01 - Doutorado - Ciência Animal
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Item Ocorrência e caracterização genética de Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em ovinos da região norte do ParanáSeixas, Mércia de; Garcia, João Luis [Orientador]; Rodrigues, Fernando de Souza; Barros, Luiz Daniel de; Bresciani, Kátia Denise Saraiva; Ogawa, LizaResumo: Cryptosporidium spp e Giardia spp são protozoários entéricos conhecidos mundialmente por causar quadros de diarreia, dor abdominal e perda de peso principalmente em animais jovens Os ovinos além de terem contato com outras espécies de animais são possíveis reservatórios de protozoários com potencial zoonótico O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência e caracterizar geneticamente o Cryptosporidium spp e a Giardia spp em ovinos da região norte do Paraná Foram coletadas 443 amostras de fezes de ovinos de diferentes idades e raças, de ambos os sexos Após extração do DNA as amostras foram submetidas a nested PCR (n-PCR) da região 18S rDNA As positivas foram submetidas a técnica de Polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP) e sequenciamento genético Para análise da presença da Giardia spp foi realizada n-PCR, as amostras positivas foram submetidas a n-PCR para o gene ß-giardina, e as positivas nesta técnica foram enviadas para sequenciamento genético A presença do Cryptosporidium spp foi identificada em três amostras (,7%) na n-PCR, essas amostras foram submetidas a RFLP, uma das amostras foi identificada como C parvum, e a outras duas apresentaram um padrão de clivagem compatível com C bovis e/ou C xiaoi No sequenciamento genético foi possível confirmar os resultados, sendo a primeira C parvum, e as duas últimas como C xiaoi As análises de n-PCR para Giardia spp revelaram 92 amostras positivas (2,8%), que foram submetidas ao gene ß- giardina, destas 25 foram positivas (27,2%) Algumas amostras positivas no gene ß-giardina foram sequenciadas, onde foi possível observar a ocorrência da G duodenalis assemblage E Este é o primeiro estudo a descrever a presença destes parasitas em ovinos na região Norte do Paraná O presente estudo evidenciou que os ovinos podem atuar como um potencial reservatório desses protozoários, o que poderia acarretar em transmissão aos humanos e outros animais, além de causar prejuízos à sanidade animal e econômicos ao produtorItem Inhibitory potential of lactiplantibacillus plantarum as biocontrol of spoilage and mycotoxigenic penicillium in cheeseMareze, Juliana; Beloti, Vanerli [Orientador]; Tamanini, Ronaldo; Santana, Elsa Helena Walter de; Pretto-Giordano, Lucienne Garcia; López-Díaz, Teresa María; López-Díaz, Teresa María [Coorientadora]Resumo: O queijo é um excelente substrato para o crescimento de fungos e seu potencial deteriorante é uma grande preocupação para a indústria de laticínios O emprego de aditivos alimentares é uma das alternativas utilizadas para controlar a contaminação por fungos e evitar a deterioração do produto O uso de conservantes naturais tem se tornado popular devido à preocupação com os efeitos nocivos dos conservantes químicos As bactérias ácido lácticas são utilizadas como culturas iniciadoras na fabricação de queijos e, devido ao seu efeito inibitório contra outros microrganismos, seu uso como agente biocontrolador pode ser uma alternativa para controlar fungos deteriorantes e micotoxigênicos em queijo Esta tese explora a possibilidade do uso de cepas de Lactobacilos para inibir o crescimento de fungos em queijo Com o objetivo de avaliar o potencial antifúngico de Lactobacillus, foram selecionadas 32 cepas previamente isoladas do Queijo Serrano Artesanal e testadas contra P nordicum, P commune, P expansum e P roqueforti Do total dos Lactobacillus avaliados, duas cepas (L119 e L49) apresentaram alta atividade antifúngica contra todos Penicillium spp testados Essas duas cepas identificadas como L plantarum foram selecionadas para caracterizar o composto responsável pela atividade antimicrobiana Nossos resultados sugerem que a capacidade inibitória não está ligada somente à produção de ácidos, uma vez que a neutralização das substâncias produzidas em meio de cultura manteve inibição frente aos patógenos e fungos filamentosos testados, indicando que outras substâncias possam estar envolvidas L plantarum-L119 e o L49 mostraram capacidade de inibir E coli, S enterica, S aureus e L monocytogenes por meio das técnicas spot-on-lawn e turbidimétricas, além de apresentarem características fermentativas e tecnológicas interessantes, conforme avaliação realizada com o API5CH e APIZYM, respectivamente Dentre os principais fungos deteriorantes e micotoxigênicos, foram isoladas de amostras de queijo, 17 cepas do gênero Penicillium e identificadas por caracterização morfológica, análise de extrólitos e sequenciamento de DNA Do total de cepas avaliadas, nove foram identificadas como P commune Também foi analisada a capacidade de produção do ácido ciclopiazônico (CPA) pelas cepas de P commune isoladas neste estudo, e os resultados mostram que algumas cepas são boas produtoras enquanto outras produzem baixas quantidades de CPA, com interesse para a indústria de queijos Ao confirmar que P commune é a principal espécie deteriorante e micotoxigênica encontrada em queijos, estudamos o efeito de duas cepas de L plantarum (L119 e L49) sobre seu crescimento e produção de CPA in vitro e também em queijo L119 e L49 demonstraram boa capacidade de conter o crescimento dos fungos filamentosos e produção de micotoxinas in vitro A capacidade antifúngica do L119 se estendeu à inibição da produção de CPA em fatias de queijo Esses resultados mostraram que L plantarum-L119 é um bom candidato para uso como bioconservante na indústria de laticínios, apresentando característica tecnológica, capacidade de inibir bactérias patogênicas, fungos filamentosos e suas respectivas micotoxinas em queijo Análises adicionais devem ser realizadas para explorar sua segurança e seus efeitos organolépticos em produtos lácteos A perspectiva futura é utilizar as BAL antifúngicas em alimentos para controlar o crescimento de fungos deteriorantes e micotoxigênicosItem Perfil sanitário dos trabalhadores e contactantes de granjas suinícolas do oeste do Paraná, BrasilBittencourt, Laura Helena França de Barros; Navarro, Italmar Teodorico [Orientador]; Freire, Roberta Lemos; Breganó, Regina Mitsuka; Mori, Fabiana Maria Ruiz Lopes; Takiuchi, ElisabeteResumo: O presente trabalho teve como objetivo determinar o perfil sanitário dos trabalhadores e contactantes de 138 granjas suinícolas dos municípios de Palotina, Nova Santa Rosa e Maripá,Paraná, Brasil, a partir da prevalência da leptospirose, brucelose, toxoplasmose, leishmaniose, enteroparasitoses e picobirnaviroses e caracterizar as variáveis associadas a essas doenças Foram avaliadas amostras de soros de 41 indivíduos pela soroaglutinação microscópica (SAM) para pesquisa de anticorpos IgG anti-Leptospira, teste de aglutinação bacteriana para pesquisa de anticorpos IgG anti-Brucella, imunoensaio de micropartículas por quimioluminescência (CMIA) para pesquisa de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii e imunofluorescência indireta (IFI) para pesquisa de anticorpos IgG anti- Leishmania e nested-PCR para as amostras reagentes para Leishmania A pesquisa de enteroparasitos foi realizada em amostras de fezes de 346 indivíduos pelos métodos de sedimentação espontânea, flutuação em sulfato de zinco e coloração de Ziehl-Neelsen modificada; e a pesquisa de Picobirnavírus (PBV) foi realizada em 258 amostras de fezes pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida e RT-PCR nas amostras com perfil eletroforético característico Todos os participantes responderam a um questionário epidemiológico, para análise das variáveis associadas ao risco da infecção pelos agentes pesquisados A prevalência da infecção da leptospirose e da brucelose foi de 2,4%, a toxoplasmose foi de 55,6%, a leishmaniose foi de 3,4% e três amostras foram positivas na nested-PCR para Leishmania Foi verificada associação significativa entre o sexo masculino e a ocorrência de infecção por Leptospira spp Os individuos com idade igual ou maior de 21 anos apresentaram maior risco de infecção pelo T gondii Outras variáveis estudadas como renda familiar, tempo de trabalho e tempo de moradia, não influenciaram na ocorrência desses agentes A prevalência geral de enteroparasitoses foi de 23% Os protozoários mais frequentes foram Endolimax nana (17,3%) e Entamoeba coli (6,9%) Outros protozoários encontrados foram E histolytica/dispar (,3%), Iodamoeba bustschlii (1,2%) e Giardia spp (1,5%) Entre os helmintos foram observados o Hymenolepis nana (,9%) e Ancilostomídeo (,6%) Na análise estatística, a presença de Entamoeba coli foi associada ao risco da infecção por Endolimax nana (p<,1; OR=8,4; IC 95%= 3,52 - 2,3) A prevalência de PBV foi de 11,2% (29/258) Não foi observada relação estatística significativa da co-infecção do PBV com os enteroparasitos encontrados Verificouse que os trabalhadores e contactantes das granjas suinícolas foram expostos aos agentes da leptospirose, brucelose, toxoplasmose e leishmaniose, mas não houve associação entre a ocorrência das infecções e o trabalho com suinos Os resultados demonstraram a ocorrência do PBV na região e novas pesquisas são necessárias para verificar o perfil epidemiológico desse vírus Para controlar as infecções pelos agentes pesquisados é preciso instituir as ações preventivas, como a educação sanitária, para a população estudadaItem Caracterização genotípica e biológica de isolados de Toxoplasma gondii no BrasilNino, Beatriz de Souza Lima; Garcia, João Luis [Orientador]; Navarro, Italmar Teodorico; Breganó, Regina Mitsuka; Albuquerque, George Rego; Barros, Luiz Daniel deResumo: O isolamento de Toxoplasma gondii por meio de bioensaio em camundongos é uma metodologia bastante utilizada para auxiliar estudos sobre a patogenia e virulência de cepas isoladas em amostras humanas, animais ou ambientais T gondii foi o causador de um surto de grandes proporções no ano de 218 no município de Santa Maria – RS Foram confirmados 89 casos, sendo 114 gestantes, com três óbito fetais, 1 abortamentos, e 22 casos de toxoplasmose congênita (TC) Este trabalho teve por objetivo caracterizar genotipicamente 13 cepas isoladas de diferentes espécies, bem como, isolar e genotipar o parasita presente nas amostras de placenta humana obtidas durante o surto de toxoplasmose no município de Santa Maria, além de verificar a virulência dessas cepas em camundongos Todas as amostras também foram submetidas ao teste de virulência em camundongos, para avaliar a curva de sobrevivência, onde foram realizados inóculos nas diluições 15, 14, 1³, 1² e 1 taquizoítos por mL e posteriormente inoculados em camundongos por via intraperitoneal A caracterização genotípica dos isolados foi realizada pela PCR-RFLP, utilizando os 11 marcadores genéticos (SAG1, 5’-3’SAG2, alt SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico), e clivados com enzimas de restrição Das 13 cepas analisadas foi possível caracterizar seis genótipos diferentes, sendo quatro distribuídos aos genótipos, #21, #65, #166 bem como dois genótipos novos ainda não descritos no ToxoDB A comparação das curvas de sobrevivência dessas cepas foi avaliada de acordo com o inóculo de 1³ taquizoítos/mL, sendo que apenas duas delas não tiveram características semelhantes a cepa de referência RH de alta virulência Os cinco isolados de placenta humana de Santa Maria demonstraram padrão idêntico para os 1 marcadores genéticos, e não foi associado a nenhum genótipo dos tipos clonais típicos I, II e III, sendo considerados virulentos pois houve mortalidade de 1% em animais inoculados com doses de 15, 14 e 1³ e 1² taquizoítos/ml compatíveis com cepas de alta virulência como a RH As cepas analisadas confirmam a elevada diversidade genotípica e biológica dos isolados brasileiros, bem como, a origem a partir de um único isolado no surto em Santa Maria (Nota: Neste resumo, o numeral 15 deve ser lido como dez elevado à quinta potência)Item Parâmetros hematológicos, bioquímicos e oxidativos de concentrados de hemácias de cães, armazenados em bolsas plásticas de CPD/SAG-MMartins, Raquel Reis; Pereira, Patrícia Mendes [Orientador]; Flaiban, Karina Keller Marques da Costa; Gava, Fábio Nelson; Amarante, Marla Karine; Marquez, Ellen de Souza; Venturini, Danielle [Coorientadora]Resumo: Durante o armazenamento das bolsas de sangue, pode ocorrer deterioração progressiva das hemácias, comprometendo sua viabilidade pós-transfusional Por serem células ricas em oxigênio, as hemácias se tornam alvos de espécies reativas, resultando nas chamadas "lesões de estoque" O objetivo deste estudo foi descrever as alterações hematológicas, bioquímicas e oxidativas que ocorreram durante o armazenamento por 42 dias em bolsas de concentrados de hemácias (CH), refrigeradas entre 2ºC e 6ºC e preservadas em CPD/SAG-M Foram selecionados 48 doadores de sangue com peso superior a 28 kg, com idades entre 2 a 8 anos, saudáveis, de comportamento dócil para coletar de 35 a 45mL de sangue Os parâmetros de hemograma (número total de hemácias, hemoglobina, volume globular, volume corpuscular médio e leucócitos totais), o grau de hemólise, os bioquímicos (glicose, lactato, pH, concentração de bicarbonato, sódio, potássio, cloretos e excesso de base) e o estresse oxidativo (superóxido dismutase, catalase, produtos avançados de oxidação de proteínas e hidroperóxidos lipídicos iniciados por tert-butil) foram analisados logo após a centrifugação (T) e a cada sete dias até 42 dias após o armazenamento (T7, T14, T21, T28, T35 e T42) Inicialmente, foram verificadas a distribuição normal (teste de Shapiro-Wilk) e a homogeneidade da variância (teste de Levene) Quando esses critérios foram atingidos (p>5), para comparar o T entre si, seis diferentes tempos de coleta foram avaliados por Wilcoxon O número de hemácias (HE) e os leucócitos totais (LT) diminuíram durante o armazenamento, enquanto o volume globular (VG), o volume corpuscular médio (VCM) e o grau de hemólise aumentaram Os níveis de glicose, bicarbonato e pH diminuíram significativamente ao longo dos tempos experimentais Já os níveis de potássio, lactato e o déficit do excesso de base (BE) aumentaram com o tempo Houve uma diminuição na atividade da enzima SOD dos CH durante o período de armazenamento e um aumento dos produtos avançados de oxidação de proteínas (AOPPs) e dos hidroperóxidos lipídicos iniciados por tert-butil (CL-LOOH) Os resultados obtidos permitiram concluir que o armazenamento de CH de cães produz alterações hematológicas, bioquímicas e de estresse oxidativo na qualidade do sangue durante o período estudado No entanto, é possível afirmar que houve um ambiente favorável para a manutenção da viabilidade das hemácias, sendo seu uso seguro até os 28 dias de armazenamentoItem Avaliação do índice de marmoreio e do tempo de estocagem da carne com o uso da Inteligência ComputacionalBarbon, Ana Paula Ayub da Costa; Bridi, Ana Maria [Orientador]; Pozza, Paulo César; Barbin, Douglas Fernandes; Soares, Adriana Lourenço; Felinto, Alan Salvany; Barbon Junior, Sylvio [Coorientador]Resumo: A Inteligência Computacional consiste em um conjunto de metodologias computacionais para auxiliar na compreensão de fenômenos do ‘mundo real’ em diversas áreas Na Ciência dos Alimentos vem sendo aplicada como uma alternativa promissora para tratar problemas de subjetividade, tempo e custo das análises, usando abordagens baseadas na simulação do conhecimento humano por meio de inteligência artificial dos computadores Em geral, técnicas computacionais contribuem para a oferta de produtos com qualidade, sendo aplicadas com maior precisão, velocidade e sem deterioração das amostras quando comparadas aos métodos de análises tradicionais Na última década, a Visão Computacional têm sido uma das técnicas mais exploradas no controle de qualidade da carne Ela se baseia no Processamento de Imagem e no Aprendizado de Máquina Neste trabalho, a Visão Computacional foi utilizada com sucesso com a abordagem k-NN (k-Nearest Neighbors) para a avaliação do marmoreio de forma automática, rápida e objetiva podendo ser aplicada em diversos tipos de músculo animal e padrão de marmoreio A acurácia do modelo de Visão Computacional para carne bovina foi de 81,59% e para carne suína foi de 76,14% Paralelamente, foram testados alguns algoritmos de Aprendizado de Máquina para a predição do tempo de armazenamento da carne suína Verificou-se a melhor performance dos algoritmos Random Forest, k-NN e aqueles baseados em Lógica Fuzzy em predizer o tempo de armazenamento da carne suína em , 7 e 14 dias de forma rápida utilizando técnicas tradicionais como a capacidade de retenção de água, o pH e a cor sem a necessidade de análises mais complexas e demoradas como a avaliação da oxidação pela metodologia TBARS (Substâncias Reativas ao Ácido 2-Tiobarbitúrico) Pode-se concluir que a aplicação da Inteligência Computacional por meio das técnicas de Visão Computacional