CCB - CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
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Item A aplicação de nitrogênio e fósforo afeta distintamente a fisiologia e o crescimento de mudas de cinco espécies arbóreas da mata atlântica(Universidade Estadual de Londrina, 2023-03-02) Cunha, João Pedro Batista Fernandes; Moreira, Renata Stolf; Oliveira, Halley Caixeta de; Hertel, Mariana Fernandes; Medri, Cristiano; Torezan, José MarceloResumo: Nitrogênio (N) e fósforo (P) são nutrientes minerais essenciais, cuja disponibilidade é determinante para crescimento e desenvolvimento vegetal. Com o aumento da deposição antropogênica de nutrientes, especialmente N, a disponibilidade destes nutrientes nos ecossistemas terrestres deve aumentar, afetando o desenvolvimento vegetal. Este estudo tem como objetivo identificar como espécies arbóreas da Mata Atlântica com características ecológicas contrastantes respondem ao aumento da disponibilidade N e P no solo. Durante nove semanas, três espécies arbóreas nativas da Mata Atlântica intolerantes à sombra e duas tolerantes à sombra foram submetidas a aplicações semanais de (NH4)2SO4 ([N] = 4mM), NaH2PO4 ([P] = 1mM), ambas as soluções ou apenas água (tratamentos N, P, N+P e controle). Foram realizadas análises de trocas gasosas, biometria, determinações das concentrações foliares de N e P e análises químicas do solo. Nenhuma das espécies estudadas apresentou acúmulo de N após adição do nutriente. Além disso, nenhuma alteração do pH ou da disponibilidade de P no solo foi observada em razão da aplicação de N durante o período de estudo, enquanto o P adicionado acumulou-se no solo e nas folhas de três das cinco espécies estudadas. A aplicação dos nutrientes promoveu alterações fisiológicas e de crescimento em todas as espécies. As espécies intolerantes à sombra Cecropia pachystachya e Heliocarpus popayanensis responderam positivamente à adição conjunta de N e P, mas não aos nutrientes isolados. A terceira espécie intolerante à sombra, Croton floribundus, teve seu crescimento estimulado apenas pela adição de P. Entre as espécies tolerantes à sombra, Cariniana estrellensis teve o crescimento reduzido pela aplicação dos nutrientes separadamente, mas estimulado pela aplicação de N+P, enquanto Aspidosperma polyneuron respondeu positivamente a todos os tratamentos. Os resultados obtidos indicam que, a despeito do grau de tolerância à sombra, cada espécie responde de forma específica à adição de N e P. Abstract: Nitrogen (N) and phosphorus (P) are essential mineral nutrients which availability is critical for plant growth and development. With the increased anthropogenic nutrient deposition, especially N, the availability of these nutrients in terrestrial ecosystems is expected to increase, affecting plant development. This study aims to identify how tree species in the Atlantic Forest with contrasting ecological characteristics respond to increased N and P availability in the soil. During nine weeks, tree shade intolerant and two shade tolerant tree species native from the Atlantic Forest were subjected to weekly applications of (NH4)2SO4 ([N] = 4mM), NaH2PO4 ([P] = 1mM), both solutuions or just water (N, P, N+P, and control treatments). Gas exchange, biometry, foliar N and P concentrations, and soil chemical analyses were performed. None of the studied species showed N accumulation after nutrient addition. Furthermore, no changes in soil pH or P availability were observed due to N application during the study period, while added P accumulated in the soil and leaves of three out of five species studied. Nutrient applications caused physiological and growth changes in all species. Shade-intolerant species, Cecropia pachystachya and Heliocarpus popayanensis, responded positively to combined N and P addition but not to individual nutrients. The third shade-intolerant species, Croton floribundus, had its growth stimulated only by P addition. Among shade-tolerant species, Cariniana estrellensis had its growth reduced by separate nutrient applications but stimulated by N+P addition, while Aspidosperma polyneuron responded positively to all treatments. The results indicate that, regardless of shade tolerance, each species responds specifically to N and P addition.Item A exposição ao cyantraniliprole prejudica parâmetros reprodutivos masculinos na idade juvenil e parâmetros femininos na idade adulta em ratos wistar(2021-06-25) Scarton, Suellen Ribeiro da Silva; Fernandes, Glaura Scantamburlo Alves; Armani, Alessandra Lourenço Cecchini; Arena, Arielle Cristina; Ceravolo, Graziela Scalianti; Goes, Rejane Maira; Beu, Célia Cristina LemeO Brasil é um dos países que mais utiliza agrotóxicos no mundo e conta com legislação favorável a liberação de compostos de ação pouco conhecida sobre o organismo de mamíferos ou banidos em outras regiões do mundo. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito do inseticida Cyantraniliprole sobre parâmetros reprodutivos masculino e feminino de ratos Wistar púberes e adultos, após autorização OF. CIRC. CEUA nº134/2017, processo n° CEUA-UEL 211.062017-4. Em todos os experimentos o Cyantraniliprole foi utilizado em baixa dose de 10 mg / kg (grupo Low dose – LD) ou alta dose 150 mg / kg (grupo High dose – HD), água de torneira foi utilizada como veículo. No primeiro experimento machos, no dia pós-natal (DPN) 21, foram distribuídos nos grupos LD, HD ou controle (C), que recebeu somente veículo. O exposição se iniciou no DPN25, via intragástrica e a eutanásia ocorreu por saturação anestésica no DPN67. Espermatozoides foram coletados do ducto deferente para as análises de atividade mitocondrial da peça intermediaria, atividade da colinesterase – ChE, peroxidação lipídica – LPO, atividade da glicose-6-fosfato desidrogenase - G6PD e atividade da malato desidrogenase – MDH. No segundo experimento machos, DPN21, foram distribuídos nos grupos exposição: LD, HD e C. O tratamento se iniciou no DPN25, via intragástrica. A eutanásia de metade dos animais de cada grupo ocorreu por saturação anestésica no DPN67. Os outros animais de cada grupo foram mantidos vivos por mais 42 dias, sem receber o cyantraniliprole, originando os grupos recuperação, a eutanásia desses animais ocorreu por saturação anestésica no DPN110. De todos os grupos foram coletados plasma para determinação da concentração de testosterona. Os testículos foram pesados e utilizados para contagem espermática, avaliação do sistema antioxidante e de parâmetros histológicos e estereológicos. Espermatozoides do ducto deferente foram utilizados para avalição morfológica. No terceiro experimento, os efeitos do cyantraniliprole foram observados em fêmeas adultas, DPN67, distribuídas nos grupos C, LD e HD (n=6 por grupo). A eutanásia ocorreu no DPN95, foram coletados sangue, para dosagem de progesterona, útero e ovários para avaliação morfométrica e histopatológica, contagem de folículos ovarianos e marcadores bioquímicos de estresse oxidativo. Foi realizada a mensuração da massa (g) do fígado, rins, glândulas hipófise e adrenal. A concentração de progesterona e o peso do útero, ovário, fígado, rins, glândula adrenal e a foram maiores em LD. O número de ciclos estrais diminuiu e a duração do ciclo aumentou nos animais HD. O epitélio glandular do útero foi maior e o número de folículos ovarianos, primordial + primário, pré-antral, antral e atrésico foi reduzido em LD. A análise histopatológica revelou a ocorrência de metaplasia do epitélio luminal do útero com presença de mitose e polimorfismo das células do epitélio glandular, além da presença de infiltrado inflamatório no endométrio. Nos ovários, vasos sanguíneos congestos e hiperplasia da rete ovarii foram observados. A atividade da colinesterase no útero foi menor em ambas as doses. Maior ocorrência de lipoperoxidação e da atividade da enzima SOD ocorreram apenas em LD, e a atividade da GST foi aumentada em LD e HD. No ovário, a atividade da colinesterase foi aumentada nos animais tratados com ambas as doses, e a atividade da GPx foi maior apenas com LD. Como resultados observamos que no primeiro experimento a atividade mitocondrial e da MDH diminuíram nos espermatozoides expostos a LD, sem o aumento da peroxidação lipídica. A atividade da G6PDH e da ChE foram similar entre os grupos. No segundo experimento a atividade do sistema antioxidante entre os grupos exposição e recuperação foi similar, no entanto a produção de testosterona in vitro aumentou em LD e HD e diminuiu em LDR e HDR. O número de células de Sertoli foi menor em todos os grupos que receberam cyantraniliprole tanto na fase de exposição como na recuperação. A fase I-V do ciclo do epitélio seminífero foi aumentada e a fase VII-VIII, diminuída nos grupos que receberam o tratamento nos dois períodos. A proporção do lúmen e estroma foi maior, e do