02 - Mestrado - Biotecnologia
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Item Diversidade de rizóbios isolados de nódulos de feijoeiros selvagens (Strophostyles helvola e Strophostyles leiosperma) na américa do norte e descrição de novas espécies e simbiovares(2025-08-26) Kitagawa, Hellen Yukari; Hungria, Mariangela; Batista, Jesiane Stefania da Silva; Klepa, Milena SerenatoO nitrogênio é o elemento requerido em maior quantidade pelas plantas, por constituir várias moléculas, como os ácidos nucleicos, proteínas, hormônios e clorofila. A principal via de incorporação de nitrogênio atmosférico se dá por meio da fixação biológica de nitrogênio (FBN), sendo as bactérias diazotróficas simbióticas, coletivamente denominadas como rizóbios, as mais eficientes na capacidade de fixar e transformar o nitrogênio em uma forma assimilável para as plantas hospedeiras. Os rizóbios se associam simbioticamente com diversas espécies leguminosas, dentre elas os feijoeiros selvagens do gênero Strophostyles. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a diversidade de rizóbios nativos do centro-oeste e do leste dos Estados Unidos da América por meio da análise polifásica e da capacidade simbiótica de bactérias isoladas de nódulos de S. helvola e S. leiosperma. Foram realizadas a caracterização morfofisiológica, a análise de perfil genômico por BOX-PCR, o sequenciamento e análise filogenética do gene 16S RNAr e de quatro genes housekeeping (glnII, gyrB, recA e rpoB), possibilitando a análise de MLSA (Multilocus Sequence Analysis), de genes simbióticos e o sequenciamento do genoma completo. Na análise por BOX-PCR com 32 estirpes, considerando 70% de similaridade, foram identificados 15 perfis genéticos distintos, nove em posições isoladas e seis grupos. Na análise do gene 16S RNAr, foram identificados quatro gêneros: Mesorhizobium (23), Pararhizobium (5), Pseudomonas (3) e Agrobacterium (1). Na análise de MLSA, sete estirpes de Mesorhizobium apresentaram diferenças significativas com as espécies descritas anteriormente, indicando possíveis novas espécies. Destas estirpes, quatro tiveram o genoma sequenciado e apresentaram valor de Average Nucleotide Identify (ANI) inferior a 95-96% e hibridação DNA-DNA digital (HDDd) inferior a 70% com as espécies mais próximas. Na filogenia do gene nodC, 22 estirpes em estudo agruparam em um clado e a estirpe CNPSo 4689 apresentou uma posição isolada, ambos com alto suporte estatístico e baixa similaridade com os simbiovares descritos; o que pode indicar a existência de novos simbiovares. Nas estirpes com potencial para representarem novas espécies, foi confirmada a capacidade de nodular e fixar nitrogênio no hospedeiro S. helvola, exceto para CNPSo 4689, que foi incapaz de nodular. Com base nas análises realizadas neste estudo, os dados suportam a descrição de quatro novas espécies de Mesorhizobium, nomeadas de M. burtonii sp. nov., M. vincentii sp. nov., M. choctawi sp. nov. e M. houmai sp. nov., cujas estirpes-tipo selecionadas foram CNPSo 4670T, CNPSo 4671T, CNPSo 4688T e CNPSo 4689T, respectivamente. Além disso, a filogenia do nodC sugere a descrição de dois novos simbiovares, nomeados como sv. choctawi e sv. houmaiItem Produção de soforolipídios por Starmerella bombicola e desenvolvimento de formulação antimicrobiana para dermatite atópica canina(2025-04-23) Santana, Nathalia Fraile; Celligoi, Maria Antonia Pedrine Colabone; Ogatta, Sueli Fumie Yamada; Bigoto, Briani GiseleA dermatite atópica canina (DAC) é uma doença crônica, inflamatória e de origem genética, caracterizada por prurido intenso, que leva à coceira excessiva e lambedura, resultando em lesões cutâneas. Essas lesões favorecem infecções secundárias por microrganismos como a bactéria Staphylococcus pseudintermedius e o fungo Malassezia pachydermatis. O diagnóstico da DAC é realizado com base em uma avaliação clínica detalhada e exames complementares, e o tratamento é sintomático, utilizando corticoides e antibióticos, tanto tópicos quanto sistêmicos. A formulação de produtos cosméticos para cães com dermatite deve ser hipoalergênica, dermatologicamente testada e compatível com o pH fisiológico da pele canina. No mercado pet, há uma crescente demanda por produtos eficazes e ecologicamente corretos. Nesse contexto, os biossurfactantes, como os soforolipídios, têm se destacado por suas propriedades antimicrobianas, antioxidantes e hidratantes, além de serem biodegradáveis e sustentáveis. Produzidos pela levedura Starmerella bombicola, os soforolipídios apresentam menor risco de reações adversas e são promissores para o desenvolvimento de formulações tópicas para o tratamento da DAC. O objetivo deste estudo foi produzir soforolipídio, caracterizar e aplicar em formulação tópica para o tratamento dessa condição. Foi avaliado a eficácia dos soforolipídios contra microrganismos causadores de infecções secundárias na DAC, também foi avaliado a citotoxicidade do soforolipídio em pele de suínos. A partir desses resultados foi desenvolvido uma formulação tópica contendo soforolipídio, que apresentou atividade antimicrobiana para S. pseudintermedius e M. pachydermatis. A formulação se manteve estável nos testes de pré-estabilidade, organolépticos e no pHItem Seleção de bactérias produtoras de lipopeptídeos antimicrobianos e antioxidantes para aplicações biotecnológicas(2025-02-28) Millan, Edna Suzana António Jinga; Rocha, Cristiani Baldo da; Gasparin, Fabiana Guillen Morreira; Galhardi, Lígia Carla FaccinOs surfactantes, amplamente utilizados nas indústrias, são majoritariamente derivados do petróleo. Devido a preocupações ambientais e novas regulamentações, há crescente interesse por alternativas naturais, como os biossurfactantes microbianos, que são biodegradáveis e possuem propriedades biológicas específicas. Os lipopeptídeos, uma classe importante de biossurfactantes, incluem surfactinas, iturinas e fengicinas, com aplicações em cosméticos, saúde, agricultura e alimentos. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi selecionar linhagens de Bacillus sp. produtoras de lipopeptídeos com propriedades antimicrobianas e antioxidantes. