CCB - CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

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Análise das três dimensões básicas no nicho (alimento, espaço e tempo) de Cebus nigritus (Goldfuss, 1809) (Primates, Cebidae) em um fragmento florestal de Londrina, Paraná
(2003-06-26) Silveira, Guilherme; Reis, Nelio Roberto dos; Pedro, Wagner André; Macieira, Oilton José Dias
Nicho é um assunto de grande importância dentro da ecologia e definido como a soma das adaptações dos organismos. O objetivo desse trabalho é fornecer dados sobre as três dimensões básicas do nicho (alimento, local e tempo) de Cebus nigritus. Estes foram estudados em um fragmento florestal urbano de 10 ha e arredores em Londrina, Paraná. A área está situada no Campus Universitário da Universidade Estadual de Londrina (23º23’30”S; 51º11’05”O), constituída por um fragmento florestal de Floresta Estacional Semidecidual em diversas fases de recuperação de distúrbios antrópicos, com presença de diversas espécies exóticas em seu interior e ao redor, principalmente culturas agrícolas, por estar situada em uma área de Fazenda Experimental. A área apresenta somente um grupo de macacos-prego composto, no início da pesquisa, por 16 indivíduos, e com 18 indivíduos na fase final (dezembro de 2002). A técnica utilizada para a coleta de dados foi a varredura instantânea, durante 3 minutos, com intervalos de 10, sendo os registros feitos a partir do clarear do dia até o escurecer. A alimentação esteve representada por 81 itens diferentes, sendo mais consumidos os das famílias Rutaceae, Lauraceae, Musaceae, Leguminosae e Néctar, somando 50%. Itens das famílias Rutaceae, Leguminosae, Musaceae e Ovos de galinha foram fornecidos em grande quantidade por funcionários da Fazenda. Os animais foram encontrados na maior parte do tempo no interior do fragmento florestal (59%), seguido pela borda (28%) e fora (13%), mas a alimentação foi obtida em sua maioria no exterior (55%), por ser abundante, de fácil acesso e alto retorno energético. O uso do tempo foi alocado principalmente na atividade de forrageamento em busca de itens animais (40%), seguido por deslocamento e alimentação em itens vegetais, com cerca de 20% cada, e descanso (14%). Tais dados refletem que a permanência de Cebus nigritus só é viável na área, considerada pequena para a espécie, devido à alimentação adquirida externamente ao fragmento, tanto as fornecidas quanto as obtidas por conta própria, e a grande parte do tempo utilizado em forrageamento de itens animais demonstra a importância destes na dieta para suprimento protéico. O fragmento tem como principal função aos animais a proteção e em seguida a obtenção de alimento.
Avaliação do potencial de agentes biológicos e seus produtos no controle da cancro cítrico causado por Xanthomonas axonopodis pv. citri
(2006-02-06) Camargo, Flávia Regina Spago; Andrade Filho, Galdino; Mello, João Carlos Palazzo de; Homechin, Martin
O Cancro cítrico asiático, causado por Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) (Hasse), é uma doença mundialmente conhecida na maioria das áreas de produção comercial de citrus. Estratégias limitadas existem para o controle do cancro cítrico nos cultivares mais susceptíveis. A aplicação de microrganismos como agentes para controlar a doença é um grande progresso ecológico para solucionar o problema. Os experimentos foram conduzidos em casa de vegetação e bactérias antagonistas (EC, FRC, LV e LN) e seus produtos (suspensões bacterianas, sobrenadantes livre-de-células e a fração acetato de etila obtida pelo tratamento do sobrenadante de LN com solventes orgânicos) foram testados para o controle da população de Xac, da incidência e severidade do cancro cítrico.em folhas de laranja(Citrus sinensis cv. Valencia). Os produtos bacterianos foram pulverizados nas folhas ou deixados em contato direto com as mesmas antes (pré) ou após (pós) a inoculação de Xac. Os resultados mostraram uma redução na população de Xac quando a suspensão bacteriana da cepa EC foi aplicada. Em outro experimento todas as cepas reduziram o número de lesões e a área de lesão quando as folhas foram tratadas com o sobrenadante livre-de-células, também foi observado o mesmo efeito quando as folhas foram tratadas com a fração de acetato de etila da cepa LN. Todos os efeitos inibitórios foram observados quando as folhas foram tratadas com os produtos bacterianos após a inoculação de Xac. Esses resultados mostram que bactérias antagonistas e seus produtos podem ser usados no controle do cancro cítrico.
Estudos citogenéticos em diferentes populações de Hoplias malabaricus (Characiformes, Erythrinidae)
(2006-02-22) Rosa, Renata da; Caetano, Lucia Giuliano; Bertollo, Luiz Antônio Carlos; Dias, Ana Lucia
As traíras, Hoplias malabaricus, apresentam uma grande distribuição pela América do Sul, sendo a espécie tipo da região de Suriname. Dentre os representantes da família Erythrinidae, são os que possuem maior número de estudos citogenéticos, revelando uma grande variação cariotípica, com sete citótipos descritos até o momento, e diferentes tipos de sistemas sexuais. Essas variações ocorrem entre animais de bacias hidrográficas diferentes e também em simpatria. No presente trabalho foram analisados citogeneticamente e morfometricamente seis população de H. malabaricus pertencentes à região média do rio Paranapanema: a) bacia do rio Claro , UNOPAR – Tamarana/PR; b) EPUEL – Estação de piscicultura da UEL – Londrina/PR; c) rio Vermelho – Bela Vista do Paraíso/PR; d) Rancho Alegre/PR; e) Ribeirão Três Bocas – Londrina/PR; f) rio Paranapanema – Iepê/SP. Na população da UNOPAR foram contrados dois citótipos em simpatria, com 2n = 40 cromossomos e 2n = 42 cromossomos. Dois indivíduos não apresentaram definição quanto ao número diplóide, sendo observado 38,24% das células com 41 cromossomos, e 41,12% das células com 42 cromossomos, caracterizando um mosaico cromossômico. A população da EPUEL apresentou 2n = 42 cromossomos M/SM para machos e fêmeas com sistema sexual simples do tipo XX/XY. As populações do sítio rio Vermelho, Rancho Alegre, ribeirão Três Bocas e rio Paranapanema, apresentaram 2n = 39 cromossomos para os machos e 2n = 40 cromossomos para fêmeas, demonstrando um sistema sexual múltiplo do tipo X1X1X2X2/X1X2Y. A impregnação por nitrato de prata evidenciou RONs múltiplas, variando de 3 até 9 cromossomos marcados. Todas as populações apresentaram uma distribuição semelhante da heterocromatina, principalmente na região centromérica da maioria dos cromossomos e telomérica em alguns. No sexto par cromossômico, um bloco corado que se inicia na região pericentromérica foi observado. Nas populações que apresentaram cromossomos sexuais múltiplos, esse cromossomo corresponde ao X1. Nos machos do rio Vermelho, Rancho Alegre, ribeirão Três Bocas e Paranapanema, o cromossomo Y apresentou diferenças na quantidade e localização dos blocos heterocromáticos. A coloração das bandas-C com fluorocromo GC-específico evidenciou dois cromossomos com marcação próxima ao centrômero, em todas as populações, provavelmente o sexto par. As bandas centroméricas foram evidenciadas com fluorocromo AT-específico. A coloração com fluorocromo GC-específico evidenciou diferentes marcações entre as populações. A análise das variáveis canônicas dos dados morfométricos evidenciou a formação de grupos distintos. Os valores apresentaram 79, 38% de proximidade ao eixo canônico 1, separando três grupos: (1) Ribeirão Três Bocas de (2) Rancho Alegre + Sítio Água da Mina + UNOPAR; e (3) EPUEL + rio Paranapanema. As medidas mais contrastantes foram o comprimento do osso maxilar (COM) e a distância prédorsal (DPD). Através das proporções corporais pode-se observar que os exemplares estudados diferem do exemplar da localidade tipo. Provavelmente, a morfologia deve ser influenciada pelo ambiente, como a presença ou não de corredeiras, forma do substrato, entre outros fatores, desta forma o padrão genético não será o único fator a influenciar na forma desta espécie. Os resultados obtidos tanto citogenéticos quanto morfológicos nos levam a sugerir a existência de espécies distintas no grupo Hoplias malabaricus do médio Paranapanema.