epitélio menor, apenas em LD, no entanto o número de espermatozoides por grama de testículo e a produção diária de espermatozoides foi diminuiu nos animais que receberam ambas as doses de cyantraniliprole, independente da fase do experimento. Como consequência o número de espermatozoides normais foi menor nos grupos que receberam Cyantraniliprole em relação ao controle. As principais anormalidades morfológicas observadas nos espermatozoides foram: falta de curvatura e cabeças isoladas, caudas quebradas e enroladas, e falta de integridade do acrossoma. No terceiro experimento, a concentração de progesterona e o peso do útero, ovário, fígado, rins, glândula adrenal foram maiores em LD. O número de ciclos estrais diminuiu e a duração do ciclo aumentou nos animais HD. O epitélio glandular do útero foi maior e o número de folículos ovarianos, primordial + primário, pré-antral, antral e atrésico foi reduzido em LD. A análise histopatológica revelou a ocorrência de metaplasia do epitélio luminal do útero com presença de mitose e polimorfismo das células do epitélio glandular, além da presença de infiltrado inflamatório no endométrio. Nos ovários, vasos sanguíneos congestos e hiperplasia da rete ovarii foram observados. A atividade da colinesterase no útero foi menor em ambas as doses. Maior ocorrência de lipoperoxidação e da atividade da enzima SOD ocorreram apenas em LD, e a atividade da GST foi aumentada em LD e HD. No ovário, a atividade da colinesterase foi maior nos animais tratados com ambas as doses, e a atividade da GPx foi maior apenas com LD. Esses resultados mostram que a baixa dose de cyantraniliprole prejudicou a membrana celular e a produção de energia dos espermatozoides e que os danos gerados pela exposição ao cyantraniliprole na puberdade foram mantidos ou acentuados, mesmo após o período de recuperação, ou seja, na vida adulta. O trato genital feminino também sofreu alterações, o que pode representar prejuízos fertilidade a esses indivíduos.Item A família gênica da glutamina sintetase em Coffea arabica: aspectos moleculares(2015-03-27) Soares, João Danillo Moura; Domingues, Douglas Silva; Rossi, Maria Magdalena; Vilas Boas, Laurival AntonioO nitrogênio (N) é o nutriente mineral requerido em grandes quantidades pelas plantas. É um elemento fundamental para o desenvolvimento e crescimento vegetal, e necessário para a síntese de diversas biomoléculas, como proteínas, ácidos nucleicos, clorofila, bases nitrogenadas, entre outras. O metabolismo de N pode ser dividido em três fases principais: 1) absorção; 2) assimilação e 3) remobilização e reutilização, as quais envolvem a participação de diversas enzimas. A glutamina sintetase (GS) é considerada uma enzima chave no metabolismo de compostos nitrogenados, pois é responsável pela assimilação de amônio inorgânico em aminoácidos, que serão doadores de fontes nitrogenadas para os diversos processos celulares. Esta enzima é codificada por uma pequena família gênica, com isoformas citosólicas e plastidiais. No entanto, existem poucos estudos sobre os aspectos moleculares e genômicos de GS em espécies lenhosas, mais especialmente no cafeeiro e sobre seu papel no desenvolvimento de frutos. Dessa forma, o objetivo desse trabalho é identificar e caracterizar os membros constituintes da família gênica de GS em dicotiledôneas lenhosas, e em Coffea arabica avaliar o perfil transcricional desses genes em resposta a estresses abióticos. Foram utilizadas plantas das cultivares IAPAR 59 e Catuaí Vermelho cultivadas sob altas temperaturas e altas concentrações de NaCl ou supressão de N, bem como frutos dessas cultivares em 3 fases de desenvolvimento. Avaliou-se os níveis transcricionais por meio de qPCR bem como foram realizadas quantificações de atividade enzimática de GS, níveis de clorofila, perda de eletrólitos e concentração de proteínas totais. A atividade transcricional da família gênica GS foi influenciada por estresses abióticos e ao longo do desenvolvimento de frutos e os genótipos analisados não respondem igualmente a tais condições. A atividade enzimática de GS sofreu variações menos pronunciadas que padrão transcricional e picos no perfil transcricional não estão diretamente associados com maior atividade enzimática. Esses fatos sugerem a ocorrência de outros mecanismos de regulação de GS, além do transcricional. A participação dessa família gênica no processo de enchimento de grãos pode ser notada tanto nos níveis de expressão quanto na atividade enzimática, com aumento em função do estádio de desenvolvimento, principalmente em endosperma. Esse trabalho fornece um painel detalhado para o entendimento do mecanismo de assimilação de N em diversas condições e em diferentes órgãos de C. arabica.Item A fitorremediação atenua os efeitos do cádmio e do níquel no teleósteo neotropical Prochilodus lineatus?(Universidade Estadual de Londrina, 2021-05-21) Bezerra, Vanessa; Rocha, Juliana Delatim Simonato; Martinez, Cláudia Bueno dos Reis; Souza, Marta Marques deResumo: O cádmio (Cd) e o níquel (Ni) são metais que causam preocupação como contaminantes ambientais, pois ambos podem provocar diversos efeitos tóxicos em organismos aquáticos. A fitorremediação através da macrófita aquática Lemna minor se mostra como uma possível alternativa para o tratamento de ecossistemas aquáticos contaminados por metais. Desse modo, é de suma importância avaliar se esse tipo de tratamento atenua os efeitos subletais observados em organismos aquáticos devido à presença de metais como o Cd e o Ni. Portanto, esse trabalho teve como objetivo avaliar se os efeitos subletais observados em Prochilodus lineatus devido a sua exposição aos metais Cd e Ni, isolados ou em mistura, são atenuados na presença da macrófita aquática L. minor. Para isso, foram realizadas exposições de 96 h ao Cd na concentração de 20 μg L-1, ao Ni na concentração de 1,5 mg L-1, e a mistura destes dois metais, na presença ou ausência de L. minor. Ao final de todas as exposições, foram coletadas amostras de diferentes tecidos de P. lineatus para comparar a resposta de vários biomarcadores entre os animais expostos aos metais na presença ou ausência de L. minor sobre a superfície da água. Foram avaliados a bioacumulação de Cd e Ni, concentração de metalotioneínas, a frequência de micronúcleo e alterações eritrocíticas nucleares (AENs), a atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE), parâmetros hematológicos e plasmáticos, além da atividade de enzimas de transporte iônico e danos histológicos nas brânquias. A exposição ao Cd isolado na ausência de L. minor provocou bioacumulação em vários tecidos, alterações na atividade da AChE, redução na atividade de enzimas de transporte iônico na brânquia, além de desbalanços iônicos. A exposição ao Ni na ausência das macrófitas também provocou bioacumulação e desbalanços iônicos, bem como a indução de metalotioneínas, um aumento do índice de alterações histológicas na brânquia e um aumento da frequência de AENs. Os peixes expostos à mistura de metais na ausência de L. minor apresentaram todos os efeitos subletais observados nas exposições aos metais isolados, além de um aumento na glicemia. A fitorremediação evitou o acúmulo de metais em alguns tecidos de P. lineatus, a hiperglicemia, além de alterações na atividade da AChE e na frequência de AENs. Entretanto, danos histológicos nas brânquias, desbalanços iônicos e a bioacumulação, principalmente nas brânquias, não foram atenuados pela fitorremediação. Portanto, conclui-se que a fitorremediação de 96 h mediada pela macrófita aquática L. minor atenuou parcialmente os efeitos subletais provocados em P. lineatus devido à exposição aos metais Cd e Ni. Estudos futuros seriam importantes para avaliar se todos esses efeitos subletais poderiam ser mitigados com períodos de remediação maiores. Abstract: Cadmium (Cd) and nickel (Ni) are metals that cause concern as environmental contaminants, because both of them induce various toxic effects on aquatic organisms. Phytoremediation mediated by the aquatic macrophyte Lemna minor is a possible alternative for the treatment of aquatic ecosystems contaminated by metals. Therefore, it is extremely important to assess whether this type of treatment attenuates the sublethal effects caused by exposure to metals, such as Cd and Ni. Thus, this study aimed to assess if the sublethal effects observed in Prochilodus lineatus due to Cd and Ni exposure, individually or in combination, are attenuated in the presence of the aquatic macrophyte L. minor. For this purpose, 96 h exposures to 20 μg L-1 of Cd, 1.5 mg L-1 of Ni and to the mixture of these two metals, in the presence or absence of L. minor, were performed. At the end of all exposures, samples of different tissues of P. lineatus were collected to compare the response of different biomarkers between animals exposed