02 - Mestrado - Biotecnologia

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Navegando 02 - Mestrado - Biotecnologia por Assunto "Ácidos hialurônicos"

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    Isolamento e purificação de ácido hialurônico da crista de frango e incorporação em membranas de celulose bacteriana
    Oliveira, Sabrina Alves de; Tischer, César Augusto [Orientador]; Miyata, Izabel Cristina Riegel Vidotti; Oliveira Junior, Admilton Gonçalves de
    Resumo: O ácido hialurônico (HA) é um polissacarídeo constitutivo com unidades repetidas de ácido D-glicurônico e N-acetilglicosamina que pode ser encontrado na matriz extracelular de vertebrados e possui aplicação na engenharia de tecidos ou como suporte para a regeneração e cicatrização de feridas Este composto pode ser extraído da crista de frango utilizando diferentes métodos A celulose bacteriana (BC), produzida pela Gluconacetobacter hansenii, é um biofilme de alto grau de cristalinidade que tem sido utilizado para fins terapêuticos como membrana cicatrizante Visando a produção de compósitos poliméricos com HA para aplicações diversas na área da saúde, este trabalho teve como objetivo extrair o HA de cristas de frango e incorporá-lo durante a processo de fermentação da celulose bacteriana com intuito de trazer as propriedades intrínsicas de cicatrização do HA para celulose bacteriana Neste estudo, para o isolamento do HA primeiramente foram realizados testes preliminares com intuito de estabelecer as melhores condições para definir a metodologia de isolamento de HA da crista de frango A metodologia definida envolveu etapas de digestão proteolítica e lipídica, extração com resina aniônica, tratamento com sais baseado no efeito salting-out, precipitação com etanol e secagem Para a caracterização do material isolado foram realizadas as técnicas de espectroscopia de RMN e no infravermelho, termogravimetria e cromatografia de exclusão por tamanho para determinação da massa molar e homogeneidade Os compósitos poliméricos foram produzidas na presença de ácido hialurônico isolado da crista de frango em diferentes tempos de fermentação, especificamente no primeiro e no terceiro dia de fermentação As membranas nativas e compósitos poliméricos foram caracterizadas em relação à sua estrutura, morfologia e cristalinidade O processo de isolamento e purificação resultou na obtenção de um HA de baixa massa molar com características estruturais semelhantes ao material comercial padrão Os resultados demonstraram que as membranas de fato incorporaram o HA As membranas produzidas no terceiro dia apresentaram melhor incorporação de HA-SAB entre a nanofibra de celulose, resultando em membranas com maior estabilidade térmica, maior rugosidade e menor cristalinidade Os compósitos poliméricos produzidos apresentam potencial para futuras aplicações biomédicas, como na regeneração e cicatrização de feridas pela presença do ácido hialurônico, um glicosaminoglicano com alta afinidade biológica
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    Produção de ácido hialurônico por Streptococcus zooepidemicus ATCC 39920 em diferentes condições de cultivo utilizando metodologias estatísticas
    Pan, Nicole Caldas; Celligoi, Maria Antonia Pedrine Colabone [Orientador]; Santana, Maria Helena Andrade; Buzato, João Batista; Vignoli, Josiane Alessandra [Coorientadora]
    Resumo: O presente trabalho avaliou diferentes condições de cultivo que influenciam na produção de ácido hialurônico por Streptococcus zooepidemicus ATCC 3992 utilizando metodologias estatísticas A síntese de ácidos orgânicos foi acompanhada Os fatores fermentativos pH (6,; 7,, 8,), temperatura (34; 37; 4°C) e agitação (1; 15; 2 rpm) foram avaliados por planejamento de Box-Benhken e a maior produção foi de ,437 gL-1 em pH 8,, 37°C e 1 rpm Definida estas condições, os parâmetros nutricionais, glicose (1; 2; 3 gL-1) e extrato de levedura (1; 2; 3 gL-1), foram avaliados por planejamento fatorial completo, obtendo ,787 gL-1 em 3 gL-1 de glicose e 3 gL-1 de extrato de levedura O estudo de meios alternativos contendo derivados agroindustriais, indicou maior produção em caldo e melaço de cana-de-açúcar a 3 gL-1 de açúcares totais com extrato de levedura a 3 gL-1 A produção foi de ,266 gL-1 e ,376 gL-1, respectivamente Dentre as fontes alternativas de nitrogênio, a maior produção foi de ,219 gL-1 quando utilizou 3 gL-1 de proteína de soja em meio contendo sacarose a 3 gL-1 de açúcares totais A avaliação de sacarose (1; 3; 5 gL-1), extrato de levedura (1; 3; 5 gL-1), glutamina (,; ,3; ,6 gL-1) , glutamato (,; ,3; ,6 gL-1) e ácido oxálico (,; ,3; ,6 gL-1) foi realizada por planejamento fatorial fracionário 2(5-1) e a maior produção foi de ,68 gL-1 em 5 gL-1 de sacarose e extrato de levedura e ,6 gL-1 de glutamina, glutamato e ácido oxálico Em sacarose (5 gL-1), glutamato (,6 gL-1) e ácido oxálico (,6 gL-1), extrato de levedura (5; 57,32; 92,68 e 1 gL-1) e glutamina (,6; ,9514; 1,8; 2,6486; 3, gL-1) foram avaliados por delineamento composto central rotacional, obtendo produção de ,654 gL-1 em 1,8 gL-1 de glutamina e 1 gL-1 de extrato de levedura Das variáveis avaliadas demonstrou-se que o pH e o extrato de levedura apresentam elevada influência sobre o metabolismo microbiano Em pH ácido (pH 6,) obteve-se um desvio do fluxo de carbono para o metabolismo heterolático, não apresentando produção de ácido lático, e o incremento do extrato de levedura aumentou a síntese do mesmo Os resultados obtidos neste trabalho serão utilizados como norteadores para futuros estudos que busquem a produção de ácido hialurônico em maiores escalas para aplicações industriais