Estudos citogenéticos de Loricariidae (Siluriforme) do planalto da Bodoquena - Mato Grosso do sul
(2006-08-09) Cereali, Sandra dos Santos; Giuliano-Caetano, Lucia; Dias, Ana Lucia; Santos, Isabel Cristina Martins
O gênero Hypostomus Lacépède, 1803, é composto por peixes de pequeno a grande porte conhecidos popularmente como cascudos. Possui aproximadamente 110 espécies e é considerado como um dos grupos de peixes neotropicais mais diversificados. Foram analisados exemplares de Hypostomus cochliodon e Hypostomus sp. 3-corrego Salobrinha NUP 4247, coletados no rio Salobra e no córrego Salobrinha e de Hypostomus sp. 2-rio Perdido UP 4249, coletados no rio Perdido, Planalto da Bodoquena – MS, Brasil. Existem registros de pelo menos 13 espécies de Loricariidae no Planalto da Bodoquena. Embora a ictiofauna seja peculiar, com muitas espécies endêmicas, não há registros de dados citogenéticos para peixes da região. Em Hypostomus cochliodon o cariótipo de todas as fêmeas apresentou número diplóide de 64 cromossomos, 16m+19sm+29st-a, com Número Fundamental (NF) igual a 99, entretanto, o único macho analisado, apresentou 2n=64, 16m+20sm+28st-a, com NF=100. Um par de acrocêntricos possui heteromorfismo de tamanho no macho, mas não nas fêmeas, o que sugere um possível sistema de cromossomos sexuais simples do tipo XX/XY. Todas as fêmeas possuíam um único cromossomo na posição 15 e também um cromossomo acrocêntrico a mais, na posição 22. O padrão de distribuição de heterocromatina detectado por banda C é diferente entre macho e fêmeas. Os acrocêntricos envolvidos no heteromorfismo de tamanho apresentam um bloco bem evidente de heterocromatina na região terminal do braço longo, em ambos os sexos. Nas fêmeas, o acrocêntrico 22 também apresenta um bloco de heterocromatina. A coloração com CMA3 apresentou o padrão de distribuição coincidente com o da banda C, sendo a heterocromatina constituída de regiões GC-ricas. A análise de mais exemplares machos pode confirmar essa hipótese ou mesmo apontar para um polimorfismo de heterocromatina. Hypostomus sp. 3- córrego Salobrinha apresentou dois números modais distintos 2n = 82, 6m + 14sm + 62st-a, NF = 102; 2n = 84, 6m + 14sm + 64st-a, NF = 104. Esse polimorfismo deve-se a presença de dois cromossomos extras não heterocromáticos. Não foi possível definir o número diplóide em quatro exemplares, sendo as linhagens celulares compostas de 2n=83 e 2n=84 cromossomos em um indivíduo, e 2n=82, 2n=83 e 2n=84 cromossomos nos outros. Estes resultados caracterizam a existência de um mosaico genético devido à ocorrência de um a dois cromossomos extras em Hypostomus sp. 3-córrego Salobrinha NUP 4247. Hypostomus sp. 2- rio Perdido NUP 4249 apresentou número diplóide 2n=84, com cariótipo formado por 6m+16sm+62st-a e NF=106. Tanto em Hypostomus sp. 3-córrego Salobrinha NUP 4247 quanto em Hypostomus sp. 2-rio Perdido o bandamento C evidencia um padrão de distribuição da heterocromatina caracterizado pela presença de poucas bandas na região pericentromérica, além da presença de um bloco bem evidente em posição terminal de braços longos de alguns cromossomos acrocêntricos pequenos. As marcações com CMA3 coincidem com o bandamento C nas duas espécies acima citadas. O maior número diplóide descrito, até agora, para o gênero era 2n = 80 cromossomos em Hypostomus sp. E, porém Hypostomus sp. 3- córrego Salobrinha NUP 4247 apresentou 2n = 82 e Hypostomus sp. 2-rio Perdido NUP 4249 2n = 84 cromossomos aumentando a amplitude de variação para este gênero. H. cochliodon e Hypostomus sp. 3-córrego Salobrinha apresentaram vários cromossomos marcados com AgNO3, porém apenas um par de cromossomos exibiram sítios marcados após a hibridação fluorescente in situ (FISH) com sonda de DNAr 18s. Hypostomus sp. 2-rio Perdido NUP 4249 apresentou apenas um par de cromossomos marcados por AgNO3, evidenciando um heteromorfismo de tamanho de RON. A hibridação com a mesma sonda, também revelou apenas um par portador de sítios de rDNA. Nas três espécies as bandas fluorescentes após a coloração com CMA3 apresentam padrão semelhante ao FISH. Os dados citogenéticos caracterizam bem cada espécie estudada, tanto quanto a macroestrutura quanto na microestrutura cariotípica.
Parâmetros genéticos em variedades de milho crioulo e sua utilização na seleção
(2007-01-26) Barros, Luciane Bertoletti; Ferreira, Josué Maldonado; Miranda Filho, José Branco de; Fonseca Junior, Nelson da Silva
As variedades crioulas foram produzidas, mantidas, desenvolvidas ou adaptadas por agricultores familiares ou indígenas, sendo principalmente utilizadas por estes agricultores ao longo das gerações. Trabalhos envolvendo ensaios de competição apresentam o potencial produtivo de variedades de milho crioulo com ou sem utilização de insumos externos, citando-as como fontes de adaptação, tolerância e resistência aos fatores bióticos e abióticos. Apesar destas afirmações, existem reduzidos estudos genéticos quantitativos para confirmar este potencial e obter estimativas de parâmetros para nortear o melhoramento destas variedades. Desta forma, os objetivos foram estimar parâmetros genéticos em progênies de meios irmãos em diferentes ciclos de seleção recorrente, em condições de sistema de agricultura familiar; verificar as previsões de ganhos de seleção no Programa de Melhoramento Genético Participativo; estimar os coeficientes de correlações genéticas em milho crioulo; comparar as estimativas genéticas obtidas, em condições de agricultura familiar, com as encontradas por outros autores em diferentes tipos de milho cultivados sob outros sistemas de produção. Foram avaliadas progênies de meios irmãos de seis variedades crioulas (Caiano, Carioca, Cinquentinha, Macaco, Maizena e Palha Roxa), em dois a três ciclos seleção recorrente, d O número de progênies de meio-irmãos variaram de 400 a 294 e foram avaliadas em látice triplos 10x10 e 7x7, respectivamente, com parcelas simples de 4 m de comprimento no espaçamento 0,20 m x 1,00 m. Foram realizadas análises agrupadas de variância e de correlações para estimar os parâmetros genéticos dos caracteres produtividade e outros de importância agronômica. Os resultados obtidos permitem inferir que as variedades crioulas apresentam potencial e suficiente variabilidade genética para os caracteres estudados, permitindo ganhos com a seleção recorrente de meio-irmãos, em propriedades de agricultura familiar, com o Programa de Melhoramento Genético Participativo. A seleção em milho crioulo visando aumentar a produtividade está relacionada à seleção de plantas mais prolíficas, menor porcentagem de espigas danificadas, maior relação peso de grãos por espiga e maior precocidade. Existe uma associação positiva entre plantas mais altas e mais tardias, mas com magnitude que possibilitam a seleção para plantas mais produtivas com menor altura de plantas e maior precocidade. Com exceção do caractere florescimento médio, as correlações observadas para milho crioulo, em sistemas de agricultura familiar, são compatíveis com a da literatura.
