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Submissões Recentes
Diversidade de bactérias isoladas de nódulos de leucena (Leucaena spp.) em solos do Mato Grosso do Sul, Brasil
(2025-03-06) Assunção, Mariana Cristina; Hungria, Mariangela; Ribeiro, Renan Augusto; Ercole, Tairine Graziella; Klepa, Milena Serenato
Os rizóbios são bactérias diazotróficas simbióticas capazes de se associar a leguminosas como a Leucaena spp. e formar estruturas especializadas nas raízes, chamadas nódulos, onde o nitrogênio atmosférico é convertido em amônia, em um processo conhecido como fixação biológica de nitrogênio. No entanto, ainda há pouco conhecimento sobre as espécies de rizóbios simbiontes de leucena no Brasil, bem como sua eficiência na fixação de nitrogênio. O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade de bactérias isoladas de nódulos da planta Leucaena spp. de dez municípios do Mato Grosso do Sul (MS), Brasil, compreendendo dois dos três biomas do estado, Mata Atlântica e Cerrados. Foram realizadas caracterização morfofisiológica, análise do perfil genético por BOX-PCR, sequenciamento e análise filogenética dos genes 16S RNAr e genes housekeeping glnII, gyrB, recA e rpoB. Na análise de perfil de DNA por BOX-PCR de 68 isolados, considerando um cut-off de 70% de similaridade constatou-se alta diversidade genética, com a formação de cinco grupos e 21 bactérias em posições isoladas. Para o gene 16S RNAr, 30 isolados foram selecionados a partir do BOX-PCR, os quais foram identificados como Rhizobium (7), Agrobacterium (7), Herbaspirilum (2), Burkholderia (2), Paraburkholderia (2) e Pseudomonas (10). A partir da identificação inicial dos gêneros aos quais pertenciam, realizou-se a amplificação e o sequenciamento dos genes housekeeping glnII, gyrB, recA e rpoB para melhor identificação dos isolados e através da concatenação desses genes analisou-se Nucleotide Identity (NI) e Average Nucleotide Identity (ANI) para sugerir valores de corte para delineamento de novas espécies considerando 97,6% para Rhizobium e 97,1% para Agrobacterium. Com a construção das árvores filogenéticas dos genes housekeeping individuais e concatenados utilizando a ténica de Multilocus Sequence Analysis (MLSA), além da análise de ANI e Digital DNADNA hybridization (dDDH) com as sequências genômicas obtidas, foi possível confirmar o posicionamento filogenético das estirpes identificadas como pertencentes aos gêneros Agrobacterium e Rhizobium, além de identificar uma possível nova espécie. Os resultados obtidos nesta pesquisa indicam não apenas a alta diversidade genética de bactérias noduladoras de raízes de leucena presentes no estado do MS, Brasil, mas também a presença de uma nova espécie pertencente ao gênero Agrobacterium
Genotipagem de cepas de Mycobacterium tuberculosis e avaliação quanto a presença da linhagem beijing em isolados em Manaus – AM
(2025-07-30) Viana, Wesley Roberth Lima; Lioni, Lucy Megumi Yamauchi; Suffys, Philip Noel; Carvalho, Clarice Maia; Ogusku, Mauricio Morishi
A tuberculose permanece como um grave problema de saúde pública na região amazônica, sendo marcada por elevados índices de incidência e desafios estruturais para seu controle. A compreensão da diversidade genética de Mycobacterium tuberculosis é fundamental para apoiar estratégias de vigilância epidemiológica e controle da doença. Este estudo teve como principal objetivo caracterizar geneticamente 40 isolados clínicos provenientes da região amazônica por meio da técnica de MIRU-VNTR 12 loci e PCR específica para detecção da família Beijing. A análise revelou a formação de três clusters, sendo dois da sublinhagem Haarlem e outro da sublinhagem EAI resultando numa taxa de agrupamento de 0,09. Além dessas sublinhagens já mencionadas, outras identificadas foram LAM e X. Nenhum isolado foi identificado como pertencente à linhagem Beijing, nem pela metodologia de MIRU-VNTR 12 loci assim como não foi encontrado nos sistemas de detecção utilizando reações de triagem pela técnica de PCR Este trabalho contribui com dados inéditos sobre a diversidade genética do M. tuberculosis na Amazônia e reforça a importância da vigilância molecular para aprimorar as estratégias de controle da tuberculose na região.