to metals in the presence or absence of L. minor on the water surface. We evaluated Cd an Ni bioaccumulation, metallothionein concentration, micronuclei and erythrocytic nuclear abnormalities (ENA) frequency, acetylcholinesterase (AChE) activity, hematological and plasmatic parameters, besides to the activity of ionic transport enzymes and histological damage in the gills. The exposure only to Cd in the absence of L. minor caused bioaccumulation in several tissues, changes in AChE activity, reduction in the activity of gill ionic transport enzymes and ionic imbalances. Exposure only to Ni in the absence of macrophytes also caused bioaccumulation and ionic imbalances, in addition to metallothionein induction, an increased ENA frequency and morphological changes in the gills. Fish exposed to the metal mixture in the absence of L. minor showed all the sublethal effects observed in the exposures to single metals, besides to an increase in plasmatic glucose. Phytoremediation could prevent metal bioaccumulation in some tissues of P. lineatus, as well as hyperglycemia, changes in AChE activity and ENA frequency. However, morphological changes in the gills, ionic imbalances and bioaccumulation, especially in the gills, were not mitigated by phytoremediation. Therefore, we conclude that a 96-h phytoremediation mediated by the aquatic macrophyte L. minor partially attenuated the sublethal effects caused in P. lineatus due to Cd and Ni exposure. Future studies would be important to assess whether all these sublethal effects could be mitigated with longer remediations.Item A influência da riqueza alimentar em comunidades parasitárias de Leptodactylus Podicipinus(Universidade Estadual de Londrina, 2021-03-09) Marques, Jamille Mariana de Oliveira; Aguiar, Aline; Lima, Marcos Robalinho; Santos, Rogério Conceição Lima dosResumo: Dentre muitos fatores associados ao parasitismo estão os diferentes aspectos da biologia do hospedeiro (hábito, dieta, idade, sexo e deslocamento), a disponibilidade de espécies de parasitas no local, ciclo de vida e sua capacidade de colonização. O recrutamento de parasitas por transmissão trófica em anuros é um fator importante para o estudo das comunidades parasitárias. Para compreender essa transmissão trófica é essencial que se entenda sobre a riqueza alimentar dos hospedeiros. No presente estudo utilizamos rãs da espécie Leptodactylus podicipinus (Cope, 1862) (Leptodactylidae) para avaliar a influência de características do hospedeiro (tamanho e sexo) e da sazonalidade na riqueza de itens alimentares e na comunidade de helmintos parasitas de anuros provenientes de uma reserva particular no noroeste do estado de São Paulo – Brasil. Os animais coletados tiveram seus dados biométricos mensurados e em seguida necropsiados para análise do conteúdo estomacal e procura de helmintos parasitas em todos os órgãos. Os helmintos e os itens do conteúdo estomacal foram fixados e preparados em laboratório para serem identificados ao menor nível taxonômico. Para análises da riqueza alimentar em relação as variáveis sexo, tamanho e sazonalidade, utilizamos um modelo linear generalizado (GLM). Da mesma forma, para avaliar a influência destas mesmas variáveis e dos itens da dieta nos parâmetros do parasitismo, realizamos análises de GLM. Nos 80 espécimes de L. podicipinus analisados, foi encontrada uma riqueza de 17 taxa de parasitas associados à vários órgãos e 14 taxa de presas foram encontradas em seus estômagos. A abundância média foi de 4,362 ± 3,302, a prevalência foi de 62,5%, a intensidade média da infecção foi de 6,98 ± 6,007 e a amplitude de 1–226, a riqueza média de parasitas foi de 0,625 ± 0,786, a diversidade média foi de 0,047 ± 0,128. A sazonalidade influente para riqueza de itens alimentares e riqueza de parasitas, ambos no período de seca, e o tamanho afetou a riqueza de itens alimentares, onde animais maiores apresentaram maior riqueza. Por fim, este estudo contribuiu para o conhecimento da alimentação e dos determinantes das comunidades parasitárias de L. podicipinus. Abstract: Among many factors associated with parasitism are different aspects of host biology (habit, diet, age, sex, and displacement), the availability of parasite species at the site, life cycle, and their ability to colonize. Parasite recruitment by trophic transmission in anurans is an important factor in the study of parasite communities. To understand this trophic transmission, it is essential to understand about the food richness of the hosts. In the present study we used frogs of the species Leptodactylus podicipinus (Cope, 1862) (Leptodactylidae) to evaluate the influence of host characteristics (size and sex) and seasonality on the richness of food items and on the community of parasitic helminths of anurans from a private reserve in the northwest of the state of São Paulo - Brazil. The animals collected had their biometric data measured and then necropsied to analyze the stomach contents and search for parasitic helminths in all organs. The helminths and stomach contents items were fixed and prepared in the laboratory to be identified to the lowest taxonomic level. For analyses of dietary richness in relation to sex, size, and seasonality variables, we used a generalized linear model (GLM). Similarly, to assess the influence of these same variables and diet items on parasitism parameters, we performed GLM analyses. In the 80 specimens of L. podicipinus analyzed, a richness of 17 parasite taxa associated with various organs was found and 14 prey taxa were found in their stomachs. The mean abundance was 4.362 ± 3.302, prevalence was 62.5%, mean infection intensity was 6.98 ± 6.007 and range 1-226, mean parasite richness was 0.625 ± 0.786, mean diversity was 0.047 ± 0.128. Seasonality influenced for food item richness and parasite richness, both in the dry period, and size affected food item richness, where larger animals showed higher richness. Finally, this study contributed to the knowledge of the diet and the determinants of the parasitic communities of L. podicipinus.Item A largura da faixa reflorestada afeta a formação da cobertura florestal em reflorestamentos com espécies nativas?(2024-05-10) Chimentão, Roberto Santa Rosa; Torezan, José Marcelo Domingues; Rodrigues, Larissa Cerqueira Dias; Medri, CristianoFatores como a extração seletiva de madeira no interior de florestas, efeitos de borda, especialmente microclimáticos, efeitos do tamanho do fragmento e da distância entre fragmentos afetam a conservação da biodiversidade (BERENGUER et al., 2014; BARLOW et al., 2016). Como ecossistemas em restauração também estão sujeitos a esses fatores, a recuperação pode ser comprometida à medida que esses fatores se apresentam na paisagem. O presente trabalho teve como objetivo avaliar 32 polígonos reflorestados a partir de 2002 através de sensoriamento remoto para investigar a formação da cobertura florestal observável em 2023 e, se há relação entre a cobertura vegetal proporcional dos polígonos reflorestados com fatores como área dos polígonos (ha), distância dos polígonos ao remanescente florestal mais próximo (m) e largura média da faixa de reflorestamento (m). Foi utilizado um Sistema de Informações Geográficas (SIG) através do software QGIS (ver.3.6.6) para coleta e processamento dos dados. Foi realizado um modelo linear generalizado na tentativa de estabelecer relação entre as 3 variáveis com a variável resposta. Não foi possível observar diferença significativa entre as 3 variáveis com a variável resposta, o que sugere que os fatores não surtem efeito na paisagem com a idade atual dos reflorestamentos. A resposta para essa hipótese pode estar justamente nas lacunas encontradas, como a falta de reflorestamentos mais antigos que os aqui estudados, dificultando na previsão dos resultados, ou mesmo nas limitações impostas pelas ferramentas via sensoriamento remoto, como a resolução espacial das bandas espectrais. Também, a forma de restauração ativa foi conduzida pode ter interferência por longos anos no sistema, seja de forma positiva ou negativa. Portanto, a ecologia da restauração ainda possui lacunas com relação aos efeitos na paisagem de reflorestamentos de diferentes idades, o que deve servir como motivação para trabalhos que buscam uma melhor compreensão e melhor efetividade quanto aos esforços na restauração ecológica.Item A plataforma Kahoot! como instrumento de ensino: uma proposta baseada no modelo da equivalência(2022-08-26) Castilho, Éllen Patrícia Alves; Haydu, Verônica Bender; Carmo, João dos Santos; Souza, Silvia Regina deEstratégias de ensino que envolvam tecnologias digitais e a gamificação podem facilitar o processo de aprendizagem podendo ser utilizadas como recursos de ensino. Esta dissertação apresenta dois estudos: um de revisão quase sistemática da literatura que