Citogenética em espécies de cestrum (Solanaceae): mapeamento físico e proteínas cromossômicas
(2007-02-28) Fernandes, Thiago; Vanzela, André Luis Laforga; Morales, Maria Ap. Marin; Giuliano-Caetano, Lúcia
Os representantes do gênero Cestrum são, em sua maioria, arbustos e pequenas árvores distribuídos nas regiões tropical e subtropical das Américas. Nesse trabalho, estudamos três espécies coletadas no Brasil (C. capsulare, C. corymbosum e C. megalophylum) e uma na Argentina (C. laevigatum) utilizando as seguintes ferramentas citogenéticas: i) coloração convencional, ii) bandamento C-CMA3/DAPI e iii) hibridação in situ com as sondas de DNAr 45S e 5S. As quatro espécies apresentaram cariótipos com 2n = 2x = 16 e uma predominância de cromossomos metacêntricos e submetacêntricos, exceto pelo menor par sempre acrocêntrico. Nossos resultados reforçam a idéia desse perfil cariotípico ser uma característica preservada dentro do gênero. O bandamento cromossômico e a hibridação in situ fluorescente (FISH) mostraram que a maioria dos segmentos de DNAs repetitivos parece seguir um modelo de dispersão eqüilocal/eqüidistante. Isso foi evidenciado principalmente para os blocos C-CMA3 + e para os cistrons de DNAr 45S que apareceram preferencialmente nas regiões terminais dos cromossomos, os blocos C-DAPI0/CMA3 0 e dots C-DAPI+ em regiões intercalares/subterminais e sítios para DNAr 5S sempre na região pericentromérica dos cromossomos. As diferenças encontradas no padrão de bandas entre as espécies aqui estudadas e as outras nove reportadas na literatura sugerem que os segmentos heterocromáticos encontrados em Cestrum apresentam uma dispersão por amplificação/contaminação eqüilocal entre heterólogos ou têm origem a partir de sítios iniciais de amplificação, ou seja, por amplificação não eqüilocal. Alem do mais, o mapeamento físico dos diferentes segmentos heterocromáticos, aliado a outros mapas físicos realizados para Cestrum, sugere que as diferenças cariotípicas dentro do gênero ocorreram por mudanças nos diferentes classes de DNAs repetitivos, sem alterações significativas na composição geral dos cariótipos (tamanho e forma). Além do mapeamento físico, outro ponto estudado nesse trabalho foi o comportamento meiótico dos cromossomos Bs encontrados em alguns indivíduos de Cestrum strigilatum por coloração convencional e imunodetecção com anticorpos anti-H3 fosforilada. Esses cromossomos parecem ser eliminados durante a microsporogênese dessa espécie, principalmente durante a transição da meiose I para meiose II, ou, durante a formação da tétrade. O motivo de tal comportamento não pôde ser explicado totalmente através do padrão de fosforilação das histonas H3, contudo, evidenciou que tanto os Bs quanto os cromossomos do complemento A possuem um comportamento diferencial dos citados na literatura. Nossos dados reforçam as suposições sobre um possível papel secundário dessas proteínas nas divisões celulares, atuando provavelmente como sinalizadores para a cinética dos cromossomos. Em um estudo complementar, nós verificamos que a presença dos Bs não interfere na viabilidade dos grãos de pólen quando comparados indivíduos portadores e não portadores de Bs.
Investigação da citotoxicidade, indução de apoptose, efeitos genotóxicos e protetores do flavonóide rutina em células hepáticas HTC
(2009-02-17) Marcarini, Juliana Cristina; Mantovani, Mário Sérgio; Maistro, Edson Luis; Dias, Ana Lúcia
A rutina é um flavonóide que apresenta grande importância terapêutica, pois possui algumas atividades biológicas como: antioxidante, vasodilatadora e estimulante do sistema imunológico. Considerando que há poucos e controversos relatos na literatura sobre a toxicidade da rutina e o seu efeito protetor, o presente trabalho investigou os efeitos citotóxicos, genotóxicos e protetores da rutina em células hepáticas (HTC – hepatoma de Rattus novervigus). No ensaio de citotoxicidade - MTT nenhuma concentração da rutina (10µM a 810µM) apresentou efeito citotóxico após 24 e 48h de tratamento, porém com 72h de tratamento houve citotoxicidade da maior concentração. Os ensaios de Viabilidade Celular e de Cinética de Proliferação também demonstraram que somente a maior concentração (810µM) diminuiu a viabilidade ou interferiu na curva de crescimento após 72h de tratamento. Na avaliação da indução de apoptose insitu, nenhuma concentração de rutina após 24 horas de tratamento induziu a apoptose. Os resultados obtidos no Ensaio do Cometa (SCGE) mostraram que somente a maior concentração de rutina (810µM) após 24 horas de tratamento induziu danos no DNA,contudo, no Ensaio do Micronúcleo com Bloqueio de Citocinese (MNCtB) não foi observado efeito genotóxico. Na avaliação do efeito protetor, sobre o agente pró carcinogênicobenzo[a]pireno em MNCtB, as três maiores concentrações (90, 270 e810µM) reduziram danos significativamente (redução de danos de 36,7%, 51,4% e54,4%, respectivamente). Apesar do efeito genotóxico evidenciado no Ensaio do Cometa para a rutina, esse dano não foi fixado como observado no Ensaio MNCtB, sugerindo que o sistema de reparo atua eficientemente nos danos produzidos pela alta concentração de rutina (810µM). Além disso, os dados de efeito protetor da rutina, frente a um pró-carcinógeno bastante comum, sugerem uma atividade biológica importante que pode contribuir para a saúde humana.
Caracterização e dinâmica trófica em um riacho íntegro de Mata Atlântica do Sul do Brasil
(2009-02-25) Bernardino, Débora Fernandes Silva; Bennemann, Sirlei Terezinha; Hahn, Norma Segatti; Shibatta, Oscar Akio
Esta pesquisa foi desenvolvida no ribeirão Varanal, ambiente íntegro, afluente do rio Tibagi, em Telêmaco Borba, PR. A fim de se conhecer a dinâmica trófica deste ecossistema, os objetivos do trabalho foram: descrever alguns atributos físicos que caracterizam um riacho em condições naturais, verificar os itens alimentares consumidos pelas espécies de peixes e correlacioná-los com a disponibilidade no ambiente, analisar se há variação sazonal na utilização dos alimentos por Trichomycterus sp. e estabelecer uma teia trófica para o trecho médio do ribeirão Varanal. Foram realizadas quatro coletas sazonais em três trechos denominados nascente, médio e foz, durante o ano de 2005. Foram coletados 319 exemplares correspondendo a 12 espécies de peixes e Trichomycterus sp.. Como resultados, foram identificados 43 itens alimentares nos tratos digestórios dos exemplares analisados. Os itens de origem animal, especialmente insetos aquáticos, apresentaram maior ocorrência e dominância. Com relação aos insetos, foram coletadas oito ordens incluídas em 46 famílias. Os crustáceos também foram capturados e apresentaram maior abundância no trecho médio do riacho. O confronto entre os dados obtidos sobre a disponibilidade de itens alimentares no ambiente e a dieta das espécies de peixes demonstrou que a análise do conteúdo gástrico da icitiofauna é, por vezes, mais eficaz para amostrar o ambiente do que apenas a coleta dos invertebrados, podendo ser utilizada como ferramenta adicional para estimar a diversidade bentônica no ambiente. A teia alimentar no trecho médio do ribeirão Varanal caracterizou-se como detritívora, em função de sua dependência do material alóctone proveniente da vegetação marginal e que sustenta grande parte da fauna do riacho, consistindo na base da teia alimentar estabelecida.
