, durante a fase pré-inicial I (21 a 32d) quanto ao desempenho produtivo submetidos com as seguintes dietas experimentais: ração controle a base de milho grão seco (RC); ração com silagem de grão de milho reidratado com água (SGMR+A); ração com SGMR com água, acrescido com inoculante (SGMR+AI); e ração com SGMR com soro de leite (SGMR+SL). Para avaliar a preferência alimentar, 20 leitões desmamados foram submetidos a duas fases de avaliação, a fase restrita envolveu o fornecimento da dieta referência (D1, grão de milho seco), seguido da dieta teste (D2, silagem de grão reidratado com soro de leite) por cinco dias cada, e na livre escolha foram ofertadas as duas dietas por 6 dias. Na fase pré-inicial I não houve diferença para o ganho de peso diário (GPD), consumo diário de ração (CDR) e conversão alimentar (CA) (p>0,05). Leitões dos grupos SGMR+AI e SGMR+SL não apresentaram ocorrências de magreza e depressão. Foi observado tendência (p=0,06) de menor ocorrência e severidade de diarreia em leitões de SGMR + A e SGMR+AI, ou seja, os quadros diarreicos diminuíram, refletindo num GPD nas primeiras semanas pós-desmame equivalente a dietas com grãos secos. Os leitões permaneceram mais tempo deitados na fase restrita para D1 (276,7 min/d), maior tempo gasto em pé (74,4 min/d) e maior consumo de ração (649,1 g de MS) para D2. Durante a livre escolha os leitões gastaram mais tempo consumindo (118,7 min/d) e maior consumo (761,3 g de MS) para D1, com preferência de 56,39% para dieta referência. A SGMR apresentou superioridade nutricional e promoveu melhor aceitabilidade e desempenho dos leitões nas primeiras semanas pós-desmame. Abstract: Weaned piglets need diets that ensure their performance and encourage feeding initiation. The aim of this study was to evaluate the effects of acid whey on the quality of rehydrated corn grain silage, as well as the use of silage on performance and feed preference of weaned piglets. Three experiments were carried out. In the first, the quality was evaluated of corn grain silages rehydrated with Water; Whey powder reconstituted with water (WPW); Acid whey (AW); Whey powder reconstituted with water, plus additive (WPA); Acid whey, plus additive (AWA). The SLP had the lowest observed value of ADF (14.7 g/kg) and SLF had the lowest values of lignin (3.3 g/kg) and N-NH3 at 240 hours of exposure to air (0.7 g/kg), with a final pH value of 4.40. The use of whey is a sustainable alternative to water to rehydrate corn grains, in addition to providing good quality and stability of the silages. In the second experiment, 120 piglets with 21 days of age were evaluated, during the pre-initial phases I (21 to 32d) and II (33 to 50d) to the following experimental diets: a control ration with dry corn grain (CR); rehydrated corn grain silage with water (CGSR+W); rehydrated corn grain silage with water and inoculant (CGSR+WI); rehydrated corn grain silage with acid whey (CGSR+AW). There was no difference for zootechnical performance in pre-initial phase I for daily weight gain (DWG), daily feed intake (DFI), and feed conversion (FC) (p>0,05). Piglets from the CGSR+WI and CGSR+AW groups did not show occurrences of thinness and depression. A trend towards (p=0,06) a lower occurrence and severity of diarrhea was observed in piglets of CGSR+W and CGSR+WI, that is, the diarrheal symptoms decreased, reflecting a DWG in the first weeks post-weaning equivalent to diets with dry grains. Piglets remained lying longer in the restricted phase for D1 (276.7 min/d), and the longest time spent standing (74.4 min/d) and feed intake (649.1 g DM) for D2. During free choice, the piglets spent more time consuming (118.7 min/d) and higher consumption (761.3 g DM) for D1, with a preference of 56.39% for the reference diet. The CGSR+AW showed nutritional superiority and promoted greater acceptability and performance of piglets in the first weeks after weaning.Item Seleção de Espectros Eletromagnéticos Atrativos para Dalbulus maidis (Delong & Wolcott, 1923)(Universidade Estadual de Londrina, 2022-02-24) Ruediger, Julianna; Ventura, Maurício Ursi; Hoshino, Adriano Thibes; Fernandes, Aline Pomari; Androcioli, Humberto GodoyResumo: O milho é atacado por diversas pragas que causam danos a produção. A cigarrinha-do-milho (Dalbulus maidis) é uma praga da cultura que causa injuria direta e indireta pela transmissão de Mollicutes e o vírus do rayado fino, que podem causar perda de 100% da produção. O uso de inseticidas nem sempre é eficiente, levando, dessa forma, ao aumento de custos de produção, desequilíbrio ambiental e seleção de populações resistentes. A utilização de