01 - Doutorado - Ciência Animal

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Líquido cerebroespinhal de ruminantes: conservação, estabilidade e validação
(2022-09-30) Curti, Juliana Massitel; Flaiban, Karina Keller Marques da Costa; Marquez, Ellen de Souza; Lisbôa, Julio Augusto Naylor; Bracarense, Ana Paula Frederico Rodrigues Loureiro; Queiroz, Gustavo Rodrigues
A análise do líquido cerebroespinhal (LCE) traz informações importantes ao clínico como apoio ao diagnóstico de enfermidades neurológicas inflamatórias/infecciosas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a estabilidade e comparar os métodos para determinar a concentração de lactato liquórico de bovinos, caprinos e ovinos sadios sob refrigeração e congelamento. Foram colhidas e avaliadas 30 amostras de LCE de bovinos (n=10), caprinos (n=10) e ovinos (n=10). O LCE foi colhido por punção no espaço atlanto-occiptal sob sedação. Após a colheita as amostras foram distribuídas em sete alíquotas de acordo com o momento de sua análise 0h, 24h, 48h, 72h refrigeradas a 4°C, e 3 meses, 6 meses e 12 meses congeladas a -20°C. A concentração de lactato foi mensurada pelo lactímetro portátil (LP) e pelo analisador bioquímico automatizado (ABA), padrão ouro. Nas amostras refrigeradas foram realizadas as análises físicas, bioquímicas (proteína e glicose) e celulares rotineiras. Nas amostras congeladas foram mensurados concentração de eletrólitos sódio (Na+), potássio (K+) e cloreto (Cl-) e concentração de lactato. A análise de variância bifatorial foi empregada para comparação entre os diferentes momentos em cada espécie e o teste de Bland-Altman foi utilizado para observar se havia concordância entre os métodos. A correlação de Pearson foi empregada para verificar as relações entre o lactímetro portátil e o analisador bioquímico automatizado. O lactímetro portátil avaliado não pode ser empregado como método de avaliação do lactato liquórico em bovinos, caprinos e ovinos. Constatou-se que no LCE as espécies avaliadas possuem estabilidade de até 72 horas sob refrigeração a 4°C para a densidade, concentração de proteína e glicose e contagem total de células (leucócitos e hemácias), e congelado a -20°C por até 12 meses de eletrólitos. A estabilidade do lactato no LCE no ABA variou de acordo com a espécie, nos bovinos apresentou estabilidade por até 72 horas refrigerado, nos caprinos por até 3 meses congelado e nos ovinos por até 12 meses congelado. Os resultados encontrados indicam que o LCE pode ser colhido a campo e encaminhado ao laboratório a 4°C em até 72 horas sem comprometer a análise.
Imunomoduladores contra bacterioses em tilápias: avaliação de ácidos orgânicos contra Francisella orientalis e determinação de potencial probiótico de cepas contra Streptococcus agalactiae
(2023-02-27) Silva, Vanessa Gomes da; Pereira, Ulisses de Pádua; Di Santis, Giovana Wingeter; Caldart, Eloiza Teles; Pilarski, Fabiana; Campos, Guilherme
A aquicultura tornou-se um dos setores mais proeminentes do agronegócio mundial. A produção brasileira de peixe de cultivo alcançou 860mil toneladas em 2022, e a tilápia permanece como a espécie mais cultivada no país. Porém, os sistemas intensivos trazem reveses como a alta incidência de doenças bacterianas, em especial a franciselose e estreptococose, que causam surtos com alta mortalidade nas pisciculturas. Para controlar esses surtos, vários antimicrobianos são utilizados tanto terapêutica quanto profilaticamente. O uso excessivo e indiscriminado implica no surgimento de cepas resistentes que se acumulam na água, nos sedimentos, no pescado comercializado e oferecem risco para o tratamento de infecções em animais e humanos. Assim, a aquicultura moderna tem visado práticas mais sustentáveis a fim de fornecer produtos seguros para o consumidor final. Nesse sentido, esta pesquisa buscou avaliar novos aditivos alimentares quanto à sua capacidade de promover ganhos à imunidade e maior resistência às enfermidades de maior ocorrência na tilapicultura nacional. No trabalho A, diferentes concentrações (3 g.kg-1 e 5 g.kg-1) de um aditivo composto por ácidos orgânicos foi incorporado à ração, fornecido durante 21 dias para juvenis de tilápia que, em seguida, foram desafiadas com Francisella orientalis. Os animais alimentados com 0,5% de Bacti-nil®Aqua apresentaram melhoras em parâmetros imunológicos, como lisozima e atividade antibacteriana do soro, e menor mortalidade quando comparados com grupos controles. A microbiota intestinal manteve características pré-desafio entre os grupos tratados, o que pode ser considerado um efeito benéfico do produto sobre o microbioma intestinal. No trabalho B, diferentes cepas de microrganismos tiveram seu potencial probiótico avaliado e, posteriormente foram testados quanto ao efeito imunomodulador e à resistência contra Streptococcus agalactiae sorotipo Ib. Lactococcus lactis apresentou boa tolerância a baixo pH, sais biliares e NaCl, assim como demonstrou antagonismo contra Enterococcus faecium e S. agalactiae in vitro. As cepas da levedura Yarrowia lipolytica demonstraram boa resistência nos testes in vitro. Na avaliação histomorfológica do fígado, os grupos alimentados com Y. lipolytica tiveram escores gerais mais baixos, indicando que a levedura ajudou a preservar a integridade do fígado. A adição de L. lactis e Y. lipolytica teve um efeito benéfico no sistema imune, com resultados significativos na atividade bactericida do soro e na sobrevivência após o desafio bacteriano. Os trabalhos desenvolvidos indicam que a adição de ácidos orgânicos e probióticos à ração são importantes ferramentas no estímulo da imunidade dos animais, assim como no combate a enfermidades, propagando uma aquicultura mais sustentável. Os microrganismos testados poderão ser amplamente utilizados como aditivos na ração e as técnicas desenvolvidas permitem a exploração de novas cepas probióticas, em especial, cepas autóctones que oferecem maior adaptação e segurança para os animais e para cadeia produtiva
Efeitos da reposição estrogênica na adiposidade e na microbiota fecal de gatas previamente castradas
(2020-02-20) Haddad Neta, Jamile; Martins, Maria Isabel Mello; Lopes, Maria Denise; Derrussi, Ana Augusta Pagnano; Gava, Fábio Nelson; Flaiban, Karina Keller Marques da Costa