e algoritmos de Aprendizado de Máquina foram eficientes para a avaliação da qualidade da carne, podendo ser uma ferramenta útil para automatizar as tarefas relacionadas à análise de qualidade na IndústriaItem Associação de fatores e prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos e caprinos do Paraná e carneiros reprodutores do Rio Grande do sul, BrasilRomanelli, Paulo Roberto; Navarro, Italmar Teodorico [Orientador]; Garcia, João Luis; Breganó, Regina Mitsuka; Minho, Alessandro Pelegrine; Okano, WernerResumo: O presente trabalho é parte integrante do Programa Nacional de Caracterização Zoosanitária da caprinocultura e da ovinocultura no Brasil: Epidemiologia, fatores de risco e impacto econômico das enfermidades; objetivando a determinação da prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum nos rebanhos ovinos e caprinos do estado do Paraná e carneiros reprodutores do Rio Grande do Sul e os fatores associados a essas enfermidades Foram colhidas 1617 amostras de soro ovino de 84 propriedades distribuídas em 25 municípios e 597 amostras de soro caprino em 35 propriedades distribuídas em 2 municípios No estado do Rio Grande do Sul em 225 municípios foram colhidas 18 amostras de soro de reprodutores ovinos em 75 propriedades No estado do Paraná para análise dos soros ovinos, utilizou-se a técnica de Elisa indireto para detecção de anticorpos anti-T gondii e para detecção de anticorpos anti-N caninum Na análise dos soros caprinos, empregou-se a reação de ELISA indireto para detecção de anticorpos anti-T gondii e também para detecção de anticorpos anti-Neospora caninum a técnica de ELISA indireto (Kit comercial) Em relação aos soros de reprodutores ovinos do estado do Rio Grande do Sul, utilizou-se a técnica de Elisa indireto para detecção de anticorpos anti-T gondii e na detecção de anticorpos anti-N caninum foi utilizada a reação de Imunofluorescência indireta (Kit comercial) O rebanho ovino do Paraná apresentou prevalência de 45,94% (743/1617) para T gondii, 17,62% (285/1617) para N caninum, sendo que destas apenas 9,9% (161/1617) foram reagentes para os dois parasitos No rebanho caprino a prevalência foi de 37,52% (224/597) para T gondii e 7,37% (44/597) para N caninum sendo 3,18% (19/597) dos animais reagentes aos dois parasitos Os ovinos reprodutores do Rio Grande do Sul apresentaram prevalência de 33,5% (595/18) de T gondii, 18,44% (332/18) ao N caninum e 8,94% (161/18) destes animais reagentes aos dois agentes No estado do Paraná, em relação ao rebanho ovino, as variáveis “presença de gatos” (OR=1,36), “animais recolhidos diariamente para abrigo” (OR=1,92), “sexo (fêmea)” (OR=1,83), “idade (> 1 ano)” (OR=2,6), “presença de aborto” (OR=1,47), “água proveniente de fontes superficiais” (OR=1,41) e “água fornecida em vasilhames fora das instalações” (OR=1,67), apresentaram associações significativas entre o resultado da sorologia para o T gondii, revelando-se como fatores de risco para ocorrência da toxoplasmose As variáveis “separa matrizes antes de parir” (OR=1,35), “animais que tem livre acesso às fontes de água” (OR=1,38), “água fornecida em vasilhames fora das instalações” (OR=2,8), “idade (> 1 ano)” (OR=1,8), “sexo (fêmea) (OR=2,63) e “cães que se alimentam de restos placentários de ovinos” (OR=1,7), apresentaram associação significativa à sorologia para N caninum, revelando-se como fatores de risco para a ocorrência da neosporose ovina O estudo do rebanho caprino revelou associação significativa entre o resultado da sorologia para T gondii e as variáveis “presença de gatos” (OR=2,26), “presença de felídeos selvagens” (OR=1,97), “local de abate para animais na propriedade” (OR=2,35), “gatos se alimentam de restos placentários” (OR=2,53), “idade (> 8 meses) (OR=2,53), “fornece ração concentrada aos animais” (OR=1,84), “água fornecida em vasilhames fora das instalações” (OR=3,16), “animais bebem água direto da fonte” (OR=2,91), “água proveniente de fonte profunda” (OR=3,61); quanto ao N caninum, ocorreu associação entre as variáveis “fornece ração concentrada aos animais” (OR=4,77) e “morte até o desmame” (OR=9,65), apresentando-se como fatores de risco para a ocorrência da toxoplasmose e neosporose, respectivamente No rebanho ovino do Rio Grande do Sul as variáveis “tamanho da propriedade (<5ha)” (OR=1,94), “tamanho do rebanho (<1 animais)” (OR=1,44), “sistema de criação (semi-intensivo/intensivo) (OR=1,71), “monta natural sem controle” (OR=1,97) e “pastoreio dos ovinos em outras propriedades” (OR=1,87) apresentaram-se como fator de risco para ocorrência do T gondii e as variáveis “tamanho da propriedade (<5ha)” (OR=1,86), “tamanho do rebanho (<1 animais)” (OR=1,42), “sistema de criação (semi-intensivo/intensivo) (OR=1,46) e “monta natural sem controle” (OR=2,81) apresentaram-se como fatores de risco para ocorrência do N caninum As taxas denotam importantes prevalências dos agentes distribuídas nos dois estados, o estudo das variáveis associadas a essas parasitoses, permitiu caracterizar deficiências de manejo ambiental e saneamento, manejo nutricional, presença de hospedeiros e tipo de exploração; que irá subsidiar programas sanitários e políticas públicas relacionadas à prevenção de T gondii e de N caninum em rebanhos de pequenos ruminantes no Sul do BrasilItem Análise quantitativa de senecavirus A em fragmentos de 2 tecidos de leitões recém-nascidos naturalmente infectadosDall Agnol, Alais Maria; Alfieri, Alice Fernandes [Orientador]; Silva, Caio Abércio da; Araújo Junior, João Pessoa; Heinemann, Marcos Bryan; Headley, Selwyn ArlingtonResumo: Senecavirus A (SVA) é a única espécie do gênero Senecavirus, família Picornaviridae SVA é um vírus RNA fita simples, de polaridade positiva, não envelopado e genoma com aproximadamente 7,2 kb Desde 27, SVA tem sido associado à doença vesicular em suínos nos Estados Unidos da América, Brasil, Colômbia, China e Tailândia A partir de 215, uma nova síndrome multissistêmica associada à infecção por SVA tem sido relatada em leitões recém-nascidos nesses países SVA foi identificado por técnicas moleculares (RT-PCR, qRT-PCR e nested-RT-PCR), imuno-histoquímica e/ou hibridização in situ em diferentes órgãos de leitões recém-nascidos Embora a RT-PCR quantitativa (qRT-PCR) tenha sido utilizada para detectar RNA de SVA a partir de amostras biológicas de suínos, não há relatos da determinação da carga viral nos diferentes tecidos de leitões recém-nascidos com sinais clínicos consistentes com a infecção pelo vírus O objetivo deste estudo foi avaliar a distribuição tecidual e a carga viral de SVA em diferentes amostras biológicas de leitões sintomáticos, naturalmente infectados, provenientes de rebanhos suínos com histórico de doença vesicular No primeiro estudo foi validado um teste de qRT-PCR utilizando TaqMan como ferramenta para a detecção e quantificação de RNA de SVA em amostras biológicas de suínos Um conjunto de primers e probe específicos para amplificar um produto de 118 pb da região VP1 do genoma do vírus foi desenhado para ser utilizado na técnica de qRT-PCR A avaliação da eficiência da qRT-PCR TaqMan foi realizada em 45 amostras de tecidos de 15 leitões sintomáticos (n = 38) e quatro (n = 7) assintomáticos previamente caracterizados como positivos ou negativos para SVA por RT-PCR convencional Entre amostras biológicas provenientes de leitões sintomáticos, 18 (47,4%) e 3 (78,9%) foram positivas por RT-PCR convencional e qRT-PCR, respectivamente Todas as amostras obtidas de leitões assintomáticos foram negativas para o vírus em ambas as técnicas utilizado Os resultados demonstram que a técnica de qRT-PCR utilizando TaqMan padronizada neste estudo é rápida e apresenta alta sensibilidade, especificidade e repetibilidade, sendo capaz de gerar resultados confiáveis na detecção e quantificação de RNA de SVA em amostras biológicas de suínos O segundo estudo avaliou a distribuição e a carga viral de SVA em diferentes amostras de órgãos/tecidos provenientes de leitões recém-nascidos sintomáticos Por meio da técnica qRT-PCR previamente padronizada no primeiro estudo, foram analisados fragmentos de tronco encefálico, cerebelo, cérebro, coração, rim, fígado, pulmões, intestino delgado, baço, bexiga e tonsila provenientes de sete leitões recém-nascidos O RNA de SVA foi detectado em 81,4% (57/7) das amostras avaliadas A carga viral variou de 4,7 a 1,38 log1 cópias genômicas/g de tecido Os resultados demonstram que o SVA tem tropismo por diferentes órgãos em leitões recém-nascidos naturalmente infectados, principalmente tonsilas, baço, pulmão