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Submissões Recentes
Desenvolvimento de um coquetel de bacteriófagos contra isolados clínicos multiresistentes de Acinetobacter baumannii: avaliação da atividade antibiofilme e associação com antimicrobianos
(2026-02-25) Santos, Gabriel Henrique Maximino; Kobayashi, Renata Katsuko Takayama; Pereira, Giovana Nicolete; Scandorieiro, Sara; Ribeiro, Jhonatan Macedo
Em decorrência do aumento global de infecções causadas por Acinetobacter baumannii multirresistente aos antimicrobianos, especialmente em ambiente hospitalar e em unidades de terapia intensiva, torna-se urgente a busca por alternativas terapêuticas capazes de contornar a resistência e a formação de biofilmes por esse patógeno. Nesse contexto, a fagoterapia surge como opção promissora, utilizando bacteriófagos, vírus que infectam especificamente bactérias, seja de forma isolada, em coquetéis ou em associação a antibióticos. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana de um coquetel de bacteriófagos contra isolados clínicos multirresistentes de A. baumannii, bem como investigar seu potencial em combinação com diferentes classes de antimicrobianos. Para isso, foram isolados fagos a partir de amostras de efluentes hospitalares, selecionados de acordo com seu espectro de ação e desempenho em ensaios in vitro, incluindo Spot Test, Eficiência de Plaqueamento, Índice de Virulência e Multiplicidade de Infecção, culminando na escolha de quatro fagos para composição de um coquetel. Foram conduzidos ensaios de virulência in vitro frente a diversos isolados clínicos, testes de sobrevivência em larvas de Galleria mellonella para avaliar taxas de sobrevivência e a relação entre virulência e eficácia terapêutica dos fagos, além de ensaios de checkerboard para análise da interação entre o coquetel e antibióticos como levofloxacina, meropenem, piperacilina-tazobactam e colistina, bem como testes de atividade antibiofilme dessas combinações. Os resultados demonstraram que o coquetel apresentou amplo espectro de ação (93,6%, ou seja, 59 dos 63 isolados), com altos índices de virulência (média de 0,73) e capacidade de reduzir significativamente a carga bacteriana, refletindo em maior sobrevivência das larvas tratadas (66,4% de sobrevivência) em comparação aos controles infectados sem fagos (7,6%). Adicionalmente, as combinações com antibióticos permitiram a redução das concentrações de diferentes fármacos, inclusive daqueles com eficácia previamente comprometida, e mostraram que sozinho o coquetel já é capaz de reduzir de maneira significativa biofilmes formados de A. baumannii. Diante disso, conclui-se que o coquetel de bacteriófagos estudado apresenta potencial terapêutico no manejo de infecções causadas por A. baumannii multirresistente, contribuindo para a otimização do uso de antibióticos e apontando a necessidade de estudos adicionais em modelos vertebrados e eventualmente em cenários clínicos para garantir sua aplicação.
Desenvolvimento de métodos para prospecção de bactérias de solos de depósitos plásticos com potencial de crescimento em meio enriquecido com polietileno de alta densidade
(2026-02-27) Abussafi, Leonardo Dib de Sousa; Lioni, Lucy Megumi Yamauchi; Suzukawa, Helena Tiemi; Gonçalves, Guilherme Bartolomeu
A poluição ambiental por plásticos, em especial pelo polietileno de alta densidade (PEAD), constitui um problema persistente devido à elevada recalcitrância desse polímero, à baixa biodisponibilidade de suas cadeias e à complexidade metodológica envolvida na prospecção e triagem de microrganismos com potencial de interagir com esse substrato. Nesse contexto, o presente trabalho teve como objetivo formular meios de cultivo para triagem e isolamento de microrganismos com potencial de degradar PEAD, utilizando Pleurotus ostreatus como modelo. Também de desenvolver métodos de bioprospecção de bactérias com potencial de degradar PEAD e avaliar pools obtidos pelos métodos de prospecção por meio de ensaios baseados na formação de halos claros em poços de difusão. Foram formulados meios mínimos contendo PEAD em diferentes granulometrias, combinados ou não com aditivos como Tween80 e óleo mineral, avaliando-se parâmetros críticos como dispersão do polímero no meio solidificado e resposta de crescimento fúngico. Observou-se que o Tween80 melhorou a homogeneização das partículas de PEAD, enquanto o óleo mineral comprometeu a uniformidade do meio, limitando a aplicabilidade de ensaios em placas. Verificou-se também que P. ostreatus não formou halos claros em nenhuma das formulações testadas, e que a presença simultânea de múltiplas fontes de carbono (PEAD, Tween e óleo mineral) esteve associada à redução da densidade micelial e à diminuição da velocidade de