embasou o planejamento do Estudo 2. O Estudo 1 visou a realizar uma revisão quase sistemática da literatura de estudos empíricos em que a Plataforma Kahoot! foi usada no ensino e na avaliação de repertórios acadêmicos. Os resultados indicaram que a bibliografia levantada expõe que o uso do Kahoot! proporciona melhora no desempenho dos participantes e foi identificado que os usos do Kahoot! foram majoritariamente como meio de avaliação ou revisão de conteúdos previamente ensinados. O Estudo 2 visou propor e avaliar um procedimento de ensino de multiplicação em contexto coletivo utilizando a Plataforma Kahoot!, baseado no modelo da equivalência de estímulos. Participou uma turma de estudantes de terceiro ano do ensino fundamental de uma escola particular da cidade de Londrina/PR. O ensino foi referente ao conceito de multiplicação entre dois números diferentes entre si, envolvendo a soma de agrupamentos de números iguais (adição) e a representação gráfica desses agrupamentos. Os participantes utilizaram dispositivos com conexão à internet para as atividades realizadas na Plataforma Kahoot!. Um caderno de respostas foi utilizado para a avaliação pré-intervenção, os testes de simetria, os testes de equivalência e a avaliação pós-intervenção. Verificou-se que houve a formação de classes de equivalência dos participantes que não haviam atingido o critério de acertos na avaliação pré-intervenção. Conclui-se que o presente estudo demonstrou ser viável uma tecnologia de ensino fundamentada no modelo da equivalência de estímulos, para ser usada em contexto coletivo de sala de aula, por meio de um recurso digital, a Plataforma Kahoot!Item A questão da pobreza e a formação em psicologia: análise dos currículos dos cursos de psicologia em IEES do Estado do Paraná(2023-07-05) Capalbo, Livia Salvioni; Silva, Rafael Bianchi; Jesus, Adriana Regina de; Facci, Marilda Gonçalves DiasA inserção dos psicólogos nas políticas públicas representa uma expansão do campo de atuação profissional. Trata-se de uma mudança de perfil da profissão, contexto de atuação e do público atendido que ultrapassa as abordagens tradicionais predominantemente clínicas e individualizantes que hegemonicamente balizam a formação. Este trabalho teve como objetivo analisar a estrutura e proposições de tal formação a partir do currículo de cursos de graduação em Psicologia de Instituições Estaduais de Ensino Superior do Estado do Paraná que ofertam o curso de Psicologia. Como ponto de partida, é apresentado um resgate teórico propondo a articulação entre os temas pobreza, políticas públicas e Psicologia a partir do conceito de “questão social” e, na sequência, histórico da formação do psicólogo no Brasil. Através da abordagem qualitativa, foi realizada uma pesquisa documental. Elegemos como fonte de dados da pesquisa os Projetos Pedagógicos de Curso e Programas de disciplinas, considerando a possibilidade de investigar elementos e características institucionais, permitindo uma aproximação em relação aos cursos de graduação em análise. Esta escolha se justifica pelo compromisso social das instituições públicas com as demandas sociais locais e pelo fato de serem referência no que tange aos processos de formação. A análise dos dados da pesquisa foi realizada a partir categoria “contradição”, conforme proposta realizada por Jamil Cury. Realizar uma análise a partir de tal categoria dialética, aponta para a possibilidade de mudança do que se encontra estabelecido, na medida em que abre espaço para a compreensão crítica da realidade. Para realizar tal análise, também consideramos concepções e as teorias críticas sobre currículo que tomam a escolarização como parte do sistema capitalista, entendida como mercadoria e não como como um direito social a ser garantido de forma igualitária a toda sociedade. Na Psicologia, incluindo a formação inicial na graduação, o compromisso com o campo social representa uma forte contradição. De modo geral, os documentos analisados não demonstraram uma preocupação em realizar um debate que possa abranger a questão da pobreza. O compromisso com a “questão social” aparece de forma tímida e implícita. As possibilidades de interlocução com o tema da pobreza foram identificadas na análise dos programas das disciplinas, principalmente na bibliografia básica indicada. As políticas públicas ganharam espaço, sobretudo por meio da oferta de disciplinas, e foi na relação entre os temas que identificamos alguma possibilidade de compreensão pelos estudantes sobre os contextos de pobreza enquanto um campo de atuação profissional que requer uma postura crítica diante das questões sociais. Ainda que existam avanços no sentido de trazer para o campo da formação do psicólogo experiências e produções teóricas atuais, principalmente do campo das políticas públicas, a mudança do perfil da profissão não parece estar acompanhada da mudança nas propostas curriculares. Foi possível identificar a manutenção das duas faces (contraditórias) da educação, que está integrada ao projeto de dominação e exclusão social ao mesmo tempo em que se coloca enquanto resistência frente àquilo que se encontra estabelecido e enraizado, ainda que de forma incipienteItem O abandono da psicoterapia individual no serviço-escola de psicologia da UEL : contribuições psicanalíticasOrtolan, Maria Lúcia Mantovanelli; Sei, Maíra Bonafé [Orientador]; Santos, Hernani Pereira do; Dionísio, Gustavo HenriqueResumo: As longas filas de espera para atendimento e o abandono da psicoterapia individual são fenômenos recorrentes nos serviços de saúde mental e com todas as faixas etárias, principalmente em serviços-escola de Psicologia Objetiva-se descrever, entre adultos que estiveram em psicoterapia individual em 217 a 219 no serviço-escola de Psicologia da Universidade Estadual de Londrina, os fatores associados ao abandono psicoterápico após a 12ª sessão de terapia Trata-se de um estudo qualitativo, com objetivos exploratórios e descritivos, mediante coleta de dados por meio de entrevistas semidirigidas, analisadas pelo método de análise de conteúdo A primeira fase da coleta de dados (n=3) teve como objetivo a caracterização da amostra, por meio das variáveis sociodemográficas e clínicas: gênero feminino (63,33%), faixa etária de 21 a 4 anos (6%), solteiros (46,67%), com ensino superior incompleto (26,66%), católicos (36,68%), pertencentes à comunidade externa à universidade (83,34%), de Londrina (8%), com renda de dois a cinco salários mínimos (5%), com presença de sintomas físicos (6%), não vinculados a tratamento médico (66,67%), em uso de medicação contínua (5%), com histórico anterior de psicoterapia (53,33%), em tratamento no serviço, em média, por 2 sessões, com um tempo médio de espera da sessão de triagem até o atendimento psicoterápico de cinco meses, atendidos pela abordagem teórica da psicanálise (6%), como queixa inicial de ansiedade (22,69%) Já a segunda fase contemplou as entrevistas semidirigidas realizadas com 11 participantes da amostra inicial Frente aos três grandes eixos temáticos apriorísticos, priorizou-se a análise do eixo Sobre o Abandono da Psicoterapia, divido em três categorias: Motivos do abandono da psicoterapia (tendo como subcategorias Relação com o terapeuta e suas atitudes; Indisponibilidade de horários e dificuldades de deslocamento; Troca de terapeuta; Insatisfação com os efeitos e resultados; Indisponibilidade subjetiva do paciente ao tratamento), Reações do terapeuta e Implicações institucionais (tendo como subcategorias Falta de Encaminhamento; Regras e Funcionamento da Clínica Psicológica; Atravessamentos da Gratuidade do Serviço) Além dos fatores associados ao abandono da psicoterapia individual, como a relação com o terapeuta e suas atitudes, a indisponibilidade de horários e dificuldade no deslocamento, as trocas de terapeuta, insatisfação com os efeitos e resultados da psicoterapia e a indisponibilidade subjetiva do paciente ao tratamento, outras questões podem estar em jogo, especificamente em uma análise psicanalítica dos dados, como as transferências (tendo a instituição e o supervisor clínico como objetos que atravessam a transferência entre paciente e terapeuta), a temporalidade dos atendimentos regrada pela instituição, fazendo concorrer o tempo lógico com o cronológico, a questão da supervisão clínica e a necessidade de um supervisor-analista, e a normatização curricular em relação à transmissão da Psicanálise, sendo necessário que esta seja possível apenas pela transferência de trabalho Espera-se que com os resultados trazidos e analisados ao longo desta pesquisa haja uma contribuição efetiva no serviço-escola de Psicologia, podendo propiciar reflexões institucionais com o intuito de qualificar a oferta de serviços, principalmente com relação à oferta da clínica psicanalíticaItem As abelhas das orquídeas da Ilha