Ocorrência e diversidade de fatores de virulência em isolados brasileiros de Bacillus cereus provenientes de alimentos e do solo
(2009-03-02) Santos, Clelton Aparecido dos; Arantes, Olivia Marcia Nagy; Sena, Janete Apparecida Desidério; Sofia, Silvia Helena
Linhagens de B. cereus são isoladas de uma variedade de ambientes, incluindo alimentos e solo, e muitas linhagens causam dois tipos de intoxicação alimentar: vômito e diarreia. Diversos fatores de virulência, incluindo atividade hemolítica, produção de enterotoxina e lecitinase e motilidade, foram pesquisados em isolados brasileiros de B. cereus provenientes de amostras de alimentos contaminados, alimentos e solo. Em acréscimo, foi avaliada também a ocorrência e a diversidade genética dos genes ces, plcR-papR, nheA, bceT, gyrB, cytK-2 e plcA por RE-PCR (Restriction Endonuclease–PCR). Os fatores de virulência apresentaram distribuição variável nos três grupos de isolados e os genes plcR-papR apresentaram a maior diversidade genética entre os três grupos. A análise de variância molecular (AMOVA) considerando todos os locos analisados evidenciou que a porcentagem de variação genética dentro de cada grupo de isolados foi significativamente maior (92,22%), que entre os grupos (7,78%). Os resultados obtidos demonstram que o conjunto gênico de B. cereus é a principal característica que permite a distribuição cosmopolita desta bactéria. Por outro lado, a expressão dos genes codificantes para os fatores de virulência é um fator determinante mais do comportamento que da presença desta bactéria no ambiente.
Avaliação da neoglicogênese hepática e das citocinas circulantes na caquexia induzida por tumor Walker-256
(2010-02-25) Moreira, Carolina Campos Lima; Souza, Helenir Medri de; Batista, Márcia Regina; Zaia, Cássia Thaïs Bussamra Vieira
A caquexia neoplásica é caracterizada por um conjunto de desvios metabólicos provocados por diversos fatores denominados mediadores da caquexia. Poucos estudos têm investigado as alterações metabólicas hepáticas na caquexia associada ao câncer, não havendo consenso se a neoglicogênese está aumentada ou diminuída nesta patologia. Além disso, não há estudos sobre as concentrações circulantes de citocinas durante o processo de desenvolvimento do tumor Walker-256. O objetivo deste estudo foi avaliar a neoglicogênese hepática e parâmetros metabólicos relacionados, bem como as concentrações séricas de citocinas, em ratos portadores de caquexia induzida por tumor Walker-256, em diferentes estágios do desenvolvimento tumoral. Para a implantação do tumor, 8x107 células Walker-256 (grupo WK) foram inoculadas subcutaneamente no flanco direito traseiro de ratos machos Wistar (220-230 g). Animais controles foram inoculados com PBS (salina tamponada com fosfato) no mesmo local. A neoglicogênese hepática e os parâmetros metabólicos relacionados foram avaliados em estudos de perfusão de fígado in situ, a partir dos precursores alanina, piruvato, lactato ou glicerol, no 5º (WK 5º) e 8º (WK 8º) dia após a inoculação das células tumorais. As citocinas séricas, fator de necrose tumoral a (TNFa) e as interleucinas 1ß (IL-1ß) e 6 (IL-6), foram avaliadas no 2º, 5º, 8º, 11º e 14º dia de desenvolvimento tumoral. Os resultados demonstraram redução (p<0,05) da produção hepática de glicose e do consumo de oxigênio a partir da alanina 2,5 mM nos grupos WK 5º e WK 8º. Nestes estudos de perfusão com alanina, houve aumento (p<0,05) da produção hepática de piruvato e lactato e tendência de aumento na produção hepática de uréia no grupo WK 5º, enquanto no grupo WK 8º houve tendência de redução na produção hepática de piruvato, lactato e uréia. A produção hepática de glicose e o consumo de oxigênio a partir do piruvato 5 mM ou lactato 2 mM foram também reduzidos (p<0,05) nos animais portadores de tumor (WK 5º e WK 8º), exceto para o grupo WK 5º que apresentou apenas tendência de redução no consumo de oxigênio a partir do piruvato. Entretanto, a produção de glicose e o consumo de oxigênio a partir do lactato 5,5 mM (grupo WK 8º) ou a partir do glicerol 2 mM (grupos WK 5º e WK 8º) não foram reduzidos nos animais portadores de tumor. As concentrações séricas de TNFa, IL-1ß e IL-6 foram indetectáveis nos ratos portadores de tumor (grupos WK 2º, WK 5º, WK 8º, WK 11º e WK 14º). Os resultados permitiram concluir que houve inibição da neoglicogênese hepática a partir dos precursores alanina, piruvato e lactato, mas não a partir do glicerol, no 5º e 8º dia de desenvolvimento tumoral. Estes achados, juntamente com os de produção hepática de lactato, piruvato e uréia a partir da alanina, permitem sugerir que houve inibição de enzimas regulatórias da neoglicogênese, como a piruvato carboxilase e/ou PEPCK (fosfoenolpiruvato carboxiquinase) e tendência de inibição da alanina aminotransferase (WK 8º), mas não houve inibição de enzimas que catalisam reações posteriores à entrada do glicerol (frutose 1,6-bifosfatase e glicose 6-fosfatase), nos ratos portadores de tumor. É possível que o TNFa, a IL-1ß e a IL-6, produzidos localmente no fígado e em outros tecidos, estejam atuando como mediadores autócrinos/parácrinos e inibindo a expressão e/ou atividade destas enzimas regulatórias da neoglicogênese. Os dados também indicam, como demonstrado pela inibição da produção hepática de glicose a partir do lactato 2 mM, mas não a partir do lactato 5,5 mM, que houve alteração da concentração saturante de lactato, nos fígados dos animais portadores de tumor. Assim, é possível que a produção hepática de glicose a partir de maiores concentrações circulantes de lactato, como as observadas nos ratos portadores de tumor, contribua para o impedimento de hipoglicemia acentuada e, portanto para o prolongamento da vida no estado portador de tumor
Riacho de montanha, Mata Atlântica, Paraná, Brasil: caracterização e estrutura trófica
(2010-03-01) Raio, Cibele Bender; Bennemann, Sirlei Terezinha; Shibatta, Oscar Akio; Benine, Ricardo Cardoso
Um riacho modificado (João Pinheiro – JP) foi comparado com um riacho referência (Ribeirão Varanal - RV) com o objetivo de responder a seguinte questão: quais as alterações nos atributos físicos e biológicos que as atividades humanas provocam num riacho de montanha? Os trechos do riacho modificado foram caracterizados através da comparação da qualidade ambiental com resultados publicados para trechos equivalentes do riacho referência. Foi aplicado um protocolo de avaliação rápida, analisadas as características físicas do riacho, calculados valores para a diversidade, riqueza e verificada a distribuição dos peixes, insetos e crustáceos. Além disso, o índice EPT (Ephemeroptera + Plecoptera + Trichoptera/Chironomidae) foi calculado para cada trecho amostrado e definida a estrutura trófica das espécies de peixes. No riacho JP foram encontrados menores valores de pH e maiores valores de temperatura da água e do ar em relação ao riacho referência, o que mostra uma influência da condição da mata sobre o ambiente aquático. A foz do riacho foi considerado o trecho de mais baixa qualidade ambiental e de menor heterogeneidade de habitats. Os resultados encontrados para a riqueza e diversidade dos táxons não diferiram significativamente e a similaridade entre os grupos peixes, insetos e crustáceos dos dois riachos foi alta (>50%). Por outro lado, a partir da relação entre organismos bioindicadores, encontrou-se um maior valor de abundância de organismos tolerantes às ações antrópicas e menor abundância de organismos mais sensíveis. Diferentemente do riacho referência, não foi encontrado um aumento gradual no sentido montante-jusante da disponibilidade de itens que compõem a dieta dos peixes. Nos trechos a jusante deste riacho foi encontrada uma maior abundância de espécies de peixes perifitívoras e onívoras, a quantidade de espécies e número de indivíduos de peixes invertívoros foi menor na foz do riacho JP, o que foi associado à menor heterogeneidade do ambiente, piores condições da vegetação ripária e menor disponibilidade de itens alimentares. A partir desses resultados, recomendou-se que, em estudos de avaliação da qualidade ambiental, utilizem-se metodologias que comparem os atributos físicos, diversidade dos táxons bioindicadores, por exemplo, a aplicação do índice EPT e que a estrutura trófica dos peixes seja definida. Neste estudo foi verificado que as atividades antrópicas nos riachos de montanha da Mata Atlântica provocam a diminuição da heterogeneidade dos habitat, diminuem a proporção entre espécies indicadoras da boa qualidade ambiental em relação às espécies tolerantes e influenciam a composição de espécies de peixes relacionada à disponibilidade de itens alimentares. Estes resultados estão apresentados em dois capítulos na forma de artigos, que serão submetidos à revista Neotropical Icthyology.