crescimento, indicando interferência nutricional. Para bioprospecção bacteriana, foram empregadas metodologias baseadas em plaqueamento direto e enriquecimento em meio contendo PEAD, com posterior isolamento em meios não seletivos e em meio solidificado formulado contendo PEAD. A passagem por esse meio "MP1 Ágar" reduziu o número de morfotipos recuperados, evidenciando caráter seletivo do meio, embora sem dados suficientes para inferir se tal seletividade favorece microrganismos com capacidade de biodegradação de PEAD. Na triagem por poços de difusão, 20 pools bacterianos foram avaliados, sendo que apenas o pool 101GR apresentou formação consistente de halo claro em meios específicos, com caráter compatível com a degradação dos gelificantes. Quando os integrantes do pool foram isolados, o fenótipo de halo não foi reproduzido pelos isolados, sugerindo dependência de alta densidade celular, ou de interações consorciadas, para expressão do efeito observado. Conclui-se que o trabalho estabeleceu um conjunto de formulações e um fluxo experimental de prospecção e triagem reprodutível para seleção inicial de pools e isolados obtidos sob pressão seletiva do PEAD, ao mesmo tempo em que identificou limitações fundamentais de interpretação em ensaios baseados exclusivamente em halos, crescimento ou alterações visuais em placas. Assim, os resultados fornecem uma base metodológica inicial para estudos posteriores que integrem validações analíticas específicas e ensaios direcionados à comprovação de biodegradação efetiva do PEAD pelos morfotipos isolados.
Biossíntese, caracterização e avaliação da atividade antimicrobiana de nanopartículas de selênio e sua aplicação em combinação com eugenol
(2026-02-26) Souza, Lucas Marcelino dos Santos; Nakazato, Gerson; Kobayashi, Renata Katsuko Takayama; Scandorieiro, Sara; Medeiros, Leonardo Pinto; Clébis, Victor Hugo
O trauma por queimadura resulta em lesões teciduais complexas e suscetíveis às infecções, que podem ser agravadas por microrganismos multirresistentes que se não tratadas levam o indivíduo à morte. Nesse contexto, a resistência bacteriana aos antimicrobianos é um grande problema para o tratamento de queimados, por aumentar o tempo de recuperação do queimado e diminuir a variedade de antibióticos para o tratamento da infecção. Como alternativa pode-se destacar a utilização de antimicrobianos alternativos como nanopartículas e óleos essenciais. Estudos com nanopartículas de diferentes elementos, principalmente metais, como: prata, ouro e ferro, apresentam desejável atividade antimicrobiana. O selênio (Se) é um elemento que pode adquirir características de nanopartícula tendo boa ação antibacteriana. Portanto, o objetivo do trabalho foi realizar a biossíntese de nanopartículas de selênio (SeNps) a partir de extratos de Gymnanthemum amygdalium, realizar sua caracterização e produzir, juntamente com eugenol, formulações de géis para aplicações em queimados. As nanopartículas sintetizadas foram caracterizadas por espalhamento de luz dinâmico (dynamic light scattering, DLS), difração de raio X (X-ray diffraction, XRD), ressonância magnética nuclear (RMN-1H), espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de transmissão (MET) e análise de espectroscopia de dispersão de energia (EDS). Para os testes de atividade antimicrobiana foram utilizadas cepas padrão e isolados clínicos sendo elas: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus N315, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus aureus BEC 9393, Staphylococcus aureus PRSA 521, Staphylococcus aureus PRSA 207, Staphylococcus aureus PRSA 999, Staphylococcus aureus PRSA 336, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Acinetobacter baumannii ATCC 19606, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Klebsiella pneumoniae 1127 e Salmonella enteritidis 1307. A atividade antibacteriana foi avaliada pelos métodos de microdiluição em caldo, checkerboard, curva de sobrevivência e efeito antibiofilme. Os efeitos citotóxicos em hemácias das SeNps sintetizadas foram analisados. Posteriormente, foi realizada a produção de dois tipos de hidrogéis o primeiro contendo Carbopol 940 e o segundo contendo hidroxietilcelulose. As SeNps apresentaram tamanho entre 58 a 85 nm e morfologia esférica. As nanopartículas tiveram ação contra todas as bactérias Gram positivas, porém sem ação nas Gram negativas testadas, obteve-se efeito sinérgico contra algumas cepas. Todas as formulações apresentaram estabilidade. Os resultados indicam que há um aumento na eficácia antibacteriana das SeNPs em conjunto com eugenol e que as formulações contendo ambos os ativos apresentam boa estabilidade tendo potencial para a produção de fármacos com finalidades de tratamento em queimados.