e fígado Órgãos linfoides apresentam altas cargas virais e podem ser importantes sítios de replicação de SVA A ampla distribuição de RNA de SVA em órgãos/tecidos dos sistemas cardiovascular, respiratório, digestório, urinário, neurológico e linfático demonstra a capacidade do vírus em causar infecção multissistêmica em leitões recém-nascidos e a sua participação nas manifestações clínicas observadasItem Uso de 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo no desempenho reprodutivo de fêmeas suínas e sua progênieGavioli, David Fernandes; Silva, Caio Abércio da [Orientador]; Bridi, Ana Maria; Garbossa, Cesar Augusto Pospissil; Santos, José Maurício Gonçalves dos; Martins, Maria Isabel MelloResumo: A seleção genética tem desenvolvido fêmeas suínas mais produtivas, sendo assim, se torna imprescindível que a nutrição venha dar suporte às condições necessárias para que esses animais expressem seu potencial genético Alguns nutrientes, como vitaminas e minerais, contribuem para aprimorar essa relação genética e nutrição Assim, objetivou-se com este trabalho avaliar o desempenho reprodutivo de fêmeas suínas suplementadas com a forma natural da vitamina D, a 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo, que está relacionada principalmente com a melhoria na absorção e metabolismo de cálcio e fósforo, além de atuar em receptores de regulação hormonal As avaliações de desempenho reprodutivo ocorreram em dois ciclos reprodutivos subsequentes, sendo que, no primeiro ciclo as fêmeas permaneceram em salas de maternidade com ambiência climatizada e não climatizada e já no segundo ciclo as mesmas fêmeas foram avaliadas sob um mesmo ambiente não climatizado, em ambos os ciclos, as fêmeas foram acompanhadas a partir do terço final de gestação até o fim da lactação Foram selecionadas 14 fêmeas (1° a 7° partos-Genética Danbred), divididas em dois tratamentos inteiramente casualizados, Teste e Controle No terço final de gestação e durante toda a fase de lactação, o grupo teste (n = 52) recebeu 7 µg / porca / dia de 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo adicionados on top sobre a ração e as outras 52 fêmeas foram utilizadas como grupo controle Um subgrupo composto de 12 animais de cada tratamento também foi avaliado, através da coleta de sangue, quanto a dosagem de cálcio, fósforo, ferro, fosfatase alcalina total e magnésio no momento do pré e pós-parto (em ambos os ciclos) sob efeito da vitamina e ao respectivo desmame aos 21 dias de idade Não houve efeito entre o uso de 1,25-dihidroxivitamina D3 glicosídeo e a condição de climatização das salas de maternidade No entanto, entre os tratamentos foi observado que a duração de parto do grupo teste foi inferior em 9 minutos em comparação ao controle, assim como também a produção de colostro das fêmeas e a consequente ingestão pelos leitões (4,54 kg e 336 g respectivamente) foram melhores nas fêmeas que ingeriram a vitamina D3 em sua forma natural e ativa e da mesma forma o GPD dos leitões (124 g) nas 24 hs pós o parto As matrizes que receberam a vitamina D3 glicosídeo durante dois partos consecutivos apresentaram no parto subsequente uma redução de 2 % no número de natimortos e um leitão vivo a mais quando comparadas com o grupo controle Frente aos resultados observados, a Vitamina D3 glicosídeo, foi eficiente no aumento do número de leitões nascidos vivos e reduziu a natimortalidade em fêmeas suínas que receberam essa vitamina durante dois partos consecutivos De maneira geral, o uso da vitamina 1,25-dihidroxivitamina D3 melhorou a dinâmica de partos e a performance reprodutiva de fêmeas suínas e o desempenho da progênieItem Efeito do ganho compensatório e do uso de ractopamina para suínos em terminaçãoBarbosa, Esperança Maria de Jesus; Silva, Caio Abércio da [Orientador]; Pacheco, Graziela Drociunas; Silva, Marcos Augusto Alves da; Oba, Alexandre; Ida, Elza IoukoResumo: Objetivou-se avaliar os efeitos do ganho compensatório associado ao uso de 1ppm de ractopamina após um período de restrição alimentar, em suínos em terminação, sobre características de desempenho, carcaça e qualidade de carne, viabilidade econômica do manejo empregado Foram utilizados 4 suínos da linhagem comercial Agroceres PIC (2 machos castrados e 2 fêmeas), com 11 dias de idade e 66,137±6,13kg de peso vivo Os animais foram distribuídos em delineamento de blocos ao acaso em esquema fatorial 2 x 2 (alimentação à vontade ou com 2% de restrição entre zero e 21 dias de experimentação; e alimentação à vontade, sem ou com 1ppm de ractopamina, durante 22 a 42 dias de experimentação), com 1 repetições, sendo o animal a repetição Foram definidos os tratamentos T1, T2, T3 e T4 T1- Sem restrição alimentar e sem inclusão de ractopamina, T2- Sem restrição alimentar com a inclusão de 1 pp de ractopamina, T3- Restrição alimentar de 2% em relação à dieta controle sem a inclusão de ractopamin T4- Restrição alimentar de 2% em relação à dieta controle com a inclusão de 1pp ractopamina O experimento foi conduzido no Setor de Suinocultura da Fazenda Escola da Universidade Estadual de Londrina (UEL) Os suínos foram alojados em baias de alvenaria com piso compacto, com 3m² de área, equipadas com um comedouro semi-automático e um bebedouro tipo nipple, permitindo livre acesso à água durante todo o período de experimentação Para a avaliação das características de desempenho zootécnico, os animais foram submetidos a três pesagens durante o período total de experimentação, sendo uma pesagem no período inicial (zero dia), aos 21 dias, e ao final do período (42 dias), para avaliar o consumo diário de ração, o ganho diário de peso e a conversão alimentar Para a avaliação das características de carcaça foram avaliadas a espessura de toucinho, profundidade do músculo Longíssimus thoracis, área de olho de lombo, peso da carcaça quente, peso da carcaça fria e rendimento de carcaça Para a avaliação das características da carne, foram analisados o pH inicial e final, a cor, marmoreio, perda de água por gotejamento, perda de água no descongelamento, cocção, maciez, composição bromatológica, diâmetros de fibras, e o índice de fragmentação miofibrilar foram realizadas no músculo Longissimus thoracis Não houve efeito de interação entre os fatores para nenhum dos parâmetros avaliados Animais tratados com ractopamina apresentaram melhor ganho de peso (1,83 versus 1,259kg), conversão alimentar (2,91 versus 2,577), peso da carcaça quente e fria (86,8 versus 89, e 83,46 versus 87,2kg, respectivamente), profundidade do lombo (63,2 versus 68,4mm), área de olho de lombo (41,43 versus 46,59mm2) e diâmetro de fibras musculares (27,48 versus 35,85µm) Animais submetidos ao manejo alimentar de restrição seguida de arraçoamento ad libitum apresentaram ganho compensatório sem prejuízos às características de carcaça e à carne, mas com redução do extrato etéreo (2,19 versus 1,64%) e menor perda de água por descongelamento na carne (11,35 versus 9,42%) Os efeitos do ganho compensatório após a restrição alimentar e da ractopamina mostram-se independentes sobre os parâmetros avaliadosItem Estudo dos fatores de produção que afetam o desempenho e o ritmo reprodutivo de matrizes suínasPierozan, Carlos Rodolfo; Silva, Caio Abércio da [Orientador]; Ost, Paulo Roberto; Pena, Sérgio de Miranda; Garbossa, Cesar Augusto Pospissil; Gasó, Josep GasaResumo: A suinocultura industrial contemporânea, embora esteja em constante evolução, ainda é bastante heterogênea Há ainda ampla variabilidade entre as unidades de produção no que diz respeito à genética dos reprodutores, sobretudo das matrizes, aos cuidados com os leitões recém-nascidos, às instalações que favorecem o conforto térmico, à composição das dietas e às ações relacionadas à desinfecção do ambiente Estas e outras variáveis podem melhorar ou piorar, de forma direta ou indireta, um ou mais índices de desempenho As avalições que tratam da questão sob uma visão holística, ou seja, com a participação simultânea de fatores de várias classes (ie instalações, manejo, alimentação, etc) sobre os índices reprodutivos são raras Perante as hipóteses de que existem muitos fatores que podem afetar a produtividade de matrizes suínas, e de que o efeito desses fatores pode variar em virtude do índice zootécnico estudado, buscamos com a presente proposta identificar e quantificar a importância dos vários fatores de produção inerentes a diferentes fases reprodutivas (reposição, pré-gestação, gestação e lactação) sobre alguns dos principais índices relacionados à prolificidade e ao ritmo