A castração felina é fator de risco para obesidade e diabetes mellitus. O tratamento da obesidade é desafiador e busca por estratégias inovadoras, como a restauração dos efeitos hipofágicos do estrógeno por meio de sua reposição e a manipulação da microbiota de perfil magro. Este trabalho avaliou os efeitos do valerato de 17 ß-estradiol sobre o consumo alimentar, ganho de peso, perfil bioquímico, morfometria adipocitária e microbiota em 12 gatas divididas em três grupos: OH+E2 (gatas ovariohisterectomizadas com reposição estrogênica), OH (gatas ovariohisterectomizadas sem reposição estrogênica) e SHAM (gatas submetidas apenas à celiotomia). Utilizou-se a dose de 4 µg durante três meses (E1), e após um intervalo de 20 dias a dose foi aumentada para 12 µg durante três meses (E2). O registro do consumo alimentar e do peso foi diário e semanal, respectivamente. Amostras de sangue para exames bioquímicos e esfregaço vaginal para colpocitologia foram obtidos a cada seis semanas, sob sedação, e amostras de tecido adiposo subcutâneo foram colhidas sob anestesia no momento anterior ao experimento e ao final de E1 e E2. Amostras de fezes foram colhidas no último dia do experimento, armazenadas a -80°C e submetidas ao sequenciamento das regiões V3/V4 do gene 16S rRNA. A reposição com 4 µg não exerceu os efeitos hipofágicos e de perda de peso, enquanto a reposição com 12 µg resultou em perda de peso (p= 0,03), hipofagia nas primeiras quatro semanas e presença de células superficiais na colpocitologia. As dosagens bioquímicas apresentaram-se dentro dos valore de referência, com aumento de triglicérides (p=0,004) e ALT no grupo OH, enquanto a reposição com 12 µg mantiveram-nas em declínio. Houve aumento da área dos adipócitos em todos os grupos, sendo significativo no grupo OH (p= 0,026). A hipertrofia adipocitária foi mais discreta no grupo com reposição. Não houve diferença quanto à alfa diversidade da microbiota fecal entre os grupos, enquanto a beta diversidade mostrou uma diferença entre a estrutura das comunidades nos grupos. A relação Firmicutes/Bacteroidetes foi maior nos grupos OH e OH+E2 em comparação com SHAM, impulsionada pela maior abundância de Megasphaera, Megamonas e Dialister (p= 0,020) no grupo OH+E2, em comparação com SHAM. Como conclusão, a reposição de 17 ß-estradiol na dose de 12 µg promoveu um maior controle da adiposidade associado à presença de células superficiais na colpocitologia e diferença na beta diversidade da microbiota fecal
Desenvolvimento de qPCR para diagnóstico de Eimeria spp. em bovinos
(2018-02-28) Cardim, Sérgio Tosi; Garcia, João Luis; Crhyssafidis, Andréas Lazaros; Breganó, Regina Mitsuka; Guimarães Junior, José da Silva; Alexey Leon Gomel Bogado
A coccidiose bovina é uma enfermidade de grande importância em rebanhos bovinos ao redor do mundo. Esta enfermidade é causada por protozoários, do gênero Eimeria e afeta principalmente animais com menos de 12 meses, sendo as espécies E. bovis e E. zuernii as de maior importância clínica, podendo causar diarréia severa com sangue em bezerros infectados. O diagnóstico de rotina desta doença é realizado através da observação morofológica dos oocisto, os quais precisam estar esporulados para identificação da espécie envolvida, o que leva em torno de 10 a 15 dias,tornando o mesmo muito laborioso e com necessidade de alto treinamento do leitor, dificuldando um diagnóstico mais rápido e consequente tratamento mais rápido dos animais. Devido as estes fatores, o objetivo deste trabalho foi desenvolver técnicas de qPCR para o diagnóstico do gênero Eimeria e das espécies de maior patogenia, E. bovis e E. zuernii. Para isto foram selecionados o gene 18S rRNA para o gênero Eimeria e o gene ITS-1 para diferenciação das espécies, isto porque o gene 18S tem pouca variabilidade entre as espécies enquanto o gene ITS-1 tem uma alta variabilidade interespecifica, com baixa variabilidade dentro da espécie, visando assim uma alternativa de diagnóstico mais rápida e sensível. As PCRs foram realizadas utilizando SYBR Green como fonte de fluorenscencia. Tanto os primers desenvolvidos para o gênero, quanto os desenvolvidos para a espécie E. zuernii apresentaram alta sensibilidade, tendo a capacidade de amplificar amostrar contendo apenas um oocisto do parasita. Já os primers desenvolvidos para E. bovis apresentaram uma sensibilidade inferior, sendo capazes de detectar positividade em amostras de campo contendo 50 oocistos por grama de fezes. Para avaliação da especificidade das técnicas foram utilizadas amostras contendo Cryptosporidium spp. e Giardia spp., sendo que todas as técnicas apresentaram negatividade tanto para Giardia spp., quanto para Cryptosporidium spp. Baseado nos resultados encontrados neste estudo, conclui-se que os primers desenvolvidos apresentaram alta sensibilidade e especificidade no diagnóstico de Eimeria em bovinos
Inteligência computacional e lógica fuzzy na classificação da qualidade tecnológica da carne suína
(2018-02-27) Peres, Louise Manha; Bridi, Ana Maria; Nicolau, Juliana Pampana; Ayrosa, Pedro Paulo da Silva; Barbon Junior, Sylvio
A classificação da qualidade da carne suína é de extrema importância, uma vez que a partir desta podemos avaliar direta e indiretamente as ações tomadas na cadeia produtiva. Inúmeros são os padrões de classificação descritos na literatura, não havendo consenso entre eles no que se refere a quantidade de classes nem tampouco em relação aos limiares entre classes. E estes limiares são rígidos, ou seja, para uma amostra ser classificada ela tem que se encaixar numericamente nos limiares máximo e mínimo de uma classe e por isso é comum haver amostras que não se enquadram em nenhuma classe devido aos fatores intrínsecos e extrínsecos que afetam a qualidade da carne, sendo nesta ocasião denominadas amostras não factíveis. "Qual padrão escolher para classificar a qualidade tecnológica da carne?" e "O que fazer para classificar uma amostra quando ela não se enquadra em nenhuma classe?". As soluções para esta problemática são apresentadas nos dois artigos que compõem esta tese. ARTIGO I: "Meta-recommendation of pork quality standards" - através da meta- recomendação, utilizando o algoritmo de árvore de decisão J48 obtivemos resultado de máximo desempenho para o meta-modelo, considerando as medidas de acurácia, coeficiente kappa, verdadeiro-positivo, falso-positivo, precisão, revocação e F-measure (média ponderada entre precisão e revocação). Sendo assim, é notória a contribuição destes resultados para direcionar com confiabilidade o padrão de qualidade de carne suína mais adequado a qualquer dataset em estudo. ARTIGO II: "Fuzzy approach for classification of pork into quality grades: coping with unclassifiable samples" - quando classificamos as amostras com a lógica clássica, segundo os limiares rígidos dos padrões descritos, facilmente encontramos amostras não factíveis. Em função disto, muitos lotes de carne podem ser direcionadas para nichos de mercados não condizentes com suas características tecnológicas. Os resultados encontrados nesse artigo foram relevantes, pois a porcentagem de amostras não factíveis foi reduzida consideravelmente quando utilizada a lógica fuzzy em comparação a lógica clássica. Com este trabalho conseguimos preencher satisfatoriamente várias lacunas da classificação da qualidade da carne suína. Inicialmente fizemos a meta-recomendação do padrão mais adequado ao dataset e na sequência aplicamos a lógica fuzzy para aumentar a porcentagem de amostras classificáveis. Assim, é notória a contribuição da lógica fuzzy como uma ferramenta viável e confiável para comercializar produtos cárneos estrategicamente em função de sua classe de qualidade.