outras formas de controle como o uso de armadilhas luminosas é uma estratégia com baixo custo e eficiente em conjunto com outras práticas de manejo. O objetivo desse trabalho foi determinar quais espectros luminosos específicos tem potencial para atrair D.maidis, uma vez que podem existir espectros mais efetivos na atração do inseto em relação aos disponíveis no mercado. O estudo foi conduzido de Junho a Novembro de 2021 em instalações do Instituto de Desenvolvimento Rural do Paraná (IDR-Paraná) no município de Londrina-PR, em câmaras com condições controladas de temperatura. As cigarrinhas utilizadas neste estudo foram obtidas da criação mantida no IDR-Paraná. Os ensaios foram conduzidos em três etapas; I) Determinação de um padrão entre quatro lâmpadas: UV (365 nm), luzes brancas (3000K e 6000K) e de “full espectro” (400-840nm) II) Screening de 19 espectros luminosos com o padrão estabelecido e III) A partir de quatro lâmpadas mais atrativas, realizados testes de atração em comparação ao sexo. Foram realizadas avaliações de insetos atraídos por cada lâmpada, sendo no teste de Screening comparado a lâmpada padrão selecionada com cada uma das lâmpadas dos 19 espectros luminoso, totalizando seis repetições por espectro com 10 avaliações em cada repetição. Cada avaliação foi liberada 10 indivíduos de D. maidis. As estruturas utilizadas foram canos PVC com 95 cm de diâmetro externo e 50 cm de comprimento, em uma altura de 1,20 m encapadas com pano TNT preto. O delineamento utilizado foi em bloco ao acaso e foi realizado testes não-paramétrico de Wilcoxon para o padrão, abordagem do modelo linear generalizado com testes de contraste para o Screening com a mesma abordagem para os testes de macho/fêmea utilizando a família quasipoisson. A luz UV 365 nm foi estabelecida como padrão atraindo mais cigarrinhas que as demais. Nos resultados de Screening os espectros no comprimento da luz violeta e azul (410-430 nm) foram os mais atrativos para a praga, espectros no infravermelho e vermelho possuem baixa atratividade e os demais espectros possuem captura variada. Apenas o espectro 420-430 nm teve diferença, capturando mais machos. Abstract: Maize is attacked by several pests that damage production. The corn leafhopper (Dalbulus maidis) is a crop pest causes direct and indirect damage through the transmission of Mollicutes and the rayado fino virus, which can cause 100% loss production. Use insecticides is not always efficient, thus leading to increased production costs, environmental imbalance and selection resistant populations. The use of other forms of control such as the use of light traps is a low-cost and efficient strategy in conjunction with other management practices. The objective of this work was to determine which specific light spectra have the potential to attract D.maidis, since there may be more effective spectra in attracting the insect in relation to those available on the market. This study was conducted from June to November 2021 in facilities of the Instituto de Desenvolvimento Rural do Paraná (IDR-Paraná) in the municipality of Londrina-PR, in chambers with controlled temperature conditions. The corn leafhoppers used were obtained from the breeding kept in the IDR-Paraná. The tests were carried out in three stages; I) Determination of a pattern among four lamps: UV (365 nm), white lights (3000K and 6000K) and “full spectrum” (400-840nm) II) Screening of 19 light spectra with the established pattern and III) From of four more attractive lamps, tests of attraction were carried out in comparison to sex. Evaluations of insects attracted by each lamp were carried out, being in the Screening test compared the standard lamp selected with each of the lamps of the 19 light spectrums, totaling six repetitions per spectrum with 10 evaluations in each repetition. Each assessment was released 10 D. maidis individuals. The structures used were PVC pipes with 95 cm of external diameter and 50 cm of length, at a height of 1.20 m covered with black TNT cloth. The design used was a randomized block and non-parametric Wilcoxon tests were performed for the pattern, generalized linear model approach with contrast tests for Screening with the same approach for the male/female tests using the quasipoisson family. Light UV 365 nm was established as a standard attracting more leafhoppers than the others. In the Screening results, violet and blue light spectra (410-430 nm) were the most attractive to the pest, infrared and red spectra have low attractiveness and the other spectra have varied capture. Only the 420-430 nm spectrum had a difference, capturing more males.