Efeitos do tratamento com NaCl na osmorregulação e resposta de estresse do peixe Prochilodus lineatus
(2011-02-23) Sabino, Thiago Santos; Martinez, Cláudia Bueno dos Reis; Martinez, Cláudia Bueno dos Reis
O cloreto de sódio (NaCl) é amplamente utilizado como atenuante do efeito estressor do manejo e transporte de peixes de água doce e também como tratamento profilático no combate a ectoparasitos. Entretanto, pouco se sabe sobre os efeitos do sal na osmorregulação resposta de estresse destes peixes. Assim, o objetivo deste estudo foi verificar se o NaCl interfere na osmorregulação de Prochilodus lineatus e se atua como atenuante do efeito estressor. Os experimentos foram divididos em duas etapas: experimento de exposição ao NaCl e experimento de estresse agudo. Para os experimentos de exposição ao NaCl, juvenis de P. lineatus foram expostos à água, contendo 1, 5 ou 10 g.L-1 de NaCl, ou apenas à água desclorada. Após 6 ou 24h, os peixes foram anestesiados para a coleta de sangue e mortos para a retirada das brânquias e rim. As atividades das enzimas Na+/K+-ATPase de brânquias e rim e da anidrase carbônica branquial foram avaliadas. Do sangue total foram analisados o número de eritrócitos, hematócrito e conteúdo de hemoglobina, e do plasma foram analisadas as concentrações de iônicas de sódio, potássio, cloreto, glicose e a osmolaridade. Para o experimento de estresse agudo, animais previamente expostos a 5 g.L-1 de NaCl por 24 horas ou apenas à água desclorada foram submetidos ao estresse, por hipóxia e confinamento, com a utilização de uma pequena rede, através da qual ficaram suspensos fora da água por 3 minutos. Após o estresse os peixes foram divididos em 3 grupos distintos (t1, t3 e t6) e transferidos para aquários diferentes, contendo apenas água desclorada. Os peixes do grupo t1 foram amostrados 1 hora após o estresse, do grupo t3 foram amostrados 3 horas após o estresse e do grupo t6 foram amostrados 6 horas após o estresse. Um grupo de peixes, denominado de t0 foi amostrado imediatamente após o estresse. A amostragem consistiu em retirar o sangue para as análises hematológicas e de indicadores de estresse, no caso glicose e cortisol. Para o experimento de exposição ao NaCl não foram encontradas diferenças significativas entre os peixes expostos às diferentes concentrações de NaCl e os expostos somente a água desclorada em nenhum parâmetro iônico ou hematológico para ambos os tempos experimentais. A atividade da Na+/K+-ATPase branquial aumentou significativamente nos animais expostos à 10 g.L-1¬¬ de NaCl por 24h com relação aos demais. A atividade da anidrase carbônica diminuiu significativamente nos animais expostos a 1 e 5 g.L-1 de NaCl por 6 horas com relação aos demais, e aumentou significativamente nos peixes expostos a 10 g.L-1 por 24h com relação aos outros grupos. Os resultados dos experimentos de estresse agudo mostraram que o cortisol aumentou significativamente em t1 e t3 com relação aos demais tempos experimentais (t0 e t6) nos peixes estressados, com e sem exposição prévia ao NaCl. Ao comparar estes dois grupos, nos mesmos tempos experimentais, verificou-se que tanto o cortisol, como a glicemia, foram significativamente menores em t1 e t3 nos peixes previamente expostos ao NaCl. A glicose plasmática também aumentou significativamente em t1 e t3 com relação aos demais tempos experimentais nos peixes estressados, sem exposição prévia ao NaCl. Nos peixes previamente expostos ao sal a glicemia em t1 foi significativamente maior que t0 e t3. Esses resultados indicam que o NaCl não interfere nos parâmetros hematológicos e iônicos de P. lineatus em qualquer concentração testada, tanto em 6 quanto em 24h de exposição, indicando assim que o peixe mantém inalterado o equilíbrio hidro-eletrolítico. Porém, a exposição de 10 g.L-1 de NaCl, durante 24h, promove alterações na atividade das enzimas relacionadas a osmorregulação, podendo perturbar a homeostase do animal. Em exposições mais longas os resultados também mostraram que a exposição de P. lineatus a 5 g.L-1 de NaCl garante uma atenuação no efeito estressor sem prejudicar os processos de osmorregulação.
Citotoxicidade, cinética de proliferação, indução de apoptose e genotoxicidade do nicorandil e da N-(beta-hidroxietil) nicotinamida em cultura de células renais (786-O)
(2011-02-25) Paula, Natália Aparecida de; Mantovani, Mário Sérgio; Luiz, Rodrigo Cabral; Maistro, Edson Luis
O nicorandil, um doador de óxido nítrico (NO) e ativador de canal de potássio ATP sensível (KATP), utilizado no tratamento da angina, tem como molécula precursora a N-(beta-hidroxietil) nicotinamida, não liberadora de NO. O nicorandil influencia a proliferação celular excessiva na disfunção renal, e a apoptose no tecido cardíaco pós isquemia. Moléculas que apresentam caráter regulatório em processos de crescimento e morte celular são importantes na terapia de doenças com alteração nesses processos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a citotoxicidade do nicorandil e avaliar sua influência no crescimento celular, na apoptose e na indução de danos no DNA de células de carcinoma renal (786-O). Para verificar a influência do NO liberado foi também avaliada a N-(beta-hidroxietil) nicotinamida, cuja estrutura é diferenciada apenas pela ausência do radical NO2. No ensaio de citotoxicidade MTT, as moléculas apresentaram citotoxicidade a partir de 24h em concentrações diferentes, o nicorandil em 2000 µg/mL e a N-(beta-hidroxietil) nicotinamida em 3000 µg/mL. Nos demais ensaios nicorandil e a N-(beta-hidroxietil) nicotinamida foram testados nas concentrações de 20, 100 e 500 µg/mL e não apresentaram resultados diferentes entre si. Não foram genotóxicas no ensaio do cometa e não alteraram o crescimento celular. Na avaliação morfológica da apoptose não houve alteração, e a expressão dos genes da via apoptótica testados não foi alterada. Concluímos que o nicorandil é citotóxico apenas em altas concentrações, e não altera os outros processos testados nas células renais e a N-(beta-hidroxietil) nicotinamida concorda em todos os resultados com o nicorandil, exceto pela sua citotoxicidade ser menor, provavelmente pela ausência de NO.