reprodutivo de matrizes suínas Essa proposta gerou dois estudos concebidos com metodologia similar Para ambos, dados de 15 granjas foram coletados, totalizando uma população de 135168 matrizes Um questionário (disponibilizado no Apêndice A) foi aplicado, com foco no desempenho reprodutivo, manejo, instalações, alimentação, saúde e biosseguridade Modelos de regressão linear múltipla foram utilizados para avaliar associações entre os fatores com cada uma das variáveis de interesse No primeiro trabalho focamos em variáveis inerentes à prolificidade das matrizes no ano 215: peso do leitão ao desmame (PLD), quilogramas de leitões desmamados por matriz por ano (kgLDMA), e conversão alimentar da matriz (CAM) Fatores de todas as classes foram associados a alguma das variáveis de interesse Dentre os resultados, não castrar cirurgicamente leitões machos e utilizar desinfetantes a base de amônia quaternária na maternidade foram fatores associados a maior PLD; a presença de forro nas instalações de maternidade e porcentagens mais altas de proteína bruta na dieta de matrizes gestantes foram associados a mais kgLDMA; e o aumento da duração da lactação e mais leitões nascidos vivos por parto foram associados a melhor CAM No segundo trabalho focamos em variáveis inerentes ao ritmo reprodutivo das matrizes nos anos 214 e 215: dias não produtivos (DNP) e taxa de parição (TP) Similarmente ao primeiro trabalho, fatores de diversas classes foram associados a alguma das variáveis de interesse Dentre os resultados, menos leitões natimortos e abortos, e redução da idade ao primeiro parto, foram fatores associados a menos DNP; e dietas líquidas/sopa para matrizes gestantes, comedouros modelo wet-dry para matrizes lactantes, e a pratica de manejo all-in all-out nas salas de maternidade foram associados à melhora da TP Este conjunto de resultados indica que as granjas podem aumentar PLD, kgLDMA e TP, reduzir DNP, e melhorar CAM, alterando uma ou mais práticas de manejo, biosseguridade, instalações e alimentação, bem como concentrando-se em melhorar alguns parâmetros de desempenhoItem Extrato de própolis no desempenho, expressão gênica, histologia muscular e carga parasitária de Tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) cultivadas em tanques-redeBuck, Elder Luis; Mizubuti, Ivone Yurika [Orientador]; Muniz, Elaine Barbosa; Prado-Calixto, Odimari Pricila; Silva, Leandro das Dores Ferreira da; Simonelli, Sandra Maria; Barrero, Nelson Mauricio Lopera [Coorientador]Resumo: O cultivo de peixes em tanque-rede pode induzir ao estresse fisiológico, impedindo o bom desempenho do animal A própolis pode ser utilizada como promotor de crescimento devido as suas propriedades antimicrobianas, antiparasitárias e imunoestimulante Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do extrato de própolis no desempenho produtivo, a expressão gênica (gene da miostatina), histologia muscular e carga parasitária de Tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) cultivadas em tanques-rede Foram utilizados 3 peixes machos revertidos da espécie tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) variedade GIFT, com peso inicial de 17 g ± 25 g, distribuídos em delineamento fatorial (2 x 4), sendo duas dietas (DPRO-ração comercial contendo extrato etanólico de própolis a 4% e DCON- ração comercial controle sem própolis), e quatro tempos de avaliação (, 35, 7 e 15 dias de experimento) Não houve efeito significativo de dietas sobre as variáveis estudadas (P>,5), contudo observou-se efeito significativo de tempo de avaliação sobre as variáveis peso (PC), comprimento total (CTo), altura corporal (ACo), largura corporal (Lco) e peso do filé (Pfi) Os animais que receberam DCON e DPRO apresentaram efeito linear em relação ao tempo de avaliação para as características PC, CTo e PFi, enquanto que só os alimentados com DCON tiveram comportamento de ACo foi linear Não houve interação entre dietas e tempos de avaliação sobre a característica (Lco), porém houve efeito quadrático de tempo sobre esta característica Não houve diferença estatística entre DPRO e DCON, quanto ao crescimento muscular No entanto, foi observado que o número de fibras com diâmetro menor que 2µm foi maior nos animais tratados com extrato de própolis em comparação com os do grupo controle em todos os tempos avaliados Observou-se também, que a quantidade desse tipo de fibra aumentou aos 35 e 7 dias e foi menor aos 15 dias Aos 35 e 7 dias observaram-se mais fibras de diâmetros menores que 2µm em DPRO, contudo, aos 15 dias essa diferença foi reduzida em relação a DCON Nesse período é observado maior número de fibras com diâmetro superior a 5µm, o que caracteriza o crescimento hipertrófico A expressão da miostatina não apresentou diferença estatística entre DPRO e DCON Foi constatada maior expressão do gene aos 15 dias, com médias de 1,93 (DCON) e 1,89 (DPRO) Observaram-se valores crescentes de expressão gênica em DPRO e diminuição e aumento da expressão aos 35 e 15 dias em DCON O DPRO não influenciou a prevalência, intensidade, abundância média parasitária, peso do filé e comprimento padrão Foi observada uma melhor eficiência na carga parasitária aos 7 dias de utilização Um provável efeito de assimilação metabólica da própolis pode ter acontecido após os 7 dias de criação Conclui-se que o extrato etanólico de própolis a 4% na dieta de tilápias do Nilo criadas em condições de cultivo em tanques-rede não influenciou o desempenho produtivo, a expressão gênica da miostatina, o diâmetro de fibras musculares e a carga parasitária Mais estudos deverão ser realizados para elucidar outros efeitos do produto na criação de tilápias em tanques-redeItem Pesquisa de patógenos em água, solo e hortaliças cruasFerreira, Fernanda Pinto; Navarro, Italmar Teodorico [Orientador]; Garcia, João Luis; Barros, Luiz Daniel de; Mori, Fabiana Maria Ruiz Lopes; Fertonani, Luciane Holsback Silveira; Freire, Roberta Lemos [Coorientadora]Resumo: Doenças relacionadas à ingestão de alimentos contaminados afetam um terço da população mundial, sejam de origem viral, bacteriana, fúngica ou parasitária Além de grande importância na saúde pública têm importância econômica devido aos gastos com tratamento A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii, que assim como a giardíase (Giardia intestinalis) e criptosporidiose (Cryptosporidium spp) estão associados à surtos de origem hídrica e alimentar No que diz respeito à toxoplasmose, analisando seu histórico por meio da revisão sistemática, foi a causa de 35 surtos mundialmente publicados nos últimos 5 anos e as principais vias de transmissão foram: água, frutas, verduras, carne crua ou pouco cozida e leite de cabra A ocorrência de surtos conforme a forma biológica do parasita foi: esporozoíto (oocisto) e bradizoítos (cisto) 45,7% (16/35) cada; enquanto para os taquizoítos 8,6% (3/35) Nas décadas de 197 e 199, os surtos ocorreram principalmente por meio da ingestão de cistos na carne e seus derivados; nos anos 8, leite contaminado com taquizoítos; em 2, oocistos na água; a partir de 21, houve um aumento na ocorrência de surtos devido a oocistos em vegetais crus Observou-se uma mudança na epidemiologia dos surtos nos últimos 2 anos Os vegetais tiveram seu consumo aumentado, esses alimentos quando não higienizados de forma adequada podem conter estruturas parasitárias, para detecção de parasitas, utilizou-se Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), Hoffman, Willis and Faust e foi observado contaminação por T gondii em 12,9% (8/62), G intestinalis em 25,8% (16/62), Cryptosporidium spp em 11,3% (7/62), e outros parasitas em 45,23% (19/42) dos vegetais analisados Além disso, por meio do Kit Comercial Colilert de análise de contaminação de água, observou-se que 81,% (19/21) amostras de água de irrigação apresentavam Escherichia coli O uso de água de rio na irrigação demonstrou um papel importante na contaminação dos vegetais, em contrapartida a suplementação do solo com calcário contribuiu positivamente para a manutenção de hortaliças mais seguras Em 215, houve um surto de toxoplasmose em uma instituição de pesquisa em Londrina, Paraná Um total de 2 indivíduos apresentaram sintomas e sorologia compatíveis com a infecção aguda Para análise de fatores de risco foi estruturado um estudo de caso e controle na razão 1:2,25 Todos os participantes da investigação responderam a um questionário epidemiológico Foram coletadas um total de 29 amostras ambientais, todas negativas à reação em cadeia da polimerase Após a análise dos dados