Ação inibitória de enterocina e de nanopartículas de prata biogênica conjugadas com enterocina contra patógenos bacterianos
(2025-10-22) Souza, Nathália Aparecida Andrade de; Furlaneto, Marcia Cristina; Pozza, Magali Soares dos Santos; Sartori, Daniele; Perini, Hugo Felix; Panagio, Luciano Aparecido; Maia, Luciana Furlaneto
A resistência antimicrobiana representa um desafio crescente para a saúde pública e a segurança alimentar, exigindo novas estratégias de controle. Espécies do gênero Enterococcus destacam-se pelo potencial biotecnológico e clínico. Nesse contexto, este trabalho investigou o potencial antimicrobiano de enterocinas de Enterococcus durans, avaliando seu uso isolado e associado à nisina, ácido lactobiônico (LBA) e nanopartículas de prata biogênicas (bio-AgNP), visando o controle de patógenos bacterianos de importância clínica e alimentar. E. durans MF5 foi caracterizado quanto a presença de genes codificadores de enterocinas. Assim, foi possível identificar a presença de quatro genes codificadores de enterocina (entA, entB, entP e entX), revelando que esta cepa pode ser considerada produtora de múltiplas enterocinas. A natureza proteica da enterocina obtida de E. durans MF5 foi confirmada pela perda da atividade antibacteriana após tratamento com tripsina, quimotripsina, protease e proteinase K. Além disso, apresentou estabilidade térmica durante o tratamento a altas temperaturas. Ao avaliar a ação antibacteriana de Ent-MF5, houve efeito bactericida contra L. monocytogenes, com redução significativa de células viáveis, em concentrações iguais ou superiores a 0,13 μg/mL. Adicionalmente, Ent-MF5, LBA e nisina apresentam atividade antibacteriana contra S. aureus ATCC-25923, tanto testadas isoladamente e em combinação com ent-MF5, em células planctônicas. As nanopartículas obtidas por sintese verde (Bio-AgNP) conjugadas com enterocina (nanoconjugados), apresentaram ação antibacteriana contra todos as linhagens bacterianas testadas, sensíveis e resistentes (Enterococcus faecium ATCC 6569, EF29 e EF34; Staphylococcus aureus ATCC 25923, N315 e BEC-939). A concentração inibitória mínima (MIC) das bio-AgNPs para as bactérias testadas foi de 1,5 μg/mL (E. faecium) e 3,1 μg/mL (S. aureus). Além disso, a ação de bio-AgNP sobre biofilmes formados em superfícies de poliestireno pelas cepas de E. faecium e S. aureus foi investigada. No ensaio com cristal violeta, observou-se uma redução de até 20% na biomassa total de E. faecium e até 51% para S. aureus na concentração de 0,5×MIC. A atividade metabólica das células sésseis, avaliada por XTT, revelaram diminuição de até 91% na atividade de E. faecium e 23% para S. aureus na concentração de 0,5×MIC. As nanopartículas afetaram principalmente as células persistentes nos biofilmes de E. faecium ATCC-6569 (98,51 ± 0,09%), E. faecium EF29 (96,68 ± 0,3%), S. aureus ATCC-25923 (97,65 ± 0,36%) e S. aureus N315 (99,52 ± 0,02%). Em conclusão, as enterocinas apresentaram importante ação antibacteriana, principalmente quando avaliadas em associação às nanopartículas de prata, importante para as cepas resistentes e ação antibiofilme. Além disso, ao avaliar as enterocinas combinadas à nisina ou LBA, houve redução do crescimento bacteriano e redução da concentração de uso dos compostos.