Defesas antioxidates e alterações funcionais no curimba, Prochilodus lineatus, em resposta à exposição aguda ao cobre
(2011-03-29) Vicentini, Rafaela Araújo; Martinez, Cláudia Bueno dos Reis; Bianchini, Adalto; Luiz, Rodrigo Cabral
O cobre é um dos metais de maior interesse para o estudo dos efeitos prejudiciais da poluição sobre a fisiologia dos peixes. A presença do cobre na água doce pode ser decorrente de inserções naturais e/ou antrópicas. A fim de caracterizar os efeitos de uma exposição aguda a este metal, exemplares jovens de peixes da espécie Prochilodus lineatus (17,15 ± 1,06 cm; 11,82 ± 0,24 g; N=64) foram distribuídos em aquários de vidro de 80 L (n=8 peixes por aquário) e expostos, durante 48 h ou 96 h, apenas a água (grupo controle) ou a uma concentração nominal de cobre de 20 ?g.L-1(grupo experimental). As exposições foram realizadas em sistema estático e durante o experimento amostras de água dos aquários foram coletadas para a análise da concentração de cobre total e dissolvido. Durante o período experimental a concentração de cobre dissolvido variou de 12,6 µg.L-1 no tempo 0 a 8,65 µg.L-1 em 96h. As concentrações obtidas encontram-se dentro do limite estabelecido pela legislação brasileira, de 9 e 13 ?g. L-1 para as águas de Classe 1 e Classe 3 respectivamente. As análises de cobre tecidual mostraram que seu acúmulo foi tempo e tecido-específico. O tecido hepático foi o que apresentou maior acúmulo do metal, seguido dos tecidos renal, branquial e muscular; e nos tecidos renal, branquial e muscular houve aumento significativo no conteúdo de cobre após 96 h de exposição, em relação à exposição de 48 h. Pôde-se observar elevação significativa no conteúdo de metalotioneína nos animais expostos ao cobre durante 48 e 96 h, em relação aos peixes do grupo controle, em todos os tecidos analisados (fígado, brânquias e músculo). As alterações nos parâmetros de estresse oxidativo também se mostraram tecido-específicas. No fígado, após 48 h de exposição ao cobre, não foram verificadas alterações em nenhum dos parâmetros analisados, porém após 96 horas, as enzimas superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx) e glutationa S-transferase (GST) se mostraram inibidas, e também foi observada diminuição na concentração da glutationa reduzida (GSH). Todas essas alterações resultaram em peroxidação lipídica, conforme indicado pelo aumento significativo na concentração de MDA no fígado dos peixes após 96 h de exposição ao cobre. No tecido branquial as respostas ao cobre já foram verificadas a partir de 48 h de exposição, quando foram observados o aumento da atividade da SOD e do conteúdo de GSH e o decréscimo da atividade da GST. Após 96 h, foram observadas aumento na atividade das enzimas GPx e CAT, acompanhados de diminuição na concentração de GSH levando a danos oxidativos (aumento de TBARS). Os resultados do teste do cometa mostraram que a concentração de cobre testada, nos dois tempos de exposição, promoveu aumento significativo na ocorrência de danos no DNA nos eritrócitos de P. lineatus. As análises dos parâmetros de estresse, glicemia e cortisol, mostraram que o cobre causou diminuição significativa do cortisol plasmático após 96 h, mas não promoveu nenhuma alteração na glicêmica. Com relação às enzimas envolvidas na osmorregulação, verificou-se que a exposição ao cobre reduziu a atividade da Na+/K+ ATPase renal após os dois períodos experimentais e nas brânquias apenas após 96 horas. A atividade da anidrase carbônica branquial também foi reduzida após 96 h de exposição ao metal. Após 96 h de exposição ao cobre foi constatado aumento da concentração de K+ e a diminuição da concentração plasmática de Na+, acompanhada pela diminuição da osmolaridade. A análise dos parâmetros hematológicos nos peixes do grupo experimental indicou diminuição significativa do hematócrito com consequente aumento da concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) em 48 horas. Após 96 horas, os parâmetros hematológicos nos peixes do grupo experimental foram semelhantes aos observados no grupo controle. Assim, com este trabalho foi possível verificar que a concentração-limite de cobre estipulada pela legislação brasileira mostrou-se capaz de promover acúmulo tecidual de cobre, alterações no metabolismo oxidativo, danos no DNA e distúrbios osmo-iônicos em P. lineatus comprometendo significativamente a saúde dos animais.
Efeito da clorofilina na expressão de genes envolvidos na apoptose e ciclo celular em células de mama não tumorais (HB4a)
(2012-02-29) D’Epiro, Gláucia Fernanda Rocha; Mantovani, Mário Sérgio; Oliveira, Rodrigo Juliano; Boas, Gislayne Vilas
A molécula de clorofilina é muito estudada pela comunidade científica por apresentar, entre outras, propriedades quimiopreventiva, antimutagênica e anticarcinogênica. No entanto, os mecanismos moleculares de ação desse composto ainda não estão esclarecidos. Dessa maneira, o estudo de genes envolvidos na apoptose e no ciclo celular em células não tumorais tratadas com clorofilina pode fornecer informações importantes sobre os mecanismos que protegem ou desencadeiam toxicidade ás células, auxiliando na compreensão e no desenvolvimento de terapias. Neste contexto, nós avaliamos o potencial citotóxico da clorofilina e o seu efeito na expressão de genes envolvidos na apoptose (anti e pró-apoptóticos: BCL-2, BCL-XL, BAX E BAK; da família das Caspases: CASP3, CASP7, CASP 8 e CASP9) e de ciclo celular (BIRC5, TP53, APC, CiclinaA2 e ß-catenina) em cultura de células de mama não tumorais (HB4a). No ensaio de citotoxicidade a clorofilina apresentou potencial citotóxico em 48 e 72 h em todas as concentrações utilizadas (100, 200 e 400 µg/mL) quando comparadas ao controle. O estudo da expressão gênica foi realizado por meio do ensaio de qRT-PCR em tempo real. As células HB4a foram expostas à 100 e 200 ?g/mL de clorofilina nos tempos de 24, 48 e 72 h. A redução dos níveis de BIRC5, relacionado aos processos de apoptose e ciclo celular foi dose dependente, o gene foi menos expresso no tratamento com 200 µg/mL de clorofilina em 24, 48 e 72 h. O gene CCNA2 foi menos expresso com 24, 48 e 72 h de exposição à 200 µg/mL de clorofilina, e com 72 h de exposição à 100 µg/mL. Em relação aos genes pró-apoptóticos, foi observado aumento significativo na expressão de BAX em 24, 48 e 72 h de exposição à 200 µg/mL de clorofilina, e em 72 h de exposição à 100 µg/mL. Não houve alteração significativa de BAK quando comparado ao controle. Também foi observado aumento de expressão dos anti-apoptóticos BCL-2 e BCL-XL. O gene BCL-XL apresentou aumento de expressão nos três tempos testados com 200 µg/mL de clorofilina, e a exposição à 100 µg/mL levou ao aumento de expressão somente em 24 h. Já o gene BCL-2 obteve aumento de expressão apenas em 72 h com 200 µg/mL de clorofilina. Os demais genes analisados não apresentaram alteração significativa. A inibição da expressão dos genes envolvidos no ciclo celular sugere um efeito decorrente da citotoxicidade da clorofilina, bem como o aumento da expressão dos genes pró-apoptóticos, enquanto que o aumento da expressão dos genes anti-apoptóticos sugere inibição da apoptose como proteção da morte celular induzida pela clorofilina.