do Superagui : Uma abordagem ecológica e molecularGiangarelli, Douglas Caldeira; Sofia, Silvia Helena [Orientador]; Augusto, Solange Cristina; Garófalo, Carlos Alberto; Ribeiro, José Eduardo Lahoz da Silva; Júlio, Carlos Eduardo de AlvarengaResumo: As abelhas da tribo Euglossini formam um grupo distinto dentro da família Apidae, por apresentar particularidades restritas a esta tribo, como a coleta de fragrâncias em fontes florais e não-florais, realizadas por seus machos O grupo mostra forte associação de seus machos com flores de orquídeas, sendo a tribo popularmente conhecida como abelhas das orquídeas Em áreas de Mata Atlântica localizadas no sul do Brasil, os estudos com este grupo de abelhas ainda são escassos Visando contribuir para um maior conhecimento das comunidades de Euglossini presentes em latitudes sul acima de 25o, onde apenas uns poucos estudos foram realizados até o presente, este trabalho teve como objetivo estudar as comunidades de Euglossini de duas fitofisionomias de Mata Atlântica, Floresta Ombrófila Densa (FOD) e Restinga, da Ilha do Superagui (IS) Outro objetivo deste trabalho foi comparar a comunidade destas abelhas amostradas na área de FOD da IS com os resultados obtidos em um outro estudo realizado em uma reserva particular localizada no continente e cerca de 24 km da IS Além disto, outro foco de interesse foi o de analisar as similaridades nas escolhas de fragrâncias e amplitude e sobreposição de nichos de diferentes espécies na busca por tais fragrâncias artificiais Além desta abordagem ecológica, este estudo analisou as frequências de machos diploides de diferentes espécies de Euglossini, incluindo entre estas duas espécies amostradas na IS, para avaliar possíveis variações nas frequências de ocorrências destes machos em populações de ambientes mais e menos preservados O estudo da IS foi realizado entre Nov/211 e Mar/214 Contudo, as amostragens na área de Restinga tiveram início um ano mais tarde (Nov/212) e se estenderam até Mar/214 Assim, foram realizadas 1 coletas mensais na Restinga e 15 na área de FOD Para as amostragens foram utilizadas iscas-odores de oito fragrâncias químicas para a atração de machos euglossíneos Estes foram coletados com armadilhas e rede entomológica Os principais resultados foram: a) nas dez amostragens realizadas simultaneamente nas áreas de FOD e Restinga da IS, foram capturados 266 machos, de quatro gêneros e 13 espécies de Euglossini na área de FOD Euglossa stellfeldi e Euglossa annectans foram as duas espécies mais abundantes nesta fitofisionomia Na Restinga foram coletados 64 machos, pertencentes a três gêneros e oito espécies Nesta fitofisionomia Euglossa cordata e Euglossa stellfeldi foram as espécies mais abundantes Considerando-se riqueza, abundância e dominância de espécies, os dois tipos de fitofisionomias da IS diferiram significativamente na estrutura das comunidades destas abelhas; b) a comparação das comunidades de Euglossini das áreas de FOD da IS e da reserva no continente mostraram uma fauna muito similar, mas revelando estruturas distintas em termos de dominância de espécies; c) nos três anos de amostragens, realizadas durante a estação quente-úmida na área de FOD da IS, foram coletados 378 machos de 13 espécies Euglossa annectans foi a espécie que mostrou maior diversidade no conjunto vii tde fragrâncias exploradas e maior amplitude de nicho em relação às outras três espécies mais abundantes na área estudada Euglossa roderici foi a espécie que mostrou a menor sobreposição de nicho e similaridade na exploração das fragrâncias disponíveis; d) em relação às análises iinéticas, os resultados revelaram que as frequências de machos diploides mantiveram-se abaixo de 1%, para cinco das seis espécies estudadas, entretanto, em três populações de Euglossa annectans as frequências destes machos ficaram acima de 15,% Tal espécie foi apontada como potencialmente mais sensível a interferências antrópicas no ambienteItem Uma abordagem integrada para avaliação dos efeitos de contaminantes agrícolas em peixes : testes in situ e em laboratório, bioacumulação e respostas de múltiplos biomarcadoresVieira, Carlos Eduardo Delfino; Martinez, Cláudia Bueno dos Reis [Orientador]; Cestari, Marta Margarete; Almeida, Eduardo Alves de; Oliveira, Halley Caixeta de; Meletti, Paulo CésarResumo: O intenso crescimento demográfico aliado à expansão mundial do mercado de produção agrícola, tem sido alvo de debates atuais acerca dos potenciais efeitos da contaminação agrícola, complexa e difusa, sobre o meio ambiente, em particular para os ecossistemas aquáticos As abordagens atuais em Ecotoxicologia nem sempre representam a realidade ecológica, pois não incorporam as variáveis naturais de campo e a complexidade das misturas de contaminantes em concentrações flutuantes que podem interagir entre si e com outros fatores abióticos, resultando em efeitos tóxicos imprevisíveis Neste contexto, nesta Tese buscou-se verificar como estes fatores em situações reais de exposição afetam as respostas bioquímicas, fisiológicas, genéticas, histológicas e comportamentais em juvenis do teleósteo dulcícola Prochilodus lineatus, que representa uma espécie de grande importância ecológica, econômica e comercial Os peixes foram confinados in situ por um período de 12 dias em dois locais caracterizados por diferentes níveis de impacto antrópico em áreas agrícolas do Sul do Brasil Os dois ambientes foram caracterizados quanto à presença de alguns agrotóxicos de uso atual (CUPs), organoclorados (OCPs) e metais, e adicionalmente, a bioacumulação destes compostos em diferentes órgãos dos peixes também foi verificada O confinamento in situ ao longo de 12 dias à mistura de contaminantes em maior concentração no local experimental (EXP), manifestou nestes peixes, de maneira geral, prejuízos em sua homeostasia, como a ocorrência de danos oxidativos em proteínas (PCC) e lipídeos (LPO), quebras no DNA e a ocorrência de danos mutagênicos (micronúcleos), danos histológicos pontuais no fígado, brânquia e rim, alterações metabólicas relacionadas à resposta de estresse, desajustes osmoiônicos e diminuição do crescimento e da capacidade de resistência natatória ao longo do tempo de exposição, quando comparado aos animais confinados no local com menores concentrações de contaminantes (REF) Adicionalmente, os peixes confinados em EXP bioacumularam mais OCPs no fígado, com destaque para o endossulfan, e grande parte das respostas biológicas observadas podem estar relacionadas com o maior acúmulo destas substâncias reconhecidamente tóxicas no organismo Os resultados de campo foram integrados em índices de biomarcadores e análises multivariadas e, em conjunto, demonstraram que os endpoints biológicos avaliados foram sensíveis e se correlacionaram bem com o nível de contaminação dos locais Assim sendo, foi demonstrado de forma mais realista que misturas de contaminantes agrícolas podem afetar a qualidade dos ecossistemas aquáticos e diminuir o fitness de peixes expostos a estes xenobióticos, e por conseguinte, alterações em endpoints ecologicamente relevantes, tais como o crescimento e capacidade natatória, podem afetar as populações naturais e o ecossistema Na outra perspectiva desta Tese, foram realizados experimentos de laboratório para verificar a toxicidade isolada de inseticidas de crescente uso mundial, potenciais substitutos aos inseticidas organofosforados e carbamatos, em concentrações ambientalmente relevantes Após 12 h de exposição ao neonicotinóide imidacloprid (IMI), P lineatus apresentaram respostas adaptativas, como alterações em enzimas de biotransformação e defesa antioxidante, que foram responsáveis pela proteção de alguns órgãos, em concentrações mais elevadas, embora em outros, como a brânquia, rim e fígado o sistema de defesa celular não foi suficiente para prevenir a ocorrência de danos oxidativos (LPO e PCC) O potencial genotóxico do IMI foi evidenciado pela ocorrência de danos no DNA e de alterações eritrocíticas nucleares Por último, a toxicidade do piretróide lambda-cialotrina (CL) para a mesma espécie também foi verificada, e diversos efeitos deletérios foram observados em diferentes órgãos do peixe, indicando que CL em 96 h de exposição foi capaz de desencadear respostas de estresse, danos oxidativos em brânquia e rim, neurotoxicidade, desajustes osmorregulatórios (alterações das ATPases branquiais com consequente hiponatremia e hipocalcemia) e danos no DNA Através da utilização de abordagens variadas e de múltiplos biomarcadores, foi possível contribuir para o conhecimento das respostas biológicas desencadeadas por agrotóxicos em peixes, na presença destes contaminantes agrícolas Em última análise, esta Tese mostrou que ambas as abordagens experimentais (campo e laboratório) demonstraram que os agrotóxicos são prejudiciais para peixes neotropicais e os biomarcadores mais sensíveis foram os biomarcadores de efeito (danos oxidativos e genéticos), constituindo promissoras ferramentas para monitoramento da qualidade ambiental em áreas agrícolas O peixe P lineatus pode ser considerado um excelente modelo biológico para futuros programas de biomonitoramento nestas regiõesItem Abordagem polifásica na taxonomia, filogenia e eficiência da fixação biológica do nitrogênio de rizóbios simbiontes de feijoeiroCardoso, Juscélio Donizete; Hungria, Mariangela [Orientador]; Barcellos, Fernando Gomes; Silva, Krisle da; Nogueira, Marco Antonio; Andrade, Diva Souza [Coorientadora]Resumo: O feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L) é uma leguminosa com baixa especificidade em nodular com uma variedade de estirpes de rizóbios, os quais muitas vezes têm baixa efetividade na fixação de nitrogênio O objetivo geral desta tese foi o de estudar a eficiência simbiótica e a filogenia de um grupo elite de estirpes de rizóbios, microssimbiontes do feijoeiro, utilizando uma abordagem polifásica Avaliaram-se a eficiência simbiótica, características fenotípicas e genotípicas de estirpes de rizóbios isoladas de sementes, nódulos de feijoeiro, nódulos de amendoinzeiro (Arachis hypogaea L) e mucuna anã (Mucuna pruriens) cultivadas em solos de diversos agroecossistemas Quarenta e cinco estirpes elite foram analisadas quanto às propriedades simbióticas (nodulação, massa da parte aérea seca, N- total na parte aérea, porcentagem de N-ureído da seiva do xilema) em casa de vegetação, em vasos contendo solo arenoso não estéril cultivado com feijoeiro As estirpes elite também foram caracterizadas em relação às propriedades morfo-fisiológicas, perfis genéticos de rep-PCR (BOX) e polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP – Restriction Fragment of Length Polymorphism) do gene 16S rRNA, utilizando-se quatro enzimas de restrição Na análise parcial das sequências do 16S rRNA, foram utilizadas 17 estirpes representantes obtidas dos principais grupos resultantes das análises anteriores A estirpe mais eficiente foi a IPR-Pv268, que agrupou com Rhizobium sp, enquanto a IPR-Pv583, mostrando menor eficácia na fixação do N2 foi agrupada com Herbaspirillum lusitanum Estirpes 2 eficientes foram agrupadas com espécies simbióticas e gêneros pouco comuns entre simbióticos, incluindo Leifsonia xyli, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia e Enterobacter As seis estirpes que apresentaram dissimilaridade do gene 16S RNA do gênero Rhizobium foram submetidas às análises do MLSA (Multilocus Sequence Analyses) e do gene nifH Os índices de diversidade (Shannon), com base nas características fenótipicas (eficiência simbiótica, morfo-fisiológicas) e genéticas (BOX-PCR, RFLP do 16S rRNA e sequências do gene 16S rRNAs), calculados em função do número de grupos e de estirpes em cada grupo, apresentaram valores de 1,5 e 1,47, respectivamente Algumas estirpes utilizadas neste estudo se destacaram quanto à sua capacidade de fixação de nitrogênio e, portanto, mostraram alto potencial biotecnológico para a utilização em inoculantes comerciaisItem Abordagens genéticas voltadas para o conhecimento de diferentes aspectos da biologia de abelhas EuglossiniSuzuki, Karen Mayumi; Sofia, Silvia Helena [Orientador]; Augusto, Solange Cristina; Arias, Maria Cristina; Ruas, Claudete de Fátima; Souza, Rogério Fernandes deResumo: Euglossa constitui o gênero mais diverso em número de espécies da tribo Euglossini, com mais de 11 espécies reconhecidas Porém, algumas questões têm sido levantadas em relação às espécies de Euglossa O presente trabalho fez uso de diferentes técnicas moleculares para tentar responder algumas questões genéticas envolvendo as abelhas Euglossini, em destaque: questões taxonômicas e filogenéticas, especialmente as relacionadas a várias espécies de Euglossa com ocorrência reconhecida para a Mata Atlântica; e, aspectos ligados à origem de indivíduos ginandromorfos e intersexos O presente trabalho utilizou o sequenciamento de parte das regiões COI, CytB e 16S rDNA do DNA mitocondrial e região 28S rDNA do DNA nuclear a fim de tentar elucidar o real status taxonômico de Euglossa iopoecila e Euglossa roubiki Foi realizada a análise de distância genética segundo o modelo K2P, para a região barcode de Euglossa iopoecila e Euglossa roubiki bem como análises filogenéticas (máxima parcimônia (MP), máxima verossimilhança (ML) e análise bayesiana) Os dados da região barcode, do gene CytB e dos genes concatenados foram utilizados para a construção de redes de haplótipos Os dados concatenados de todos os genes resultaram em 3125 caracteres utilizados nas análises Os valores baixos (<,3%) de distância genética (modelo K2P) encontrados entre os indivíduos de E iopoecila e E roubiki e as análises de máxima parcimônia, máxima verossimilhança e bayesiana, bem como as redes de haplótipos indicam ser estas uma mesma espécie Igualmente, foi utilizado o sequenciamento de parte das regiões COI, 16S e 28S, para delinear a filogenia de espécies do gênero Euglossa da Mata Atlântica e, realizar as análises filogenéticas (MP, ML e análise bayesiana) Os dados concatenados de todos os genes resultaram em 2311 caracteres utilizados nas análises As árvores filogenéticas encontradas no presente trabalho sustentam os resultados de outros que apontam Euglossella como grupo irmão dos outros subgêneros de Euglossa; ainda, alguns ramos se mostraram parafiléticos corroborando os resultados de outros trabalhos, que apontam um agrupamento entre Glossura, Glossurella e Glossuropoda Os resultados obtidos reforçam a necessidade de uma revisão dos subgêneros de Euglossa Para o estudo de um indivíduo ginandromorfo de Euglossa melanotricha foram utilizados nove marcadores microssatélites, que indicaram ser este um organismo haploide ou homozigoto para os locos analisados Em relação ao indivíduo de E melanotricha, os resultados indicam se tratar de um organismo intersexo, pois este possui partes femininas e masculinas (tecidos) e é geneticamente uniformeItem Ação anti-toxoplasma do ácido cafeico em modelo de infecção congênita in vitro(2022-08-18) Santos, Yasmin Munhoz; Costa, Idessania Nazareth; Fernandes, Glaura Scantamburlo Alves; Sanfelice, Raquel Arruda da SilvaToxoplasmose é a infecção causada pelo protozoário Toxoplasma gondii, que assume caráter grave em indivíduos imunocomprometidos, na toxoplasmose ocular e principalmente em casos de infecção congênita. O tratamento da toxoplasmose é dificultado pela toxicidade apresentada pelos fármacos convencionais, sulfadiazina e pirimetamina, e por isso, outros compostos vêm sendo avaliados como tratamento alternativo para esta infecção. O ácido cafeico é um composto fenólico, encontrado em abundância em muitas plantas e alimentos com comprovados efeitos antimicrobiano, antioxidante, anti-Leishmania e anti- tripanossomal. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito anti- proliferativo, imunológico, bem como os mecanismos envolvidos no processo de morte de formas taquizoítas de Toxoplasma gondii (cepa RH) e na infecção de células trofoblásticas extravilosas HTR8/Svneo utilizando ácido cafeico. Para isso, foi avaliada a citotoxicidade do tratamento com AC em células HTR8/SVneo pelo ensaio de resazurina. A viabilidade dos taquizoítas foi realizada utilizando método de exclusão por azul de tripan. A atividade antiproliferativa do tratamento com AC foi determinada pelos índices de infecção e proliferação intracelular do parasito e confirmados também pela microscopia ótica. Os mecanismos envolvidos na morte do parasito analisados foram, níveis de espécies reativas de oxigênio (ERO), óxido nítrico (NO), potencial de membrana mitocondrial e gotículas lipídicas. Apoptose e permeabilização da membrana plasmática foram avaliados através da marcação com Anexina-V e iodeto de propídeo, além de autofagia por monodansilcadaverina. Por fim foi analisada a produção de citocinas pró e antiinflamatórias. Os resultados demonstram que AC não apresenta toxicidade para células HTR8/SVneo e diminui a viabilidade de taquizoítas de T.gondii. Houve redução da infecção e da proliferação intracelular, com aumento da produção das interleucinas IL-1ß, MIF e TGF-ß. Além disso no parasito foi observado aumento de NO e ERO, despolarização da membrana mitocondrial, formação de gotículas lipídicas e morte sugestiva de apoptose. Ácido cafeico portanto é um potencial candidato para novos estudos que visam o desenvolvimento de terapias para toxoplasmose congênitaItem Ação antibacteriana de enterocinas produzidas por espécies de Enterococcus sobre células planctônicas e biofilmesRocha, Kátia Real; Furlaneto, Márcia Cristina [Orientador]; Costa, Giselle Aparecida Nobre; França, Emanuele Júlio Galvão de; Rocha, Sérgio Paulo Dejato da; Panagio, Luciano Aparecido; Furla Neto-Maia, Luciana [Coorientadora]Resumo: Enterocococcus spp pertencem ao grupo bactérias ácido láticas produtoras de bacteriocinas (enterocinas) que apresentam atividade contra várias bactérias patogênicas de origem alimentar Este estudo foi realizado primeiramente para selecionar enterococos produtores de enterocinas contra Listeria innocua 12612, bem como seu espectro de ação contra outras bactérias oportunistas e em seguida avaliar a influência de suas enterocinas em biofilme bacteriano Para tal, os isolados potencialmente produtores de enterocinas (Ent+) contra L innocua 12612 foram caracterizados quanto a presença de genes estruturais para enterocinas e produção de componente hemolítico Em seguida foi obtido o sobrenadante de cultivo livre de células (CFS) dos Ent+, para avaliar sua ação contra L innocua 12612 por método de disco-difusão, após tratamento com calor (8°C e 1°C), enzimas proteolíticas (a- quimiotripsina, protease e tripsina), resistência a catalase, quantificação da atividade antibacteriana do CFS e do CFS parcialmente purificado por unidade arbitrária (UA), bem como determinar seu respectivo modo de ação e espectro antibacteriano contra outras bactérias Dos 76 enterococos de diferentes fontes, 11 foram considerados Ent+ (5 isolados provenientes de alimentos e 6 de ambiente), além disso 9 destes apresentavam ao menos um gene codificador de enterocina, entA, entB, entP, ent171 e/ou entX Não houve isolados com atividade hemolítica Após a obtenção dos CFS 7/11 dos isolados Ent+ (5 de alimentos e 2 de ambientes) apresentaram halo de inibição contra L innocua Esses 7 CFS foram termoestáveis, de natureza proteica e a ação antibacteriana por peróxido de hidrogênio foi descartada pela utilização de catalase, indicando a ação antagônica pela presença de enterocina Ao concentrar a enterocina (CFS parcialmente purificado) os valores de UA tenderam a aumentar O modo de ação observado foi bactericida A ativididade antagônica dos 7 CFS contendo enterocina contra outras 33 bactérias indicadoras ocorreu principalmente em L innocua, Listeria monocytogenes e Listeria ivanovii Os CFS que apresentaram maiores valores de UA e espectro de ação foram os provenientes de alimentos, provavelmente isso possa estar relacionada com a maior quantidade de genes codificadores de enterocinas por parte desses isolados Além disso, foram selecionados 4 CFS provenientes de alimentos para avaliar sua atividade anti-biofilme de Listeria spp, no desenvolvimento e após a pré- formação do biofilme por 24h a 3°C e 37°C O biofilme foi formado em superfícies abiótica e avaliado por biomassa total (cristal violeta), atividade metabólica (redução de XTT) e microscopio de fluorescência (com marcador de célula morta utilizando iodeto de propidio) Para tal, 8 Listeria spp foram avaliadas quanto a formação de biofime por biomassa total Dessas foram selecionados 3 Listeria spp (Listeria monocytogenes 232, Listeria ivanovii 256 e Listeria innocua 25) para serem submetidas ao tratamento com os CFS Os resultados mostraram que houve atividade anti-biofilme das Listeria spp, por parte de todos os CFS avaliados (desenvolvimento e no biofilme pré-formado), em ambas temperaturas avaliadas De uma maneira geral, a atividade anti-biofilme listerial provocadas pelos CFS, foi acompanhada por uma menor atividade metabólica, bem como redução da estrutura do biofilme e maior quantidade de células mortas nas imagens obtidas, quando comparado com o controle Concluindo, com base nos esforços consideráveis para a busca por novas bacteriocinas para serem aplicadas na área alimentícia principalmente contra Listeria, um importante patógeno alimentar, tem que os enterococos aqui avaliados apresentam-se como potenciais candidatos no controle de bactérias patogênicas sejam em células planctônicas ou sésseisItem Ação antibiótica de metabólito de Pseudomonas sp. no controle da Xanthomonas arboricola pv. pruniVasconcellos, Fernanda Corrêa da Silva; Andrade Filho, Galdino [Orientador]; Mello, João Carlos Palazzo de; Zangaro Filho, WaldemarResumo: A bacteriose no pessegueiro é causada pela bactéria Xanthomonas arboricola pv pruni (Xap) que é considerada um dos maiores problemas da cultura São utilizados para o controle desta doença produtos à base de cobre e antibióticos, que podem causar resistência bacteriana e contaminar o meio ambiente Com isso, o controle biológico é uma alternativa para controlar os fitopatógenos Portanto, avaliou-se o metabólito produzido pela bactéria Pseudomonas sp no controle da Xap A Pseudomonas sp foi cultivada em caldo nutriente + CuCl2 por 15 dias (28 °C, 1 rpm) e em seguida centrifugada (9 rpm, 2 min, 4 °C) O sobrenadante foi tratado com diclorometano, concentrado em rotavapor a 45 °C, congelado em nitrogênio líquido e liofilizado A fase diclorometano (FD) obtida foi fracionada por cromatografia líquida a vácuo (CLV) utilizando os solventes, Hexano (F1), Diclorometano (F2) e Acetato de Etila (F3) A fração F3 foi testada quanto à atividade antibiótica contra a Xap através da técnica de difusão em ágar, na concentração inibitória mínima, na avaliação ultra-estrutural utilizando a microscopia eletrônica de varredura e na avaliação sobre a ocorrência de lesões em folha Nesta avaliação as plantas foram mantidas em casa de vegetação e foram tratadas com a fração F3 em dois tempos de aplicação (pré e pós tratamento) nas concentrações de 5, 15, 45 µg mL-1 O número de lesões foi avaliado a partir da contagem nas folhas das plantas No teste de difusão em ágar todas as concentrações inibiram a Xap, sendo a concentração inibitória mínima de 5 µg mL-1 Na avaliação ultra-estrutural pode-se observar alterações no exopolissacarídeo e na morfologia bacteriana Na ultima avaliação os dois tratamentos foram significativos no controle da Xap sendo a concentração 45 µg mL-1 mais efetiva contra a bacteriose Com isso, pode-se concluir que a fração F3 pode ser uma boa alternativa de controle para a bacteriose, diminuindo assim o uso de agrotóxicos, sendo necessário mais estudos desta fração para ser utilizada no campoItem Ação da metformina in vivo e in vitro em modelo experimental de melanoma murinoSouza Neto, Fernando Pinheiro de; Armani, Alessandra Lourenço Cecchini [Orientador]; Guarnier, Flávia Alessandra; Prado, Sara Santos Bernardes RealResumo: O melanoma cutâneo se origina de alterações dos melanócitos, células produtoras de melanina, sendo um dos cânceres mais letais A metformina é uma droga usada para diabetes tipo dois, mas a partir dos anos 2, estudos pré-clínicos e epidemiológicos demostraram que a metformina reduz tanto o risco de desenvolvimento de câncer quanto sua mortalidade, fornecendo menos energia necessária ao crescimento tumoral Indiretamente age ativando AMPK (adenina monofosfato quinase), enzima relacionada à homeostase energética, diminuindo vias anabólicas necessárias à proliferação celular O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da metformina em modelo experimental de melanoma murino in vitro e in vivo, a fim de estudar a participação dos radicais livres na proliferação tumoral No presente trabalho foram utilizados camundongos machos de 8-12 semanas da linhagem C57BL6 Implantados subcutaneamente na região dorsal (15 células de B16F1) Entre a implantação do tumor e o sacrifício do animal são 14 dias O tratamento com metformina se inicia após 3 dias da implantação, permitindo avaliar a progressão tumoral O tratamento com metformina foi por via intraperitoneal dado diariamente, na dose de 9mg/kg de camundongo diluída em PBS In vivo, verificou-se se a metformina altera o EO no melanoma murino Resultados in vivo foram que o tratamento com metformina (9mg/kg) via intraperitoneal reduziu consideravelmente o volume tumoral p<5 Os níveis de MDA não foram alterados no tratamento com metformina O grupo tumor metformina aumentou significativamente a capacidade antioxidante total comparado com o grupo controle (p<5), sugerindo uma proteção sistêmica dada pela metformina ao aumento de espécies reativas Foram realizados testes do tipo ELISA para detecção de citocinas como TGF-ß (fator de crescimento tumoral do tipo ß), um dos marcadores de imunossupressão e para VEGF (fator de crescimento endotelial vascular), favorecendo o crescimento tumoral Os resultados para LDH de ambos os grupos tumores, tanto o grupo tratado com PBS quanto o tratado com MET, estão elevadosOs níveis de VEGF no grupo tumor metformina está diminuído em relação ao seu grupo controle (p<5), portanto, o tratamento com metformina foi suficiente em diminuir os níveis dessa citocina responsável pelo crescimento tumoral, via angiogênese In vitro foi analisado os efeitos da metformina sobre células murinas (B16F1) de melanoma metastático, a mesma célula que foi implantada in vivo As células foram expostas a metformina por 24 e 48 horas, nas concentrações de 