Capacidade de detecção de adulterações e suficiência das provas oficiais para assegurar a qualidade do leite pasteurizado
(2013-02-19) Silva, Livia Cavaletti Corrêa da; Beloti, Vanerli; Fagan, Eder Paulo; Santana, Elsa Helena Walter de; Giordano, Luciene Garcia Pretto; Mattos, Marcos Rodrigues de
O leite é um alimento sujeito à fraudes. As mais frequentes são a adição de água, reconstituintes, conservantes e neutralizantes. Apesar da legislação determinar a pesquisa diária dessas substâncias, a avaliação do leite pelas indústrias geralmente é realizada apenas por análises físico-químicas genéricas como densidade e crioscopia. Contudo, essas fraudes muitas vezes são calculadas para impedir sua identificação por provas de rotina não específicas. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a ocorrência de fraudes, resíduos de antibióticos e irregularidades físico-químicas e microbiológicas em leite pasteurizado, bem como avaliar a capacidade de detecção de adulterações e a suficiência das provas oficiais específicas e inespecíficas na identificação da adição de reconstituintes, conservantes e neutralizantes. Foram avaliadas 100 amostras de leite pasteurizado, produzido no Paraná, para a presença de reconstituintes, conservantes, neutralizantes e antibióticos e demais parâmetros físico-químicos e microbiológicos determinados pela legislação. Em outro experimento, a capacidade de detecção das provas oficiais para pesquisa de sacarose, cloretos, amido, formaldeído, cloro, hipoclorito, peróxido de hidrogênio e neutralizantes da acidez foi avaliada utilizando-se de amostras adulteradas em laboratório. Foram avaliados adicionalmente testes não oficiais para avaliar a presença de inibidores do crescimento microbiano e o efeito inibidor de algumas substâncias conservantes e neutralizantes sobre a microbiota do leite cru. Os resultados mostraram que das 100 amostras de leite pasteurizado, 51% apresentaram problemas, das quais 25% estavam fora dos padrões nas análises físico-químicas e 10% nas análises microbiológicas, 14% apresentaram resíduos de antibióticos e a adição de reconstituintes foi detectada em 13% das amostras. Observou-se que a avaliação do leite apenas por análises físico-químicas de rotina, como densidade e crioscopia não é suficiente para identificar fraudes por adição de água e reconstituintes. As provas para a pesquisa específica de substâncias reconstituintes apresentaram boa capacidade de detecção, assim como a prova para pesquisa de formaldeído. A adição de sacarose em amostras adulteradas no laboratório elevou a porcentagem de lactose detectada por equipamentos que utilizam infravermelho e ultrassom, demonstrando que estes equipamentos não quantificam especificamente a lactose. Quanto às amostras adicionadas de conservantes e neutralizantes no laboratório, a prova inespecífica da cultura de iogurte foi capaz de detectar a inibição de crescimento nas amostras adicionadas de formaldeído, peróxido de hidrogênio, hipoclorito e hidróxido de sódio, apresentando resultados próximos aos das provas oficiais para a pesquisa dessas substâncias. A adição de formaldeído, peróxido de hidrogênio e hipoclorito promoveu reduções significativas nas contagens de micro-organismos aeróbios mesófilos no leite cru adulterado no laboratório. o entanto, não foi possível detectar peróxido de hidrogênio e compostos clorados após 24 horas de refrigeração, provavelmente em consequência da degradação e /ou inativação dessas substâncias no leite. A prova para a pesquisa de neutralizantes da acidez detecta a substância apenas quando a alcalinização é excessiva. A neutralização equilibrada do ácido lático resulta na anulação da capacidade de detecção da prova. A pesquisa de inibidores microbianos, neutralizantes e reconstituintes é obrigatória apenas para leite cru, porém, a presença de grande parcela de amostras positivas para reconstituintes e antimicrobianos no leite pasteurizado demonstra falhas no controle de qualidade e pode indicar a prática de adulteração do leite também pela indústria.
Transplante de microbiota fecal no tratamento de cães com diarreia
(2023-02-24) Pereira, Giorgio Queiroz; Gomes, Lucas Alécio; Pereira, Patrícia Mendes; Alfieri, Alice Fernandes; Souza, Mirian Siliane Batista de; Basso, Karina Maria
A diarreia é uma manifestação clínica comum em cães, sendo a gastrenterite hemorrágica causada por parvovirose mais prevalente em jovens. Estabelecer o diagnóstico pode ser um desafio, porém, o tratamento é igual ou semelhante na maioria dos casos. Assim sendo, o objetivo geral desse trabalho foi investigar o efeito do transplante de microbiota fecal (TMF) na recuperação clínica de cães filhotes com gastrenterite hemorrágica comparando o uso de diferentes alíquotas de fezes. Foram avaliados 18 cães com gastrenterite hemorrágica por parvovirose, sem restrição de raça, sexo e com idade entre 2 e 12 meses. Os animais foram distribuídos em três grupos com seis indivíduos cada. O grupo controle (CON) recebeu apenas terapia convencional/padrão (fluidoterapia, antibiótico, protetores de mucosa, antieméticos e antiácidos), o grupo TMF10 recebeu terapia convencional mais o TMF com 10 gramas de fezes, e o grupo TMF20 tratamento convencional mais TMF com 20 gramas de fezes. Os cães foram avaliados diariamente por meio de exame clínico e registrou-se as características das fezes quanto a consistência, ou seja, se líquida, pastosa ou normal. Considerou-se como recuperação clínica o exame físico normal, a evolução de diarreia para fezes pastosas e a presença de apetite sem vômitos. Os resultados em relação a consistência das fezes demostrando o período de recuperação clínica dos animais e alta, foram analisados utilizando ANOVA seguida de teste de Tukey para fins de comparação. Nos grupos TMF o tempo de recuperação clínica foi mais rápido quando comparados ao grupo controle. Quando comparados entre si, não houve diferença estatística entre os grupos que receberam o transplante, porém, observou-se que a recuperação clínica no grupo TMF20 foi discretamente melhor que no grupo TMF10. Conclui-se que o TMF proporciona melhora clínica mais rápida e menor tempo de hospitalização dos cães e que um maior volume fecal no TMF poderá proporcionar melhores resultados
Efeito do tanino condensado e diferentes níveis de suplementação sobre a verminose, metabolismo e desempenho produtivo de ovelhas e seus cordeiros
(2018-02-28) Grandis, Fernando Augusto; Ribeiro, Edson Luis de Azambuja; Silva, Leandro das Dores Ferreira da; Schuntzemberger, Amanda Massaneira de Souza; Porto, Petrônio Pinheiro; Cunha Filho, Luiz Fernando Coelho da
Objetivou-se avalair o efeito do tanino condensado, associado a níveis de suplementação, sobre a verminose, metabolismo e desempenho produtivo de ovelhas e seus cordeiros, durante o final de gestação e lactação. Testou-se três níveis de suplementação alimentar: 0,6%, 1,2% e 1,8% do peso corporal (PC), associados à presença ou ausência de extrato de acácia-negra (1,08g/kg PC). Os animais foram alimentados com essas rações durante os últimos 21 dias de gestação e durante a lactação, até o desmame, realizado aos 70 dias. Estudou-se também o efeito de estado fisiológico (dias em relação ao parto). Constatou-se efeito de suplemento sobre OPG. Não foi observada interação entre TC e suplemento. Os animais que receberam os maiores níveis apresentaram contagem média inferior (460,33, 416,54 e 148,10 para 0,6, 1,2 e 1,8%, respectivamente). Obteve-se efeito de estado fisiológico sobre o OPG. As ovelhas apresentaram menores OPGs com o aproximar do desmame (média de 24 OPG aos 70 dias). Não foi verificado efeito do TC no OPG. No hemograma, observou-se apenas efeitos de dias, de maneira próxima à observada no OPG. O FAMACHA© não refletiu as variações do OPG e hemograma. O TC proporcionou menores escores corporais aos 28 e 42 dias. O perfil metabólico sofreu influência apenas de dias, exceto para uréia, em que houve interação dias-suplemento. Os volumes de leite aos 56 e 70 dias foram afetados pelos níveis de suplementação, em que os animais que receberam 1,8% produziram mais (506,81, 1016,20, 1280,94 e 674,02, 668,74, 973,87 mL, para 0,6, 1,2 e 1,8%, aos dias 56 e 70 respectivamente). Os dias de lactação também afetaram a produção de leite, em que os valores aos 21 e 28 dias (1171,05 e 1200,00 mL) foram superiores ao obtido aos 70 (722,21 mL). Os níveis de suplementação também afetaram os teores de lactose (4,69, 4,79 e 4,91 %) para 0,6, 1,2 e 1,8%, respectivamente. Em relação a dias, os menores teores de lactose foram obtidos aos 56 e 70 dias (4,54 e 4,51% vs valor nos demais períodos médio de 4,92%). A presença de tanino na dieta afetou os teores de gordura do leite do experimento (7,17 e 7,75% para sem e com tanino, respectivamente). Os níveis de suplemento afetaram o peso ao desmame e a perda de peso média diária durante a lactação, em que as ovelhas que receberam 1,8% apresentaram os maiores valores de peso e menores perdas (45,98, 47,72 e 50,90 kg e 0,123, 0,137 e 0,080 kg, para 0,6, 1,2 e 1,8%, respectivamente). O TC não afetou o desempenho das ovelhas, entretanto, cordeiros de ovelhas que receberam tanino foram desmamados mais leves (18,54 e 16,38 kg, para sem e com tanino). Conclui-se que não ficou evidenciado o efeito do TC sobre a verminose, porém a suplementação foi importante para a redução na contagem de OPG. O extrato natural de acácia-negra pode ser utilizado na alimentação de ovelhas durante o final de gestação e lactação, sem trazer prejuízos aos seus desempenhos, podendo ser utilizado visando o aumento da produção de queijo e derivados, visto que houve incremento nos teores de gordura. Entretanto, o contato de animais jovens com este produto não é recomendado