epidemiológicos, o consumo de vegetais foi a única variável associada à ocorrência da doença A partir dos resultados demonstrou-se a importância dos vegetais como via de transmissão de T gondii e de outros patógenos, além disso, expõem alguns pontos críticos de contaminação, fornecendo suporte para capacitar os agricultores em boas práticas de gestão durante o processo de produção e ainda, oferecem as principais características epidemiológicas para o rápido reconhecimento de surto, notificação e investigação para que desta forma seja interrompida a cadeia de transmissão, impedindo a ocorrência de surtosItem Transferibilidade de primers heterólogos para Brycon falcatus e análise citogenética em Oreochromis niloticusPenha, Diego dos Santos; Lopera Barrero, Nelson Mauricio [Orientador]; Poveda-Parra, Ângela Rócio; Mizubuti, Ivone Yurika; Baldissera, Joana Neres da Cruz; Ruas, Eduardo Augusto; Dias, Ana Lúcia [Coorientadora]Resumo: O aumento da população humana mundial reflete diretamente na demanda por alimentos, com destaque a produção e o consumo de peixe, importante fonte de proteína de alto valor nutricional e excelente quantidade e qualidade de vitaminas e minerais O Brasil é o maior mercado da América Latina com grande e importante potencial de exploração econômica devido a grande variedade de peixes nativos e não nativos Por isso, potencializar a produção de peixes através de ferramentas que gerem informações relevantes deve ser buscado Marcadores moleculares microssatélites são importantes ferramentas para a obtenção de informações genéticas, que visam analisar a variabilidade genética de populações e estoques de peixes Marcadores citogenéticos auxiliam na identificação de espécies e melhor conhecimento cariotípico, facilitando o aprimoramento de cultivo de espécies Brycon falcatus tem grande importância socioeconômica e biológica no Brasil, porém, o conhecimento genético da espécie ainda é escasso Oreochromis niloticus é destaque na produção aquícola mundial e brasileira, principalmente devido ao emprego e desenvolvimento de programas de melhoramento genético O presente trabalho teve como objetivo avaliar a transferibilidade de primers heterólogos para Brycon falcatus, e analisar citogeneticamente Oreochromis niloticus variedade Tilamax Foram avaliados 28 primers heterólogos aplicados em 22 indivíduos de Brycon falcatus amostrados ao longo do Rio Araguaia no Estado do Mato Grosso, a partir de fragmentos de nadadeira caudal (,5 cm2 aproximadamente) Análise de amostras de sangue de 4 indivíduos de Oreochromis niloticus (16 indivíduos da geração de reprodutores (G7), 1 indivíduos da geração subsequente (G8) e 14 indivíduos comerciais (plantel comercial – PC)), provenientes da Estação de Piscicultura Codapar/UEM, no estado do Paraná, também foram analisadas Primers heterólogos de sete espécies diferentes apresentaram resultados satisfatórios de amplificação cruzada com B falcatus BoM5 (B opalinus); Bh8, Bh13 e Bh16 (B hilarii); Borg59 (Brycon orbignyanus); Par8 (Prochilodus argenteus) e Cm1A8 (Colossoma macropomum) Primers com ausência de amplificação, inespecificidade ou monomorfismo, foram excluídos das análises Os parâmetros genéticos e o PIC (Conteúdo de informação polimórfica) demonstraram a viabilidade na utilização dos primers para análises genéticas populacionais Os resultados validaram a utilização de primers de diferentes espécies e gêneros em B falcatus, o que viabilizará a realização de futuros estudos genéticos nessa espécie, colaborando para melhor entendimento de amplificação cruzada ou até o desenvolvimento de futura amplificação específica Em Oreochromis niloticus os resultados revelaram que as gerações (G7 e G8) e o plantel comercial (PC) apresentaram número diplóide (2n) igual 44, as regiões organizadoras de nucléolos pela impregnação de nitrato de prata (AgRONs) foram evidenciadas em até quatro cromossomos e a hibridização fluorescente in situ, com sonda de DNAr 18S, detectou sinais em 5 cromossomos, localizados em posição terminal do braço curto A heterocromatina, pela técnica de banda C, teve ampla distribuição em regiões centroméricas, ricas em pares de base CG (citosina e guanina) Os resultados do presente estudo coincidem com os dados disponíveis na literatura e não apresentaram diferenças quanto às avaliações citogenéticas Não foram observadas alterações nas características cromossômicas das gerações e o plantel comercial analisados de Oreochromis niloticus (variedade Tilamax)Item Modelos preditivos para as características da carcaça e da carne de cordeiros comerciais e pantaneirosAlves, Luis Gustavo Castro; Ribeiro, Edson Luis de Azambuja [Orientador]; Soares-Russo, Adriana Lourenço; Osório, José Carlos da Silveira; Barrado, Ana Guerrero; Constantino, Camila; Fernandes, Alexandre Rodrigo Mendes [Coorientador]Resumo: Objetivou-se a identificar características de maior importância para predizer as características da carcaça e da carne de cordeiros Comerciais e Pantaneiros por meio de ferramentas estatísticas No capítulo II, predizer as características na carcaça a partir das características in vivo No capítulo III, predizer a composição regional e tecidual da carcaça a partir das características da carcaça No capítulo IV, predizer as características dos músculos Trícpes brachii, Bíceps femoris, Semimembranosus e Longissimus dorsi a partir das características in vivo e da carcaça Foram utilizados 8 cordeiros machos, não castrados, sendo 4 cordeiros Comerciais e 4 cordeiros Pantaneiros O critério de abate foi o peso corporal de 35 kg No capítulo II, o peso corporal de abate correlacionou com o peso de carcaça quente (r = ,82 e ,89), peso de carcaça fria (r = ,82 e ,89) e índice de compacidade da carcaça (r = ,62 e ,74) nos Comerciais e Pantaneiros, respectivamente Nas equações de regressão, nas características in vivo dos Comerciais, o peso corporal de abate, condição corporal e largura de garupa apresentaram associação com o peso de carcaça fria (R2 = ,74) e com o índice de compacidade da carcaça (R2 = ,52) e estas características juntamente com outras medidas corporais com o peso de carcaça quente (R2 = ,74) Nos cordeiros Pantaneiros o peso corporal de abate, condição corporal e todas as medidas corporais apresentaram associação com peso de carcaça quente (R2 = ,82), peso de carcaça fria (R2 = ,82), estado de engorduramento (R2 = ,63), espessura de gordura subcutânea (R2 = ,64) e com índice de compacidade da carcaça (R2 = ,55) As características de ambos os grupos avaliados foram capazes de predizer as características quantitativas e qualitativas da carcaça de cordeiros Comerciais e Pantaneiros No capítulo III, nas características na carcaça dos Comerciais, o peso de carcaça quente correlacionou com a meia carcaça (r = ,94), pernil (r = ,88), costilhar (r = ,87), lombo (r = ,78) e a paleta (r = ,74) A gordura interna correlacionou com costilhar (r = ,67), gordura total (r = ,66), costelas flutuantes (r = ,63), meia carcaça (r = ,61), lombo (r = ,6) Nos cordeiros Pantaneiros, o peso de carcaça quente correlacionou com a meia carcaça (r = ,89), pernil (r = ,84), paleta (r = ,83), costilhar (r = ,74) e lombo (r = ,6) A área de olho de lombo correlacionou com a porção comestível (,66) Nas equações de regressão as características na carcaça apresentaram alto coeficiente de determinação (R2 = ,89; ,81; ,77; ,69; ,68; ,68) e foram eficientes para predizer a meia carcaça, pernil, costilhar, paleta, baixo e lombo nos cordeiros Comerciais Nos cordeiros Pantaneiros as características na carcaça que apresentaram alto coeficiente de determinação (R2 = ,87; ,8; ,73; ,78; ,73) e foram eficientes para predizer a meia carcaça, pernil, paleta, porção comestível e o músculo total Estas características de ambos os grupos avaliados foram capazes de predizer a composição regional e tecidual da carcaça No capítulo IV, nos cordeiros Pantaneiros, área de olho de lombo correlacionou com a umidade no Tríceps brachii (r = -,62) Nas equações de regressão, as características in vivo e na carcaça apresentaram baixo coeficiente de determinação com todas as análises avaliadas nos cordeiros Comerciais Nos cordeiros Pantaneiros as características in vivo e na carcaça apresentaram com a cor b* no Longissimus dorsi (R2 = ,57), perda de peso ao cozimento no Semimembranosus (R2 = ,63) e com a umidade no Tríceps brachii (R2 = ,7) As características in vivo e na carcaça não foram eficientes para predizer as características qualitativas e nutricionais dos músculos dos cordeiros comerciais e pantaneiros De