Periodicidade e formação de anéis de crescimento em espécies arbóreas em um fragmento de floresta estacional semidecidual no Sul do Brasil
(Universidade Estadual de Londrina, 2013-07-06) Yoshida, Thais Miti; Bianchini, Edmilson; Medri, Moacyr Eurípedes; Ribeiro, José Eduardo Lahoz da Silva; Botosso, Paulo César
Resumo: A sazonalidade climática proporcionada pela precipitação e temperatura exerce influência no crescimento das árvores e pode levar à formação de anéis anuais de crescimento. Neste estudo, as variações nas taxas de incremento em circunferência do tronco e sua relação com os fatores abióticos, a presença dos anéis de crescimento, bem como o caráter anual de sua formação, foram avaliados. O estudo foi conduzido no Parque Estadual Mata dos Godoy (centro de visitantes - 23°27’ S e 51°15´W), localizado no limite sul da zona tropical, no Estado do Paraná, Brasil. O clima é mesotérmico e, apesar de não possuir uma sazonalidade climática bem definida, é possível distinguir duas estações, uma quente e úmida (verão) e outra mais fria com menores índices de precipitação (inverno). A taxa de incremento em circunferência do tronco de Astronium graveolens Jacq., Balfourodendron riedelianum (Engl.) Engl., Campomanesia xanthocarpa (Mart.) O.Berg, Guarea kunthiana A.Juss., Heliocarpus americanus L., Holocalyx balansae Micheli, Lonchocarpus muehlbergianus Hassl., Miconia discolor DC., Nectandra megapotamica (Spreng.) Mez. e Tetrochidium rubrivenium Poepp. foi acompanhada durante dezessete meses por meio da implantação de faixas dendrométricas permanentes em cerca de 12 a 15 indivíduos por espécie. Para a verificação do caráter anual da formação dos anéis de crescimento, foram realizadas injúrias na zona cambial do tronco de cinco indivíduos de: A. graveolens, B. riedelianum, C. xanthocarpa, G. kunthiana, H. balansae, L. muehlbergianus, M. discolor e N. megapotamica. Destas, A. graveolens, B. riedelianum, M. discolor e N. megapotamica foram selecionadas para contagem e mensuração da largura dos anéis de crescimento. Para isso foram extraídas, com o auxílio do trado de incremento, duas a quatro amostras de lenho (séries temporais radiais) de cinco indivíduos de cada espécie. O incremento mensal do tronco foi correlacionado com temperatura média e precipitação total do mês corrente e de um e de dois meses anteriores por meio do coeficiente de correlação de Spearman. A mensuração das larguras dos anéis de crescimento foi realizada com o programa Image Pro Plus e as correlações entre as séries temporais selecionadas foram estabelecidas por meio do programa COFECHA. Em geral, tanto a precipitação quanto a temperatura influenciaram o crescimento, mas a precipitação correlacionou-se positivamente com o maior número de espécies. No entanto, a fenologia, a posição sociológica dos indivíduos e a tolerância ao sombreamento também podem exercer influência sobre as taxas de incremento em circunferência. As espécies apresentaram redução da taxa de incremento durante o inverno, especialmente em 2012, em razão das baixas taxas de precipitação dos meses de julho a setembro. A taxa de incremento em circunferência do tronco se correlacionou negativamente com a densidade do lenho. No que diz respeito às análises dendrocronológicas, apesar das baixas correlações obtidas entre as séries temporais analisadas, os resultados indicam que as espécies A. graveolens, B. riedelianum, M. discolor e N. megapotamica possuem potencial para estudos dendrocronológicos. A anuidade de formação dos anéis de crescimento foi confirmada para todas as espécies, exceto para A. graveolens, cujas amostras coletadas não apresentavam as cicatrizes cambiais. Abstract: The seasonal climate variation such as temperature and precipitation influences the tree growth and it can lead a formation of annual growth rings. In this study the variations of growth rate in girth trunk increment and its relationship with abiotic factors, the presence of growth rings as well as the character of their annual formation were analyzed. The study was carried out in Mata dos Godoy State Park (visitor center - 23°27 'S and 51°15' W), located on the southern edge of the tropical zone, Paraná State, Brazil. The climate is mesothermal and despite not having a well-defined climatic seasonality, it is possible to distinguish two seasons: a hot and humid (summer) and a cooler with less precipitation (winter). The growth rate in trunk circumference was accompanied for seventeen months through the implementation of permanent dendrometers in individuals of Astronium graveolens Jacq., Balfourodendron riedelianum (Engl.) Engl., Campomanesia xanthocarpa (Mart.) O.Berg, Guarea kunthiana A.Juss., Heliocarpus americanus L., Holocalyx balansae Micheli, Lonchocarpus muelbergianus Hassl., Miconia discolor DC., Nectandra megapotamica (Spreng.) Mez and Tetrorchidium rubrivenium Poepp. In order to verify the annual formation of the growth rings, cambium injuries were made in five individuals from the following species: A. graveolens, B. riedelianum, C. xanthocarpa, G. kunthiana, H. balansae, L. muehlbergianus, M. discolor and N. megapotamica. Among them, A. graveolens, B. riedelianum, M. discolor and N. megapotamica were selected for counting and measuring the width of growth rings. The two to four radii wood samples were extracted with increment borer from each individual sampled. The monthly trunk circumference increment was correlated with temperature and precipitation for the current month and for the one and the two months earlier by the Spearman correlation coefficient. The measurement of ring widths was performed with the Image-Pro program and the correspondence among the time series was established by COFECHA program through Pearson correlations. In general, both the precipitation as the temperature affect the growth, but the precipitation was positively correlated with the greatest number of species. However, the phenology, the individuals sociological position and the shade tolerance can also affect the growth rates in trunk circumference. The species showed a reduction of growth rates during the winter especially in 2012 due to low precipitation rates for the months from July to September. The growth rate in trunk circumference was negatively correlated with wood density. In despite of the low correlations between the analyzed temporal series, the results analyses indicated that the species A. graveolens, B. riedelianum, M. discolor and N. megapotamica present dendrochronological potential for studies. The annuity formation of growth rings was confirmed for all species, except for A. graveolens whose samples did not show the cambial marking.