Neospora caninum em vacas leiteiras e bezerras da região oeste do Paraná: associação entre soropositividade e histórico de aborto, e a expressão gênica das citocinas IFN-y e IL-10
(2017-08-31) Frigotto, Tiago Andre; Garcia, João Luis; Vidotto, Odilon; Chryssafidis, Andreas Lazaros; Guimarães Junior, José da Silva; Bogado, Alexey Leon Gomel
O protozoário Neospora caninum é considerado um dos principais agentes causadores de abortamentos em bovinos leiteiros, promovendo severos prejuízos econômicos à atividade. Há duas formas de transmissão, sendo a transplacentária a forma mais importante para a manutenção da infecção no rebanho. Durante a gestação de vacas infectadas, há resposta imune do hospedeiro frente ao parasita pela produção de citocinas inflamatórias, como o Interferon Gamma (IFN-?) e a Interleucina 10 (IL-10), no intuito de conter a infecção do N. caninum impedindo que ocorra o abortamento. Os objetivos deste trabalho foram, inicialmente, associar a presença de anticorpos contra N. caninum com histórico de abortamento em vacas leiteiras. Em seguida, objetivou-se avaliar a prevalência de anticorpos anti-N. caninum em vacas leiteiras recém-paridas e em suas progênies; e a expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias IFN-? e IL-10 na interface materno-fetal para caracterizar as respostas imunes que ocorrem em associação com infecção por N. caninum em vacas parturientes e em suas progênies. A sorologia foi realizada por meio da reação de imunofluorescência indireta (IFI) (sendo consideradas positivas quando os títulos foram maiores ou iguais a 1:100) e a expressão gênica das citocinas foi realizada pela qPCR (de células provindas da papa de leucócitos) e avaliada pelo método de Quantificação Relativa (QR). Em nove propriedades leiteiras que possuíam vacas com histórico de abortamento, avaliou-se um total de 46 vacas leiteiras, sendo 28 com histórico de um ou mais abortamentos e 18 sem histórico de abortamentos. A soro ocorrência de anticorpos contra N. caninum entre todas as vacas avaliadas foi de 39,1% (18/46), entre as vacas com histórico de abortamento foi de 57,1% (16/28) e de 11,1% (2/18) nas vacas que não haviam abortado. Dentre as vacas soropositivas, 88,9% possuíam histórico de aborto. Todas as propriedades avaliadas apresentaram animais com anticorpos contra o N. caninum. Vacas soropositivas apresentaram 10,6 vezes mais chances de serem sororreagentes ao Neospora caninum do que vacas sem histórico de abortamento, concluindo-se que existe associação entre histórico de abortamento e presença de anticorpos contra Neospora caninum. Para a determinação da ocorrência de anticorpos anti-N. caninum e a expressão gênica das citocinas em vacas leiteiras e em bezerras sororreagentes, utilizou-se oito propriedades leiteiras de quatro municípios da região oeste do Paraná. Coletou-se amostras de sangue de vacas e das progênies no primeiro dia após o parto, totalizando 54 animais adultos e 55 bezerras (houve um parto gemelar). Nova colheita foi realizada nas bezerras aos seis meses de idade. A ocorrência de anticorpos anti-N. caninum nas vacas recém-paridas foi de 9,23% e das progênies ao nascimento foi de 23,2%. Aos seis meses de idade, 23% (3/13) das bezerras foram novamente sororreagentes. Nos oito rebanhos monitorados, 37,5% (3/8) possuíam animais reagentes. Os grupos de animais sororreagentes e não sororreagentes não diferiram entre si quando avaliado os níveis de IFN-? e IL-10, tanto para as vacas quanto para as bezerras (p>0,05). A expressão gênica das citocinas IFN-? e IL-10 foi menor, apesar de não significativamente, em bezerras e vacas soropositivas em relaçãoàs soronegativas ao Neospora caninum.
Doppler velocimetria e graus de lesões histológicas testiculares associados à cinética espermática em felinos domésticos
(2022-02-02) Trautwein, Luiz Guilherme Corsi; Martins, Maria Isabel Mello; Morotti, Fábio; Gava, Fabio Nelson; Souza, Mírley Barbosa de; Sant'Anna, Marcos Cezar
Os testículos são muito sensíveis a alterações hemodinâmicas e, para garantir a viabilidade espermática, é necessário que haja uma correta perfusão sanguínea, à qual é realizada pela artéria testicular. É possível realizar a mensuração da hemodinâmica vascular da artéria testicular por meio da Ultrassonografia Doppler. Foi demonstrado, em diversas espécies, que há correlações entre as variáveis Doppler com a qualidade espermática, porém, em felinos estes relatos são escassos, assim como outros parâmetros da análise reprodutiva nesta espécie, como é o caso da avaliação histopatológica de degeneração testicular e sua comparação com resultados da análise de sêmen. Sendo assim, os objetivos foram comparar a velocidade do fluxo sanguíneo na artéria testicular em gatos sedados com dexmedetomidina e cetamina e não sedados, bem como comparar entre os diferentes graus de degeneração histopatológica testicular e as características de cinética e movimento espermático em gatos. Este estudo foi dividido em três manuscritos: a) foram utilizados 27 gatos, alocados em dois grupos: grupo sedado (SG – dexmedetomidina (10 μg/kg) e cetamina (12 mg/kg); n=20) e grupo não sedado (NSG; n=7). Ambos os grupos foram submetidos à análise Doppler da artéria testicular e, após serem submetidos à orquiectomia, foi realizada a recuperação dos espermatozoides, por meio da compressão da cauda do epidídimo e a avaliação da cinética espermática no sistema CASA, morfologia e integridade de membrana espermática. Os dados de Doppler velocimetria dos grupos SG e NSG foram comparados utilizando o teste de Mann-Whitney, bem como foi realizado o teste de correlação entre as variáveis Doppler e de qualidade espermática. O NSG apresentou menor velocidade de fluxo nas regiões supratesticular e marginal (velocidade de pico sistólico – PSV de 5,56 cm/s e 5,91 cm/s, valor de p = 0,002 e < 0,001; velocidade diastólica final - EDV 2,89 cm/s e 3,96 cm/s, valor de p = < 0,001 e < 0,001) quando comparado com o SG (PSV 7,42 cm/s e 11,51 cm/s; EDV 4,42 cm/s e 7,72 cm/s), assim como não houve diferença entre as regiões no NSG (p=0.550). Houve correlação negativa entre a porcentagem de espermatozoides rápidos com o PSV e EDV da região marginal do SG (r=-0,382; r=-0,314), bem como entre a velocidade curvilínea (VCL) e a EDV da região supratesticular no NSG (r=-0,565); b) Foram utilizados 25 gatos, submetidos à orquiectomia eletiva e, após a recuperação dos espermatozoides da cauda do epidídimo, os testículos foram fixados e processados histologicamente. Foi possível categorizar os testículos em diferentes graus de degeneração testicular e extensão da lesão no parênquima. Os achados de grau de degeneração e extensão da lesão foram comparados com as variáveis do espermograma por análise de variância. Testículos com lesões focais ou multifocais não apresentaram diferença nos valores de cinética espermática e análise Doppler velocimétrica; c) Revisão de literatura acerca da análise ultrassonográfica reprodutiva em cães e gatos. Conclui-se que houve diferença entre a hemodinâmica testicular de animais sedados com dexmedetomidina/cetamina e não sedados, assim como houve a correlação entre variáveis Doppler velocimétricas e características de cinética espermática. Além disso, testículos com lesões degenerativas difusas apresentaram espermatozoides com piores características de movimento cinético.