6, 3, 1 e 5 µM Estes resultados condizem com o teste de proliferação celular que em 24 horas e em 48 horas apresentam resultados semelhantes As principais conclusões do estudo in vivo deste trabalho são: A metformina diminui o crescimento celular com diminuição do volume tumoral; o estresse oxidativo sistêmico no melanoma é baseado na diminuição de alguns parâmetros antioxidantes Quando do tratamento com a metformina, esta reestabelece estes para a normalidade O VEGF está diminuído quando metformina é usada no tratamento do tumor, indicando um possível alvo terapêutico Os estudos in vitro indicam que a metformina é citotóxica, aumenta a apoptose e diminui a proliferação celularItem Ação de extratos de Lentinula edodes e β-glucana isolada de Agaricus brasiliensis na replicação do poliovírus e herpesvírus bovinoRincão, Vinícios Pires; Linhares, Vinícios Pires [Orientador]; Ogatta, Sueli Fumie Yamada; Nakamura, Tânia UedaResumo: Compostos isolados do basidiomiceto Lentinula edodes, conhecido como shiitake, apresentam propriedades imunomoduladora, antimetastásica e antimicrobiana O Agaricus brasiliensis, um basidiomiceto conhecido como Cogumelo do Sol, é amplamente utilizado na medicina popular no tratamento de várias doenças e compostos isolados do seu micélio e do corpo de frutificação demonstraram propriedades terapêuticas O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antiviral do extrato aquoso (AqE) e etanólico (EtOHE) obtidos de L edodes e de uma ß glucana isolada do A brasiliensis na replicação de poliovírus tipo 1 (PV-1) e herpesvirus bovino tipo 1 (BHV-1) A adição do AqE, EtOHE e ß glucana foi feita antes, durante e após a infecção e a atividade antiviral monitorada por ensaio de plaque Foi também avaliada a atividade virucida e inibição da adsorção viral pelo AqE e EtOHE Os resultados mostraram que o AqE e a ß-glucana, quando adicionados as células durante a infecção (tempo h) inibiram a replicação do PV-1 em 8246% e 6853%, e a do BHV-1 em 8988% e 8318% respectivamente Enquanto o EtOHE foi mais efetivo no tempo de 1 h de infecção tanto para o PV-1 (7692%) quanto para o BHV-1 (963%) O AqE e EtOHE apresentaram baixa atividade virucida e inibição da adsorção viral não significativa para ambos os vírus A atividade antiviral também foi demonstrada para o AqE e EtOHE por reação de imunofluorescência indireta, no tempo h da infecção Diante dos dados obtidos sugerimos que o AqE, EtOHE e ß-glucana atuam nos processos iniciais da replicação do PV-1 e BHV-1Item Ação de metabólitos secundários e de inoculantes microbianos na promoção de crescimento de soja (Glycine max (L.) Merr.) e milho (Zea mays L.)Marks, Bettina Berquó; Hungria, Mariangela [Orientador]; Mercante, Fábio; Araujo, RicardoResumo: Com a atual deterioração ambiental, causada, entre outros fatores, pelo aumento progressivo da população mundial, o Brasil, em um futuro próximo, se destacará como sendo um celeiro de alimentos mundial Entre as culturas que desempenham papel importante no cenário agricola brasileiro destacam-se a soja (Glycine max (L) Merr) e o milho (Zea mays L) A substituição do uso de fertilizantes nitrogenados por bio-fertilizantes e inoculantes contendo bactérias rizosféricas fixadoras de nitrogênio (rizóbios) e promotoras do crescimento de plantas (BPCPs) pode diminuir os custos de produção para os agricultores e diminuir a poluição ambiental, através da redução da emissão de gases poluentes, e contaminações de solos e lençóis freáticos Os microrganismos rizosféricos conhecidamente produzem compostos derivados de seu metabolismo secundário, que aumentam sua sobrevivência e podem ainda promover o crescimento vegetal Entre esses compostos destacam-se os antimicrobianos, exopolissacarídeos, lipoquitooligossacarídeos (LCOs) e hormônios vegetais Apesar dos recentes avanços no entendimento de como as sinalizações químicas bactéria-planta hospedeira se dão, moléculas provenientes do metabolismo secundário bacteriano ainda são parcamente utilizadas para aumentar a produção agrícola Neste estudo foram testados os efeitos de metabólitos secundários concentrados (MSCs) de duas estirpes de rizóbios, Bradyrhizobium japonicum USDA 11 e Rhizobium tropici CIAT 899, em diferentes concentrações, em duas importantes interações bactéria-planta: B japonicum-soja e Azospirillum brasilense-milho Para soja, foram feitos dois ensaios a campo e dois ensaios em casa de vegetação, onde o efeito da adição de MSC homólogo e heterólogo, e do flavonoide indutor genisteína, adicionados a inoculante contendo B japonicum, foram testados Para milho foram realizados três ensaios a campo e três ensaios em casa de vegetação, para observar os efeitos no crescimento da cultura, da adição de MSCs provenientes de ambas estirpes, a inoculante contendo A brasilense Foram analisados os seguintes parâmetros: massa da parte aérea seca (MPAS), teor de N na parte aérea (mgN/g), acúmulo de N na parte aérea (mgN/pl) [em soja e milho em todos os ensaios]; massa da raiz seca (MRS) [em soja e milho em casa de vegetação]; produção de grãos (PROD) [em soja e milho a campo]; número de nódulos (NN) e massa de nódulos seca (MNS) [em soja em todos os ensaios] Nos ensaios a campo de soja, quando comparado ao tratamento somente inoculado, o tratamento com a adição de MSC de B japonicum USDA 11 a 1-9 M obteve os maiores valores absolutos de número e massa seca de nódulos, e uma produção de grãos 4% maior Já nos ensaios em casa de vegetação, a adição de MSCs não produziu plantas de soja com valores significativamente maiores do que os demais tratamentos Em milho, nos ensaios a campo, os maiores valores absolutos foram obtidos no tratamento com a adição de MSC proveniente de R tropici CIAT 899 a 1-8 M, com aumentos de produção que chegaram a 17% quando comparados ao tratamento inoculado + 75%N Nos ensaios de casa de vegetação, as plantas de milho que obtiveram os maiores valores absolutos nos parâmetros analisados foram aquelas tratadas com MSCs provenientes de B japonicum USDA 11 na concentração 1-9 M Os benefícios observados neste trabalho podem ser devidos à combinação de efeitos positivos provenientes dos MSCs adicionados aos inoculantes, incluindo os efeitos protetores dos exopolissacarídeos, e os efeitos promotores de crescimento dos LCOs e dos hormônios vegetais Tais resultados chamam atenção para o potencial biotecnólogico do uso de metabólitos microbianos secundários de rizóbios, que adicionados a inoculantes contendo rizóbios ou BPCP, podem promover o crescimento e aumentar a produção agrícolaItem Ação protetora de extrato de sementes de Artocarpus integrifolia L. contra infecção por Candida albicans através do aumento das funções de fagócitosLoyola, Wagner; Felipe, Ionice [Orientador]; Silva, João Santana da; Saridakis, Halha Ostrensky; Gaziri, Luis Carlos Jabur; Panagio, Luciano AparecidoResumo: Este trabalho pesquisou os principais efeitos de extrato de sementes de Artocarpus integrifolia (EJ), na fagocitose e morte de Candida albicans, na produção de TNF-a e envolvimento com a sobrevivência dos animais a um inóculo letal do fungo Os macrófagos de animais pré-tratados com EJ por 72 h foram co-incubados 1:5 leveduras de C albicans (CR15) por 3 minutos a 37ºC A eficiência fagocítica foi de 68% de macrófagos fagocitantes na presença de soro, cuja atividade fungicida reduziu 76% do inóculo de C albicans Esta ativação dos fagócitos pode ser explicada pelo aumento significativo na produção de anion superóxido comparado ao de fagócitos de animais controle (PBS) A atividade dos receptores foi pesquisada na presença de Manose (5 mM) e Manana (1mg) ou Laminarina (1mg) A eficiência da fagocitose aumentou significativamente (52%) nos macrófagos de camundongos pré-tratados com JE 72 h antes dos ensaios, contra 2% dos macrófagos controle Este aumento foi reduzido a 34% na presença de bloqueadores do receptor de manose (Manose mais Manana) e para 16% na presença de glucana solúvel (laminarina), um inibidor do receptor Dectina-1 Os macrófagos pré-tratados com JE 72h apresentaram aumento na produção de TNF-a após serem co-incubados com C albicans, por 2h, ação que foi inibida com a presença de laminarina durante os ensaios Neste trabalho, avaliamos também a ação do EJ na proteção contra candidíase, assim, animais pré-tratados 72h com o extrato, apresentaram aumento na produção de TNF-a após 2h de infecção com C albicans e uma redução na concentração do fungo no exsudato peritoneal, fígado, baço e rim durante este tempo Estes resultados sugerem que EJ aumentou significativamente os níveis de TNF-a, a atividade dos receptores de Manose, Dectina-1 e de Complemento, sendo estes processos relacionados com maior atividade fagocítica e candidacida, o que possibilitou 9% dos animais tratados com extrato sobreviverem a um inóculo letal de C albicans versus 2% do controle