Exposição aguda do teleósteo Prochilodus lineatus ao cádmio: bioacumulação, efeitos genotóxicos, bioquímicos, fisiológicos e comportamentais
(2013-09-02) Silva, Alexandre Oliveira Fernandes da; Martinez, Cláudia Bueno dos Reis; Souza, Helenir Medri de; Fernandes, Marisa Narciso; Souza, Marta Marques de; Moreira, Renata Guimarães
O cádmio (Cd) é um metal traço não essencial aos animais e muito tóxico aos peixes, é um contaminante frequentemente encontrado nas águas interiores devido a atividades antropogênicas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a bioacumulação e os efeitos do Cd para o peixe neotropical Prochilodus lineatus. Para tanto, peixes jovens foram expostos, durante 24 e 96 h, a duas concentrações de Cd, 1 e 10 µg.L-1, que correspondem às concentrações máximas de Cd permitidas pela legislação brasileira (CONAMA, Resolução 357/2005). Os efeitos do Cd foram avaliados por meio da análise dos íons e osmolalidade plasmática, da atividade de enzimas relacionadas à osmorregulação, das defesas antioxidantes, da ocorrência de estresse oxidativo e danos genotóxicos, do conteúdo de proteínas semelhantes a metalotioneínas (PSMT), da atividade da acetilcolinesterase (AChE) e de alterações comportamentais. Os peixes expostos ao Cd apresentaram diminuição na atividade da Na+/K+-ATPase e anidrase carbônica em brânquia e rim. A atividade da Ca2+-ATPase branquial também apresentou diminuição, enquanto houve elevação da atividade da H+-ATPase no mesmo órgão. A concentração de Ca2+ plasmático apresentou redução significativa, porém nos íons Na+, K+, Cl- e na osmolalidade não ocorreram alterações significativas. As atividades das enzimas glutationa S-transferase e glutationa peroxidase em brânquia e fígado não sofreram efeitos da exposição ao Cd, entretanto, a atividade da catalase diminuiu no fígado e aumentou na brânquia, Embora não tenha sofrido alterações no fígado, o conteúdo de glutationa reduzida (GSH) aumentou nas brânquias após 24 h de exposição. A ocorrência de danos no DNA aumentou nos eritrócitos dos peixes expostos a maior concentração de Cd testada. Após 24 h de exposição a 10 µg.L-1 de Cd a brânquia e o rim apresentaram acumulação de Cd semelhantes (0,2 µg Cd.g de tecido úmido-1), no entanto, após 96 h o acúmulo foi de 0,5, 0,45 e 0,1 (µg Cd.g de tecido úmido-1) na brânquia, rim e fígado respectivamente. O conteúdo de PSMT no fígado de peixes expostos a 10 µg.L-1 de Cd aumentou em 35 % (24 h) e 40 % (96 h), e no músculo o aumento foi de 76 % após 96 h. A atividade da AChE nos animais expostos a 10 µg.L-1 de Cd apresentou redução no músculo e aumento no cérebro, nas mesmas condições a atividade natatória dos animais ficou estimulada, resultando em uma maior distância percorrida com uma velocidade média maior. Este conjunto de resultados demonstra que as concentrações de Cd testadas afetam o funcionamento de diversos órgãos vitais de P. lineatus. A exposição aguda ao Cd causou inibição das enzimas envolvidas com a manutenção das concentrações osmoiônicas e com a regulação ácido-básica, o que resultou em hipocalcemia. Os efeitos do Cd não foram caracterizados pelo estresse oxidativo, mas pelos danos genotóxicos, neurotóxicos e no padrão de natação dos peixes. O Cd dissolvido na água acumulou-se na brânquia > rim > fígado, mas não no músculo, onde foi capaz de induzir aumento nas PSMT. Portanto, as concentrações de Cd aceitas pelo CONAMA para águas doce brasileiras são prejudiciais à espécie P. lineatus
Análise in silico de genes rap-phr em Bacillus cereus lato sensu
(2015-02-12) Cardoso, Priscilla de Freitas; Vilas-Bôas, Gislayne Trindade; Arantes, Olívia Marcia Nagy; Silva, Carlos Roberto Maximiano da
Espécies do gênero Bacillus produzem proteínas Rap (regulador de resposta aspartato fosfatase) que regulam vias essenciais para a bactéria, como esporulação, competência e formação do biofilme. Rap é inibida pelo peptídeo Phr, que é secretado, processado e internalizado para cumprir sua função, atuando assim como sensor de quorum. Essas proteínas têm sido investigadas em B. subtilis e com poucos estudos em Bacillus cereus lato sensu. Um grupo bacteriano ao qual pertencem B. cereus stricto sensu, B. thuringiensis e B. anthracis, bactérias fenotipicamente diferentes, mas geneticamente muito similares. Atualmente não há consenso se estas bactérias devem ser consideradas espécies distintas ou variantes especializadas de uma única espécie, inclusive porque suas principais características fenotípicas são codificadas em plasmídeos. O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar os sistemas rap-phr nos genomas destas espécies. Foram identificados 189 genes rap e 147 genes phr a partir do genoma de 34 linhagens do grupo com sequências genômicas completas. Dos genes obtidos, 23% são plasmidiais, uma frequência alta considerando um gene essencial para o metabolismo da célula. As proteínas Rap e Phr foram comparadas com proteínas ortólogas de B. subtilis e entre si. Foi possível notar uma grande variabilidade das sequências e em sua distribuição e na sintenia entre os genes de B. anthracis, enquanto que os genes de B. cereus e B. thuringiensis estão mais distribuídos e intercalados. Não foi possível identificar marcadores quanto a espécie nem em relação a sua localização no genoma. Entretanto, a grande quantidade dos genes plasmidiais nas linhagens de B. thuringiensis, em conjunto com a maior plasticidade dos genomas dessa espécie, pode permitir responder melhor às modificações ambientais.
Ressequenciamento de genomas de cultivares brasileiras de soja: análise estrutural e associativa
(2015-03-12) Santos, João Vitor Maldonado dos; Abdelnoor, Ricardo Vilela; Valliyodan, Babu; Barros, Everaldo Gonçalves de; Carvalho, Mayra Costa da Cruz Gallo de; Marcelino-Guimarães, Francismar Corrêa; Domingues, Douglas Silva; Nguyen, Henry T.
A soja [Glycine max (L.) Merrill] é uma das mais importantes leguminosas cultivadas no mundo devido sua importância na alimentação humana, animal e produção de biocombustíveis. Desde que seu genoma foi sequenciado, aumentou-se o interesse por estudos de variações alélicas e estruturais ligadas a importantes características agronômicas e associadas à resistência a patógenos. Neste trabalho, foram ressequenciados 28 cultivares brasileiras com o objetivo de investigar sua base genética e análise de associação ampla do genoma para identificar importantes variações alélicas ligadas a resistência contra nematoide de cisto, nematoide de galha e cancro da haste. Foram identificados 1.329.844 indels e 5.868.344 SNPs, sendo 10.079 SNPs relacionados à resistência as três doenças. Uma estrutura homogênea foi observada na base genética nacional, com a presença de possíveis regiões sob processo de seleção positiva. Ainda, regiões contendo CNVs foram identificadas no genoma da soja. Os resultados indicam que apesar da base genética nacional estar se diversificando, ainda continua estreita, o que aumenta a necessidade de utilização de acessos de outras localidades para aumentar a variabilidade da base genética da soja brasileira. As variações alélicas relacionadas à resistência a doenças possuem aplicação direta para programas de melhoramento, devendo ser validadas futuramente. Por fim, os CNVs detectados podem contribuir significativamente no aumento da produtividade, e ainda estar relacionados à seleção de combinações que levam a uma resistência maior dos genótipos analisados contra as doenças estudadas. Uma análise mais aprofundada de tais variações estruturais torna-se importante em futuros trabalhos.
Diagnóstico molecular e ocorrência de Streptococcus iniae em tilápia do Nilo (Oreochomis niloticus) de criação intensiva
(2015-03-24) Barbosa, André Rocha; Vilas-Boas, Laurival Antônio; Silva, Carlos Roberto Maximiano da; Carvalho Filho, Celso Duarte; Pretto-Giordano, Lucienne Garcia
O consumo de proteína animal aumentou expressivamente nos últimos 50 anos. O aumento populacional e a melhoria das condições de vida em países emergentes estão entre os fatores responsáveis pela crescente demanda de proteína animal. O Brasil é um país que possui condições de suprir essa demanda, sobretudo por meio da aquicultura. No entanto, o crescimento da produção de peixes no Brasil sem uma política de desenvolvimento aumentou a ocorrência de doenças bacterianas, principalmente as causadas por estreptococos. Streptococcus iniae e Streptococcus agalactiae são as principais espécies responsáveis por mortalidade e morbidade de peixes na criação intensiva de todo o mundo, entretanto S. iniae foi identificado apenas uma vez no Brasil. O presente estudo investigou a ocorrência de S. iniae em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) coletadas durante um ano, em propriedades de criação intensiva. Foram coletados 10 peixes por propriedade a cada estação do ano, e amostras de encéfalo, rim e fígado foram utilizadas para a pesquisa por PCR. Dentre os 185 peixes analisados, 13 (7,06%) foram positivos para a PCR S. iniae-específica. Entre os peixes positivos, 76,92% (10/13) não apresentaram sinais clínicos de estreptococose e 69,23% (9/13) apresentaram infecção por S. agalactiae e S. iniae. Esses resultados evidenciaram a necessidade da utilização de técnicas sensíveis no monitoramento de doenças bacterianas em peixes. A ocorrência de S. iniae ao longo de todo o ano sugere que essa bactéria possa estar estabelecida nas propriedades pesquisadas. Esse é o primeiro estudo de ocorrência de S. iniae em peixes de criação do Brasil e primeiro relato de coinfecção de S. iniae e S. agalactiae em peixes.

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