Piroplasmose e hemoplasmose em ovinos do norte do Paraná
(2022-05-05) Abate, Hugo Luca; Garcia, João Luis; Barros, Luiz Daniel de; Vieira, Rafael Felipe da Costa; Pacheco, Richard de Campos; Rodrigues, Fernando de Souza
As hemoparasitoses ovinas são causadas por vários microrganismos, entre eles estão os micoplasmas hemotropicos e os piroplasmas. Poucos relatos quanto a presença de micoplasmose em ovinos existem no Brasil e no caso dos piroplasmas a sua descrição em ovinos no brasil é inexistente na literatura. Apesar da presença de uma grande quantidade de animais no rebanho de ovinos brasileiro pouco se sabe sobre a prevalência e transmissão de hemoparasitoses de ovinos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a prevalência molecular de hemoparasitas em ovinos oriundos da região Norte do Estado do Paraná, Brasil. identificar piroplasmas e Mycoplasma hemotropicos em Ovinos do Norte do Paraná. determinar as espécies de hemoparasitas encontradas nos Ovinos do Norte do Paraná. Foram coletadas 347 amostras de sangue por venopunção em ovinos das cidades de Londrina, Cambé, Ibiporã, Apucarana, Sertanópolis, Jaguapitã e Guaraci, todas localizadas no Norte do Paraná, Brasil. Destes animais foram coletados também os carrapatos aderidos aos animais quando presente. Para os piroplasmas o alvo foi o gene ribossomal 18S e para micoplasmas hemotropicos um fragmento do gene 16S rRNA. Das 347 amostras analisadas 92 (26%) foram positivas, dentre estas positivas duas foram selecionadas para sequenciamento e após analise apresentaram uma semelhança de 99% com isolados de Mycoplasma ovis. Para o gene 18S de piroplasmas uma amostra se apresentou positiva, após seu envio para sequenciamento e analise, foi demonstrado uma semelhança de 100% com isolados de Babesia caballi previamente depositados no GenBank. Com bases nos resultados se obteve como considerações finais: Uma espécie de Babesia próxima a Babesia caballi está presente em ovinos no estado do Paraná, Sul do Brasil; Uma espécie de Micoplasma hemotropico próximo a Mycoplasma ovis está presente em ovinos no estado do Paraná, Sul do Brasil; A criação de múltiplas espécies em associação, com ênfase entre as espécies ovina e equina, situação encontrada neste trabalho, demonstra o potencial de infeção por hemopasitas encontrados em outros hospedeiros na mesma região; Estudos para identificar e quantificar os ectoparasitas e o potencial de transmissão de hemoparasitas para os ovinos são necessários para elucidar aspectos epidemiológicos destas moléstias incidentes na região.
Ocorrência e caracterização genética de Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em ovinos da região norte do Paraná
Seixas, Mércia de; Garcia, João Luis [Orientador]; Rodrigues, Fernando de Souza; Barros, Luiz Daniel de; Bresciani, Kátia Denise Saraiva; Ogawa, Liza
Resumo: Cryptosporidium spp e Giardia spp são protozoários entéricos conhecidos mundialmente por causar quadros de diarreia, dor abdominal e perda de peso principalmente em animais jovens Os ovinos além de terem contato com outras espécies de animais são possíveis reservatórios de protozoários com potencial zoonótico O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência e caracterizar geneticamente o Cryptosporidium spp e a Giardia spp em ovinos da região norte do Paraná Foram coletadas 443 amostras de fezes de ovinos de diferentes idades e raças, de ambos os sexos Após extração do DNA as amostras foram submetidas a nested PCR (n-PCR) da região 18S rDNA As positivas foram submetidas a técnica de Polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP) e sequenciamento genético Para análise da presença da Giardia spp foi realizada n-PCR, as amostras positivas foram submetidas a n-PCR para o gene ß-giardina, e as positivas nesta técnica foram enviadas para sequenciamento genético A presença do Cryptosporidium spp foi identificada em três amostras (,7%) na n-PCR, essas amostras foram submetidas a RFLP, uma das amostras foi identificada como C parvum, e a outras duas apresentaram um padrão de clivagem compatível com C bovis e/ou C xiaoi No sequenciamento genético foi possível confirmar os resultados, sendo a primeira C parvum, e as duas últimas como C xiaoi As análises de n-PCR para Giardia spp revelaram 92 amostras positivas (2,8%), que foram submetidas ao gene ß- giardina, destas 25 foram positivas (27,2%) Algumas amostras positivas no gene ß-giardina foram sequenciadas, onde foi possível observar a ocorrência da G duodenalis assemblage E Este é o primeiro estudo a descrever a presença destes parasitas em ovinos na região Norte do Paraná O presente estudo evidenciou que os ovinos podem atuar como um potencial reservatório desses protozoários, o que poderia acarretar em transmissão aos humanos e outros animais, além de causar prejuízos à sanidade animal e econômicos ao produtor
Inhibitory potential of lactiplantibacillus plantarum as biocontrol of spoilage and mycotoxigenic penicillium in cheese
Mareze, Juliana; Beloti, Vanerli [Orientador]; Tamanini, Ronaldo; Santana, Elsa Helena Walter de; Pretto-Giordano, Lucienne Garcia; López-Díaz, Teresa María; López-Díaz, Teresa María [Coorientadora]
Resumo: O queijo é um excelente substrato para o crescimento de fungos e seu potencial deteriorante é uma grande preocupação para a indústria de laticínios O emprego de aditivos alimentares é uma das alternativas utilizadas para controlar a contaminação por fungos e evitar a deterioração do produto O uso de conservantes naturais tem se tornado popular devido à preocupação com os efeitos nocivos dos conservantes químicos As bactérias ácido lácticas são utilizadas como culturas iniciadoras na fabricação de queijos e, devido ao seu efeito inibitório contra outros microrganismos, seu uso como agente biocontrolador pode ser uma alternativa para controlar fungos deteriorantes e micotoxigênicos em queijo Esta tese explora a possibilidade do uso de cepas de Lactobacilos para inibir o crescimento de fungos em queijo Com o objetivo de avaliar o potencial antifúngico de Lactobacillus, foram selecionadas 32 cepas previamente isoladas do Queijo Serrano Artesanal e testadas contra P nordicum, P commune, P expansum e P roqueforti Do total dos Lactobacillus avaliados, duas cepas (L119 e L49) apresentaram alta atividade antifúngica contra todos Penicillium spp testados Essas duas cepas identificadas como L plantarum foram selecionadas para caracterizar o composto responsável pela atividade antimicrobiana Nossos resultados sugerem que a capacidade inibitória não está ligada somente à produção de ácidos, uma vez que a neutralização das substâncias produzidas em meio de cultura manteve inibição frente aos patógenos e fungos filamentosos testados, indicando que outras substâncias possam estar envolvidas L plantarum-L119 e o L49 mostraram capacidade de inibir E coli, S enterica, S aureus e L monocytogenes por meio das técnicas spot-on-lawn e turbidimétricas, além de apresentarem características fermentativas e tecnológicas interessantes, conforme avaliação realizada com o API5CH e APIZYM, respectivamente Dentre os principais fungos deteriorantes e micotoxigênicos, foram isoladas de amostras de queijo, 17 cepas do gênero Penicillium e identificadas por caracterização morfológica, análise de extrólitos e sequenciamento de DNA Do total de cepas avaliadas, nove foram identificadas como P commune Também foi analisada a capacidade de produção do ácido ciclopiazônico (CPA) pelas cepas de P commune isoladas neste estudo, e os resultados mostram que algumas cepas são boas produtoras enquanto outras produzem baixas quantidades de CPA, com interesse para a indústria de queijos Ao confirmar que P commune é a principal espécie deteriorante e micotoxigênica encontrada em queijos, estudamos o efeito de duas cepas de L plantarum (L119 e L49) sobre seu crescimento e produção de CPA in vitro e também em queijo L119 e L49 demonstraram boa capacidade de conter o crescimento dos fungos filamentosos e produção de micotoxinas in vitro A capacidade antifúngica do L119 se estendeu à inibição da produção de CPA em fatias de queijo Esses resultados mostraram que L plantarum-L119 é um bom candidato para uso como bioconservante na indústria de laticínios, apresentando característica tecnológica, capacidade de inibir bactérias patogênicas, fungos filamentosos e suas respectivas micotoxinas em queijo Análises adicionais devem ser realizadas para explorar sua segurança e seus efeitos organolépticos em produtos lácteos A perspectiva futura é utilizar as BAL antifúngicas em alimentos para controlar o crescimento de fungos deteriorantes e micotoxigênicos
Perfil sanitário dos trabalhadores e contactantes de granjas suinícolas do oeste do Paraná, Brasil
Bittencourt, Laura Helena França de Barros; Navarro, Italmar Teodorico [Orientador]; Freire, Roberta Lemos; Breganó, Regina Mitsuka; Mori, Fabiana Maria Ruiz Lopes; Takiuchi, Elisabete
Resumo: O presente trabalho teve como objetivo determinar o perfil sanitário dos trabalhadores e contactantes de 138 granjas suinícolas dos municípios de Palotina, Nova Santa Rosa e Maripá,Paraná, Brasil, a partir da prevalência da leptospirose, brucelose, toxoplasmose, leishmaniose, enteroparasitoses e picobirnaviroses e caracterizar as variáveis associadas a essas doenças Foram avaliadas amostras de soros de 41 indivíduos pela soroaglutinação microscópica (SAM) para pesquisa de anticorpos IgG anti-Leptospira, teste de aglutinação bacteriana para pesquisa de anticorpos IgG anti-Brucella, imunoensaio de micropartículas por quimioluminescência (CMIA) para pesquisa de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii e imunofluorescência indireta (IFI) para pesquisa de anticorpos IgG anti- Leishmania e nested-PCR para as amostras reagentes para Leishmania A pesquisa de enteroparasitos foi realizada em amostras de fezes de 346 indivíduos pelos métodos de sedimentação espontânea, flutuação em sulfato de zinco e coloração de Ziehl-Neelsen modificada; e a pesquisa de Picobirnavírus (PBV) foi realizada em 258 amostras de fezes pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida e RT-PCR nas amostras com perfil eletroforético característico Todos os participantes responderam a um questionário epidemiológico, para análise das variáveis associadas ao risco da infecção pelos agentes pesquisados A prevalência da infecção da leptospirose e da brucelose foi de 2,4%, a toxoplasmose foi de 55,6%, a leishmaniose foi de 3,4% e três amostras foram positivas na nested-PCR para Leishmania Foi verificada associação significativa entre o sexo masculino e a ocorrência de infecção por Leptospira spp Os individuos com idade igual ou maior de 21 anos apresentaram maior risco de infecção pelo T gondii Outras variáveis estudadas como renda familiar, tempo de trabalho e tempo de moradia, não influenciaram na ocorrência desses agentes A prevalência geral de enteroparasitoses foi de 23% Os protozoários mais frequentes foram Endolimax nana (17,3%) e Entamoeba coli (6,9%) Outros protozoários encontrados foram E histolytica/dispar (,3%), Iodamoeba bustschlii (1,2%) e Giardia spp (1,5%) Entre os helmintos foram observados o Hymenolepis nana (,9%) e Ancilostomídeo (,6%) Na análise estatística, a presença de Entamoeba coli foi associada ao risco da infecção por Endolimax nana (p<,1; OR=8,4; IC 95%= 3,52 - 2,3) A prevalência de PBV foi de 11,2% (29/258) Não foi observada relação estatística significativa da co-infecção do PBV com os enteroparasitos encontrados Verificouse que os trabalhadores e contactantes das granjas suinícolas foram expostos aos agentes da leptospirose, brucelose, toxoplasmose e leishmaniose, mas não houve associação entre a ocorrência das infecções e o trabalho com suinos Os resultados demonstraram a ocorrência do PBV na região e novas pesquisas são necessárias para verificar o perfil epidemiológico desse vírus Para controlar as infecções pelos agentes pesquisados é preciso instituir as ações preventivas, como a educação sanitária, para a população estudada
Caracterização genotípica e biológica de isolados de Toxoplasma gondii no Brasil
Nino, Beatriz de Souza Lima; Garcia, João Luis [Orientador]; Navarro, Italmar Teodorico; Breganó, Regina Mitsuka; Albuquerque, George Rego; Barros, Luiz Daniel de
Resumo: O isolamento de Toxoplasma gondii por meio de bioensaio em camundongos é uma metodologia bastante utilizada para auxiliar estudos sobre a patogenia e virulência de cepas isoladas em amostras humanas, animais ou ambientais T gondii foi o causador de um surto de grandes proporções no ano de 218 no município de Santa Maria – RS Foram confirmados 89 casos, sendo 114 gestantes, com três óbito fetais, 1 abortamentos, e 22 casos de toxoplasmose congênita (TC) Este trabalho teve por objetivo caracterizar genotipicamente 13 cepas isoladas de diferentes espécies, bem como, isolar e genotipar o parasita presente nas amostras de placenta humana obtidas durante o surto de toxoplasmose no município de Santa Maria, além de verificar a virulência dessas cepas em camundongos Todas as amostras também foram submetidas ao teste de virulência em camundongos, para avaliar a curva de sobrevivência, onde foram realizados inóculos nas diluições 15, 14, 1³, 1² e 1 taquizoítos por mL e posteriormente inoculados em camundongos por via intraperitoneal A caracterização genotípica dos isolados foi realizada pela PCR-RFLP, utilizando os 11 marcadores genéticos (SAG1, 5’-3’SAG2, alt SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico), e clivados com enzimas de restrição Das 13 cepas analisadas foi possível caracterizar seis genótipos diferentes, sendo quatro distribuídos aos genótipos, #21, #65, #166 bem como dois genótipos novos ainda não descritos no ToxoDB A comparação das curvas de sobrevivência dessas cepas foi avaliada de acordo com o inóculo de 1³ taquizoítos/mL, sendo que apenas duas delas não tiveram características semelhantes a cepa de referência RH de alta virulência Os cinco isolados de placenta humana de Santa Maria demonstraram padrão idêntico para os 1 marcadores genéticos, e não foi associado a nenhum genótipo dos tipos clonais típicos I, II e III, sendo considerados virulentos pois houve mortalidade de 1% em animais inoculados com doses de 15, 14 e 1³ e 1² taquizoítos/ml compatíveis com cepas de alta virulência como a RH As cepas analisadas confirmam a elevada diversidade genotípica e biológica dos isolados brasileiros, bem como, a origem a partir de um único isolado no surto em Santa Maria (Nota: Neste resumo, o numeral 15 deve ser lido como dez elevado à quinta potência)
Parâmetros hematológicos, bioquímicos e oxidativos de concentrados de hemácias de cães, armazenados em bolsas plásticas de CPD/SAG-M
Martins, Raquel Reis; Pereira, Patrícia Mendes [Orientador]; Flaiban, Karina Keller Marques da Costa; Gava, Fábio Nelson; Amarante, Marla Karine; Marquez, Ellen de Souza; Venturini, Danielle [Coorientadora]
Resumo: Durante o armazenamento das bolsas de sangue, pode ocorrer deterioração progressiva das hemácias, comprometendo sua viabilidade pós-transfusional Por serem células ricas em oxigênio, as hemácias se tornam alvos de espécies reativas, resultando nas chamadas "lesões de estoque" O objetivo deste estudo foi descrever as alterações hematológicas, bioquímicas e oxidativas que ocorreram durante o armazenamento por 42 dias em bolsas de concentrados de hemácias (CH), refrigeradas entre 2ºC e 6ºC e preservadas em CPD/SAG-M Foram selecionados 48 doadores de sangue com peso superior a 28 kg, com idades entre 2 a 8 anos, saudáveis, de comportamento dócil para coletar de 35 a 45mL de sangue Os parâmetros de hemograma (número total de hemácias, hemoglobina, volume globular, volume corpuscular médio e leucócitos totais), o grau de hemólise, os bioquímicos (glicose, lactato, pH, concentração de bicarbonato, sódio, potássio, cloretos e excesso de base) e o estresse oxidativo (superóxido dismutase, catalase, produtos avançados de oxidação de proteínas e hidroperóxidos lipídicos iniciados por tert-butil) foram analisados logo após a centrifugação (T) e a cada sete dias até 42 dias após o armazenamento (T7, T14, T21, T28, T35 e T42) Inicialmente, foram verificadas a distribuição normal (teste de Shapiro-Wilk) e a homogeneidade da variância (teste de Levene) Quando esses critérios foram atingidos (p>5), para comparar o T entre si, seis diferentes tempos de coleta foram avaliados por Wilcoxon O número de hemácias (HE) e os leucócitos totais (LT) diminuíram durante o armazenamento, enquanto o volume globular (VG), o volume corpuscular médio (VCM) e o grau de hemólise aumentaram Os níveis de glicose, bicarbonato e pH diminuíram significativamente ao longo dos tempos experimentais Já os níveis de potássio, lactato e o déficit do excesso de base (BE) aumentaram com o tempo Houve uma diminuição na atividade da enzima SOD dos CH durante o período de armazenamento e um aumento dos produtos avançados de oxidação de proteínas (AOPPs) e dos hidroperóxidos lipídicos iniciados por tert-butil (CL-LOOH) Os resultados obtidos permitiram concluir que o armazenamento de CH de cães produz alterações hematológicas, bioquímicas e de estresse oxidativo na qualidade do sangue durante o período estudado No entanto, é possível afirmar que houve um ambiente favorável para a manutenção da viabilidade das hemácias, sendo seu uso seguro até os 28 dias de armazenamento
Avaliação do índice de marmoreio e do tempo de estocagem da carne com o uso da Inteligência Computacional
Barbon, Ana Paula Ayub da Costa; Bridi, Ana Maria [Orientador]; Pozza, Paulo César; Barbin, Douglas Fernandes; Soares, Adriana Lourenço; Felinto, Alan Salvany; Barbon Junior, Sylvio [Coorientador]
Resumo: A Inteligência Computacional consiste em um conjunto de metodologias computacionais para auxiliar na compreensão de fenômenos do ‘mundo real’ em diversas áreas Na Ciência dos Alimentos vem sendo aplicada como uma alternativa promissora para tratar problemas de subjetividade, tempo e custo das análises, usando abordagens baseadas na simulação do conhecimento humano por meio de inteligência artificial dos computadores Em geral, técnicas computacionais contribuem para a oferta de produtos com qualidade, sendo aplicadas com maior precisão, velocidade e sem deterioração das amostras quando comparadas aos métodos de análises tradicionais Na última década, a Visão Computacional têm sido uma das técnicas mais exploradas no controle de qualidade da carne Ela se baseia no Processamento de Imagem e no Aprendizado de Máquina Neste trabalho, a Visão Computacional foi utilizada com sucesso com a abordagem k-NN (k-Nearest Neighbors) para a avaliação do marmoreio de forma automática, rápida e objetiva podendo ser aplicada em diversos tipos de músculo animal e padrão de marmoreio A acurácia do modelo de Visão Computacional para carne bovina foi de 81,59% e para carne suína foi de 76,14% Paralelamente, foram testados alguns algoritmos de Aprendizado de Máquina para a predição do tempo de armazenamento da carne suína Verificou-se a melhor performance dos algoritmos Random Forest, k-NN e aqueles baseados em Lógica Fuzzy em predizer o tempo de armazenamento da carne suína em , 7 e 14 dias de forma rápida utilizando técnicas tradicionais como a capacidade de retenção de água, o pH e a cor sem a necessidade de análises mais complexas e demoradas como a avaliação da oxidação pela metodologia TBARS (Substâncias Reativas ao Ácido 2-Tiobarbitúrico) Pode-se concluir que a aplicação da Inteligência Computacional por meio das técnicas de Visão Computacional e algoritmos de Aprendizado de Máquina foram eficientes para a avaliação da qualidade da carne, podendo ser uma ferramenta útil para automatizar as tarefas relacionadas à análise de qualidade na Indústria
Associação de fatores e prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos e caprinos do Paraná e carneiros reprodutores do Rio Grande do sul, Brasil
Romanelli, Paulo Roberto; Navarro, Italmar Teodorico [Orientador]; Garcia, João Luis; Breganó, Regina Mitsuka; Minho, Alessandro Pelegrine; Okano, Werner
Resumo: O presente trabalho é parte integrante do Programa Nacional de Caracterização Zoosanitária da caprinocultura e da ovinocultura no Brasil: Epidemiologia, fatores de risco e impacto econômico das enfermidades; objetivando a determinação da prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum nos rebanhos ovinos e caprinos do estado do Paraná e carneiros reprodutores do Rio Grande do Sul e os fatores associados a essas enfermidades Foram colhidas 1617 amostras de soro ovino de 84 propriedades distribuídas em 25 municípios e 597 amostras de soro caprino em 35 propriedades distribuídas em 2 municípios No estado do Rio Grande do Sul em 225 municípios foram colhidas 18 amostras de soro de reprodutores ovinos em 75 propriedades No estado do Paraná para análise dos soros ovinos, utilizou-se a técnica de Elisa indireto para detecção de anticorpos anti-T gondii e para detecção de anticorpos anti-N caninum Na análise dos soros caprinos, empregou-se a reação de ELISA indireto para detecção de anticorpos anti-T gondii e também para detecção de anticorpos anti-Neospora caninum a técnica de ELISA indireto (Kit comercial) Em relação aos soros de reprodutores ovinos do estado do Rio Grande do Sul, utilizou-se a técnica de Elisa indireto para detecção de anticorpos anti-T gondii e na detecção de anticorpos anti-N caninum foi utilizada a reação de Imunofluorescência indireta (Kit comercial) O rebanho ovino do Paraná apresentou prevalência de 45,94% (743/1617) para T gondii, 17,62% (285/1617) para N caninum, sendo que destas apenas 9,9% (161/1617) foram reagentes para os dois parasitos No rebanho caprino a prevalência foi de 37,52% (224/597) para T gondii e 7,37% (44/597) para N caninum sendo 3,18% (19/597) dos animais reagentes aos dois parasitos Os ovinos reprodutores do Rio Grande do Sul apresentaram prevalência de 33,5% (595/18) de T gondii, 18,44% (332/18) ao N caninum e 8,94% (161/18) destes animais reagentes aos dois agentes No estado do Paraná, em relação ao rebanho ovino, as variáveis “presença de gatos” (OR=1,36), “animais recolhidos diariamente para abrigo” (OR=1,92), “sexo (fêmea)” (OR=1,83), “idade (> 1 ano)” (OR=2,6), “presença de aborto” (OR=1,47), “água proveniente de fontes superficiais” (OR=1,41) e “água fornecida em vasilhames fora das instalações” (OR=1,67), apresentaram associações significativas entre o resultado da sorologia para o T gondii, revelando-se como fatores de risco para ocorrência da toxoplasmose As variáveis “separa matrizes antes de parir” (OR=1,35), “animais que tem livre acesso às fontes de água” (OR=1,38), “água fornecida em vasilhames fora das instalações” (OR=2,8), “idade (> 1 ano)” (OR=1,8), “sexo (fêmea) (OR=2,63) e “cães que se alimentam de restos placentários de ovinos” (OR=1,7), apresentaram associação significativa à sorologia para N caninum, revelando-se como fatores de risco para a ocorrência da neosporose ovina O estudo do rebanho caprino revelou associação significativa entre o resultado da sorologia para T gondii e as variáveis “presença de gatos” (OR=2,26), “presença de felídeos selvagens” (OR=1,97), “local de abate para animais na propriedade” (OR=2,35), “gatos se alimentam de restos placentários” (OR=2,53), “idade (> 8 meses) (OR=2,53), “fornece ração concentrada aos animais” (OR=1,84), “água fornecida em vasilhames fora das instalações” (OR=3,16), “animais bebem água direto da fonte” (OR=2,91), “água proveniente de fonte profunda” (OR=3,61); quanto ao N caninum, ocorreu associação entre as variáveis “fornece ração concentrada aos animais” (OR=4,77) e “morte até o desmame” (OR=9,65), apresentando-se como fatores de risco para a ocorrência da toxoplasmose e neosporose, respectivamente No rebanho ovino do Rio Grande do Sul as variáveis “tamanho da propriedade (<5ha)” (OR=1,94), “tamanho do rebanho (<1 animais)” (OR=1,44), “sistema de criação (semi-intensivo/intensivo) (OR=1,71), “monta natural sem controle” (OR=1,97) e “pastoreio dos ovinos em outras propriedades” (OR=1,87) apresentaram-se como fator de risco para ocorrência do T gondii e as variáveis “tamanho da propriedade (<5ha)” (OR=1,86), “tamanho do rebanho (<1 animais)” (OR=1,42), “sistema de criação (semi-intensivo/intensivo) (OR=1,46) e “monta natural sem controle” (OR=2,81) apresentaram-se como fatores de risco para ocorrência do N caninum As taxas denotam importantes prevalências dos agentes distribuídas nos dois estados, o estudo das variáveis associadas a essas parasitoses, permitiu caracterizar deficiências de manejo ambiental e saneamento, manejo nutricional, presença de hospedeiros e tipo de exploração; que irá subsidiar programas sanitários e políticas públicas relacionadas à prevenção de T gondii e de N caninum em rebanhos de pequenos ruminantes no Sul do Brasil