maneira geral, a junção das medidas in vivo e/ou na carcaça permitiu predizer características importantes que interferem diretamente na qualidade do produto final entregue ao consumidorItem Avaliação clínica e laboratorial como preditores do estado nutricional e prognóstico em cães hospitalizadosFabretti, Andrei Kelliton; Pereira, Patrícia Mendes [Orientador]; Venturini, Danielle; Gomes, Lucas Alécio; Balarin, Mara Regina Stipp; Takemura, Luciana SayuriResumo: A desnutrição é subdiagnosticada em medicina veterinária Reconhecer precocemente o animal desnutrido permite uma assistência nutricional rápida e acelera a recuperação Adicionalmente, a determinação do prognóstico embasa as decisões de conduta, por permitir prever a gravidade de doença, tempo de internamento (TI) e mortalidade Este trabalho objetivou, utilizando cães de uma população hospitalar, descobrir e estudar a eficiência de marcadores do estado nutricional (EN) e prognóstico, de fácil acesso e baixo custo, práticos para uso na rotina profissional Além disso, estabelece um intervalo de referência para a relação proteica C reativa (PCR)/albumina (R:PCR/ALB) nessa espécie De conhecimento dos autores, este é o primeiro estudo desta relação em cães Para cumprir os objetivos, foram avaliados 246 cães da rotina do Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina, por exame clínico, avaliação hematológica e mensuração de diversos parâmetros bioquímicos Foram calculadas as frequências, médias e desvios-padrões das variáveis, análises de correlação e análises comparativas (Kruskal-Wallis em a = 5%) Os indicativos de desnutrição foram: baixos valores de transferrina (TF), capacidade total de ligação com ferro (CTLF), proteína total (PT) e ureia, anemia e elevações do índice de saturação da transferrina (IST) Em relação ao prognóstico, foram realizadas análises de correlação com as variáveis: gravidade de doença, TI e mortalidade Os marcadores relevantes de gravidade de doença em cães foram: presença de desnutrição, incluindo histórico de hiporexia, anorexia, escore de condição corporal (ECC) =3 e escore de massa muscular (EMM) =2; baixos valores de transferrina (TF) e da capacidade total de ligação ao ferro (CTLF) e anemia; além de valores elevados de índice de saturação da transferrina (IST), lactato e da R:PCR/ALB Nos animais sem doenças sistêmicas ou com doenças discretas a moderadas, os indicadores de elevado TI foram: baixos valores de TF, CTLF, albumina, PT, elevada R:PCR/ALB e hiporexia Nos animais com doenças sistêmicas críticas, os indicadores de baixo TI foram: ocorrência de anorexia, índice de massa corporal (IMC) abaixo da média, baixos valores de TF, CTLF, anemia e baixa contagem de linfócitos Os indicadores de mortalidade em cães doentes foram: alta gravidade de doença, hipoalbuminemia e elevada concentração de ureia O intervalo de referência estipulado para a R:PCR/ALB em cães foi de ,36-,6, determinado pelo intervalo de confiança da média das reamostragens Esta relação é melhor marcadora de gravidade de doença e TI em cães do que a PCR e albumina analisadas separadamente Conclui-se que a constatação das alterações supracitadas, especialmente quando ocorrem simultaneamente, embasa a determinação do EN e prognóstico em cães de uma população hospitalar, de maneira objetiva, prática e acessívelItem Emergência da leishmaniose visceral canina no estado do Paraná, BrasilDias, Renata Cristina Ferreira; Navarro, Italmar Teodorico [Orientador]; Freire, Roberta Lemos; Mori, Fabiana Maria Ruiz Lopes; Marquez, Ellen de Souza; Silveira, Thaís Gomes VerzignassiResumo: O objetivo deste trabalho foi investigar a emergência da leishmaniose visceral canina no estado do Paraná, Brasil Foi realizada a pesquisa de anticorpos anti-Leishmania infantum em cães de localidades do município de Foz do Iguaçú, Paraná, Brasil, que fazem fronteira com Argentina e Paraguai Foram coletadas amostras de sangue de cães para realização de testes sorológicos: teste rápido imunocromatográfico DPP® (DPP®), teste imunoenzimático indireto (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI) No ano de 212, foram analisados 285 cães na fronteira com a Argentina e, em 213 foram coletadas amostras de soro de 396 cães na fronteira com o Paraguai Utilizando o método de ensaio imunoenzimático (ELISA) como triagem e Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) como confirmatório a prevalência foi de 1,8% (5/285) na fronteira com a Argentina e de 3, (12/396) na fronteira com o Paraguai Com o teste imunocromatográfico (DPP®) como triagem e ELISA como confirmatório observou-se uma prevalência de 2,5% (7/285) na fronteira com Argentina e 5,1% (2/396) na fronteira com Paraguai, de animais sororreagentes Uma diferença estatisticamente significativa foi observada, em que a não coleta pública do lixo residencial pelo sistema público apresentou-se como uma variável de risco à leishmaniose visceral canina Com o objetivo de confirmar a espécie circulante da leishmaniose visceral canina em Foz do Iguaçu foi realizada a técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) em amostras de sangue e de aspirado de linfonodo de cães domiciliados no município Foram utilizados os iniciadores específicos para Leishmania infantum, RV1/RV2 e K26F/R, sendo o último utilizado para o sequenciamento e confirmação da espécie dos isolados Em uma primeira etapa, foram coletadas três amostras de aspirado de linfonodo e, 46 amostras de camada leucocitária Foram amplificados para os iniciadores RV1/RV2 e K26F/R, 1% (3/3) dos isolados das amostras de aspirado de linfonodo e ,6% (1/15) de camada leucocitária Das amostras de camada leucocitária, foram amplificados 66,7% (1/15), para RV1/RV2 Na segunda etapa, foram coletadas amostras de camada leucocitária de 376 cães de 2 localidades, próximas ao Paraguai, rio Paraná, centro e periferia da cidade Dois isolados (2/376) foram obtidos e amplificados para o iniciador RV1/RV2 e K26F/R As amostras de camada leucocitária foram amplificadas com RV1/RV2 e, 2,5% (77/376) foram positivas As análises da sequências de 6 isolados comprovou a espécie como L infantum A autoctonia dos isolados foi confirmada em inquérito epidemiológico realizada em pesquisa prévia, em que 1% dos cães nunca haviam saído do município O estudo confirma a emergência da leishmaniose visceral canina no estado do Paraná ao verificar a ocorrência de cães soro reagentes para leishmaniose visceral na fronteira com a Argentina e Paraguai, em área com características ambientais e geográficas que favorecem a dispersão do parasito e, a identificação da L infantum em amostras de cães no município de Foz do Iguaçu Os dados da pesquisa fornecem subsídios para novas pesquisas com uma abordagem em Saúde Única e, medidas de controle devem ser delineadas e implementadas como o objetivo de controlar a dispersão da zoonose e casos humanos de leishmaniose visceralItem Micro-organismos deteriorantes do leite : atividade proteolítica e lipolítica de bactérias psicrotróficas e termodúricas mesófilasRibeiro Junior, José Carlos; Beloti, Vanerli [Orientador]; Lorenzetti, Elis; Telles, Evelise Oliveira; Bersot, Luciano dos Santos; Oliveira, Tereza Cristina Rocha Moreira deResumo: A presença de enzimas microbianas deteriorantes termoestáveis proteolíticas e lipolíticas pode comprometer a qualidade e vida útil do leite processado e derivados, mesmo que o leite cru apresente baixas contagens totais de micro-organismos Além disso, as formas microbianas vegetativas ou esporuladas podem resistir à pasteurização e também atuarem como deteriorantes do leite pasteurizado Como passo preliminar para redução dos micro-organismos deteriorantes no leite cru refrigerado, aumento da vida útil e do potencial tecnológico do leite pasteurizado, o presente trabalho teve como objetivo identificar a diversidade genética de micro-organismos psicrotróficos e termodúricos com potencial deteriorante proteolítico e/ou lipolítico no leite cru refrigerado de alta qualidade microbiológica Foram avaliadas 2 amostras de leite cru refrigerado produzido na bacia leiteira da região de Castro, Paraná, nas quais foram utilizados métodos oficiais para a contagem e isolamento de psicrotróficos e termodúricos e técnicas biomoleculares de agrupamento genético hierárquico (Restriction Fragment Length Polymorphism) e caracterização (sequenciamento parcial do gene 16S rRNA e análise filogenética) dos isolados As contagens médias de psicrotróficos e termodúricos foram 1,1 x 14 e 3,2 x 12 UFC/mL, respectivamente Entre os psicrotróficos, 47,8% do total de isolados (n = 295) apresentaram atividade deteriorante, dos quais 3,5% foram proteolíticos e lipolíticos simultaneamente, 31,9% exclusivamente proteolíticos e 37,6% lipolíticos Pelos dendrogramas foram determinados 36 clusters de psicrotróficos proteolíticos e 47 de lipolíticos com 7% de similaridade hierárquica, cuja identificação filogenética determinou o predomínio das espécies com os mesmos perfis polimórficos de Lactococcus lactis (24,5%), Enterobacter kobei (15,4%), Aerococcus urinaeequi (8,4%) e Acinetobacter lwoffii (6,3%) entre os psicrotróficos deteriorantes Serratia ureilytica, Enterobacter kobei, Pseudomonas spp e Yersinia enterocolitica foram os psicrotróficos identificados como potencialmente produtores de metaloprotease alcalina (aprX) Entre os termodúricos, 42,6% do total de isolados (n = 31) foram deteriorantes, dos quais 32,6% apresentaram atividade proteolítica e lipolítica simultaneamente, 31% exclusivamente proteolítica e 36,4% apenas lipolítica Esses isolados proteolíticos e lipolíticos foram agrupados em 41 e 38 clusters, respectivamente, considerando 5% de similaridade A análise filogenética das sequências parciais do gene 16S rRNA revelou que predominam entre os termodúricos deteriorantes as espécies Bacillus licheniformis (34,1%), Brachybacterium nesterenkovii (14,4%), Enterococcus faecalis (9,1%) e Streptococcus agalactiae (8,3%) Foi observado que 5% das cepas de termodúricos pertencem aos gêneros Bacillus e Paenibacillus, frequentemente descritos como esporulados que resistem a tratamentos térmicos mais intensos que a pasteurização e que comprometem a vida útil do leite pasteurizado dos Estados Unidos Os resultados do presente trabalho demonstram que a composição da microbiota é tão importante quanto a sua quantificação Apesar de baixas contagens, psicrotróficos e termodúricos podem comprometer a qualidade do leite e derivados pela sua atividade deteriorante, sendo um fator limitante na manutenção da qualidade do leite fluido e derivados Portanto, é necessário desenvolver ferramentas sensíveis e eficientes para monitorar e controlar a presença desses micro-organismos no leite cruItem Avaliação de proteínas urinárias na detecção precoce da lesão renal em cadelas com piometraSant'Anna, Marcos Cezar; Martins, Maria Isabel Mello [Orientador]; Souza, Fabiana Ferreira de; Pretto-Giordano, Lucienne Garcia; Pereira, Patrícia Mendes; Gomes, Lucas AlécioResumo: A piometra tem cárater multissistêmico e acomete cadelas adultas e idosas, geralmente durante o diestro A insuficiência renal, durante a piometra, é um dos fatores mais importantes do prognóstico dessa afecção e a avaliação da proteômica urinária permite identificar biomarcadores de lesão renal precoce Esse estudo objetivou avaliar o uso da relação proteína/creatinina urinária para a identificação de lesão renal antes do desenvolvimento da azotemia e identificar as proteínas urinárias presentes em cadelas com piometra com potencial para serem utilizadas como biomarcadores de lesão renal Foram incluídas na pesquisa 44 cadelas com piometra, azotêmicas e não azotêmicas, e 12 cadelas que não apresentavam alterações sistêmicas O primeiro artigo comparou cadelas com piometra e azotêmicas (A, n = 15, creatinina > 1,7), com não azotêmicas (NA, n = 29) e cadelas sem alterações sistêmicas que formaram o grupo controle (GC, n = 12) Todas as cadelas passaram por coleta de sangue e urina para hemograma completo, perfil bioquímico, urinálise e dosagem da proteína e creatinina urinária As cadelas que apresentaram sedimento urinário ativo, ou seja, mais que cinco leucócitos ou hemácias por campo não foram utilizadas para a avaliação da relação proteína/creatinina urinária (UPC) Os valores da UPC foram superiores nas cadelas dos grupos NA e A quando comparadas com o GC (p < ,5), o que mostra que a UPC pode detectar lesão renal em cadelas com piometra antes do desenvolvimento da azotemia A leucocitose foi mais evidente nas cadelas do grupo A do que nos demais grupos, o que evidencia que a resposta inflamatória pode estar relacionada ao agravamento da doença renal O segundo artigo estudou 32 cadelas com piometra e 12 cadelas sem alterações sistêmicas Foi realizada espectrometria de massas do pool das amostras de urina dos grupos, piometra por bactérias gram-negativas não azotêmica (GnegNA, n = 18), gram-negativas azotêmicas (GnegA, n = 6), gram-positivas não azotêmicas (GposNA, n = 4), gram-positivas azotêmicas (GposA, n = 4) e grupo controle (GC, n = 12) As principais proteínas identificadas nos grupos de cadelas com piometra e não identificadas no GC, portanto, com potencial para biomarcadores de lesão renal precoce foram a clusterina, hepcidina, Ig Kappa cadeia V, lisozima C, proteína ligadora de retinol (RBP), amiloide sérica A, proteína de domínio central de quatro disulfetos WAP e a uromodulina, sendo que, a maioria dessas proteínas possuem massa molecular menor que a albumina (69 kDa), o que sugere lesão no compartimento tubular renal Os resultados obtidos possibilitaram concluir que a UPC pode ser utilizada para detectar lesão renal em cadelas com piometra antes da azotemia e pode ser utilizada como exame controle durante o período pós operatório para detectar proteinúria persistente e permitir o tratamento precoce da insuficiência renal, contribuindo para qualidade de vida O estudo proteômico da urina permitiu a identificação de proteínas com potencial para serem utilizadas como biomarcadores de lesão renal precoce e definiu que a lesão renal em cadelas com piometra é principalmente tubular e não glomerular como consta na maioria da literatura vigenteItem Efeito da utilização de ácidos orgânicos sobre o desempenho, qualidade de carne e controle da infecção de Salmonella Enteritidis em frangos de corteAlmeida, Mauricio de; Oba, Alexandre [Orientador]; Baptista, Ana Angelita Sampaio; Silva, Caio Abércio da; Souza, Pedro Alves de; Simonelli, Sandra MariaResumo: Os ácidos orgânicos são apontados com alternativa ao uso dos antibióticos, além disso, são capazes de minimizar a infecção causada pela Salmonella spp Desta forma, foram realizados três experimentos com o objetivo de verificar o efeito da utilização de ácidos orgânicos sobre o desempenho, qualidade da carne e controle de Salmonella Enteritidis em frangos de corte No experimento de desempenho e no de digestibilidade os tratamentos utilizados foram: ração contendo 1 mg de avilamicina / kg de ração (controle positivo) e diferentes níveis de adição de ácidos orgânicos (, ,5, ,75 e 1,5 g/kg de ração) No experimento de desempenho e no de digestibilidade foram utilizados 14 e 24 frangos de corte, respectivamente O delineamento utilizado no experimento de desempenho foi em blocos casualizados, enquanto que no de digestibilidade foi inteiramente casualizado Os tratamentos utilizados no experimento com desafio com Salmonella Enteritidis foram: controle negativo (sem suplementação de ácidos orgânicos e sem inoculação de Salmonella Enteritidis), controle positivo (sem suplementação de ácidos orgânicos e com inoculação de Salmonella Enteritidis) e os demais tratamentos receberam diferentes níveis de adição de ácidos orgânicos (,5, ,75 e 1,5 g/kg de ração) e inoculado com Salmonella Enteritidis (1,2 x 15) Foram utilizados 9 reprodutores de frangos de corte distribuídos em delineamento inteiramente casualizado Os resultados mostraram que frangos de corte alimentados com e ,5 g/kg de ração da mistura de ácidos orgânicos apresentaram menor ganho de peso em relação ao controle positivo Contudo, frangos alimentados com ,75 g/kg de ração de ácidos orgânicos apresentaram menor altura de vilosidades do jejuno e os alimentados com ,5 g/kg de ração de ácidos orgânicos apresentaram menor profundidade de cripta em relação ao controle positivo Frangos alimentados com ,75 g/kg de ração de ácidos orgânicos apresentaram maior valor de L e perdas de água por cocção O coeficiente de digestibilidade da matéria mineral foi menor para o controle positivo em relação aos demais tratamentos Não foi observado efeito da utilização de ácidos orgânicos na contagem de Salmonella Enteritidis nos cecos e no número de aves positivas para o pool de órgãos coletados A utilização de níveis mais elevados de ácidos orgânicos (,75 ou 1,5 g kg-1 de ração) pode substituir os antibióticos, uma vez que apresentaram desempenho semelhante ao controle positivo e melhor digestibilidade de minerais, sem alterar a qualidade da carne, contudo não foi capaz de minimizar a infecção causada por Salmonella Enteritidis