Análise quantitativa de senecavirus A em fragmentos de 2 tecidos de leitões recém-nascidos naturalmente infectados
Dall Agnol, Alais Maria; Alfieri, Alice Fernandes [Orientador]; Silva, Caio Abércio da; Araújo Junior, João Pessoa; Heinemann, Marcos Bryan; Headley, Selwyn Arlington
Resumo: Senecavirus A (SVA) é a única espécie do gênero Senecavirus, família Picornaviridae SVA é um vírus RNA fita simples, de polaridade positiva, não envelopado e genoma com aproximadamente 7,2 kb Desde 27, SVA tem sido associado à doença vesicular em suínos nos Estados Unidos da América, Brasil, Colômbia, China e Tailândia A partir de 215, uma nova síndrome multissistêmica associada à infecção por SVA tem sido relatada em leitões recém-nascidos nesses países SVA foi identificado por técnicas moleculares (RT-PCR, qRT-PCR e nested-RT-PCR), imuno-histoquímica e/ou hibridização in situ em diferentes órgãos de leitões recém-nascidos Embora a RT-PCR quantitativa (qRT-PCR) tenha sido utilizada para detectar RNA de SVA a partir de amostras biológicas de suínos, não há relatos da determinação da carga viral nos diferentes tecidos de leitões recém-nascidos com sinais clínicos consistentes com a infecção pelo vírus O objetivo deste estudo foi avaliar a distribuição tecidual e a carga viral de SVA em diferentes amostras biológicas de leitões sintomáticos, naturalmente infectados, provenientes de rebanhos suínos com histórico de doença vesicular No primeiro estudo foi validado um teste de qRT-PCR utilizando TaqMan como ferramenta para a detecção e quantificação de RNA de SVA em amostras biológicas de suínos Um conjunto de primers e probe específicos para amplificar um produto de 118 pb da região VP1 do genoma do vírus foi desenhado para ser utilizado na técnica de qRT-PCR A avaliação da eficiência da qRT-PCR TaqMan foi realizada em 45 amostras de tecidos de 15 leitões sintomáticos (n = 38) e quatro (n = 7) assintomáticos previamente caracterizados como positivos ou negativos para SVA por RT-PCR convencional Entre amostras biológicas provenientes de leitões sintomáticos, 18 (47,4%) e 3 (78,9%) foram positivas por RT-PCR convencional e qRT-PCR, respectivamente Todas as amostras obtidas de leitões assintomáticos foram negativas para o vírus em ambas as técnicas utilizado Os resultados demonstram que a técnica de qRT-PCR utilizando TaqMan padronizada neste estudo é rápida e apresenta alta sensibilidade, especificidade e repetibilidade, sendo capaz de gerar resultados confiáveis na detecção e quantificação de RNA de SVA em amostras biológicas de suínos O segundo estudo avaliou a distribuição e a carga viral de SVA em diferentes amostras de órgãos/tecidos provenientes de leitões recém-nascidos sintomáticos Por meio da técnica qRT-PCR previamente padronizada no primeiro estudo, foram analisados fragmentos de tronco encefálico, cerebelo, cérebro, coração, rim, fígado, pulmões, intestino delgado, baço, bexiga e tonsila provenientes de sete leitões recém-nascidos O RNA de SVA foi detectado em 81,4% (57/7) das amostras avaliadas A carga viral variou de 4,7 a 1,38 log1 cópias genômicas/g de tecido Os resultados demonstram que o SVA tem tropismo por diferentes órgãos em leitões recém-nascidos naturalmente infectados, principalmente tonsilas, baço, pulmão e fígado Órgãos linfoides apresentam altas cargas virais e podem ser importantes sítios de replicação de SVA A ampla distribuição de RNA de SVA em órgãos/tecidos dos sistemas cardiovascular, respiratório, digestório, urinário, neurológico e linfático demonstra a capacidade do vírus em causar infecção multissistêmica em leitões recém-nascidos e a sua participação nas manifestações clínicas observadas
Uso de 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo no desempenho reprodutivo de fêmeas suínas e sua progênie
Gavioli, David Fernandes; Silva, Caio Abércio da [Orientador]; Bridi, Ana Maria; Garbossa, Cesar Augusto Pospissil; Santos, José Maurício Gonçalves dos; Martins, Maria Isabel Mello
Resumo: A seleção genética tem desenvolvido fêmeas suínas mais produtivas, sendo assim, se torna imprescindível que a nutrição venha dar suporte às condições necessárias para que esses animais expressem seu potencial genético Alguns nutrientes, como vitaminas e minerais, contribuem para aprimorar essa relação genética e nutrição Assim, objetivou-se com este trabalho avaliar o desempenho reprodutivo de fêmeas suínas suplementadas com a forma natural da vitamina D, a 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo, que está relacionada principalmente com a melhoria na absorção e metabolismo de cálcio e fósforo, além de atuar em receptores de regulação hormonal As avaliações de desempenho reprodutivo ocorreram em dois ciclos reprodutivos subsequentes, sendo que, no primeiro ciclo as fêmeas permaneceram em salas de maternidade com ambiência climatizada e não climatizada e já no segundo ciclo as mesmas fêmeas foram avaliadas sob um mesmo ambiente não climatizado, em ambos os ciclos, as fêmeas foram acompanhadas a partir do terço final de gestação até o fim da lactação Foram selecionadas 14 fêmeas (1° a 7° partos-Genética Danbred), divididas em dois tratamentos inteiramente casualizados, Teste e Controle No terço final de gestação e durante toda a fase de lactação, o grupo teste (n = 52) recebeu 7 µg / porca / dia de 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo adicionados on top sobre a ração e as outras 52 fêmeas foram utilizadas como grupo controle Um subgrupo composto de 12 animais de cada tratamento também foi avaliado, através da coleta de sangue, quanto a dosagem de cálcio, fósforo, ferro, fosfatase alcalina total e magnésio no momento do pré e pós-parto (em ambos os ciclos) sob efeito da vitamina e ao respectivo desmame aos 21 dias de idade Não houve efeito entre o uso de 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo e a condição de climatização das salas de maternidade No entanto, entre os tratamentos foi observado que a duração de parto do grupo teste foi inferior em 9 minutos em comparação ao controle, assim como também a produção de colostro das fêmeas e a consequente ingestão pelos leitões (4,54 kg e 336 g respectivamente) foram melhores nas fêmeas que ingeriram a vitamina D3 em sua forma natural e ativa e da mesma forma o GPD dos leitões (124 g) nas 24 hs pós o parto As matrizes que receberam a vitamina D3 glicosídeo durante dois partos consecutivos apresentaram no parto subsequente uma redução de 2 % no número de natimortos e um leitão vivo a mais quando comparadas com o grupo controle Frente aos resultados observados, a Vitamina D3 glicosídeo, foi eficiente no aumento do número de leitões nascidos vivos e reduziu a natimortalidade em fêmeas suínas que receberam essa vitamina durante dois partos consecutivos De maneira geral, o uso da vitamina 1,25-dihidroxivitamina D3 melhorou a dinâmica de partos e a performance reprodutiva de fêmeas suínas e o desempenho da progênie

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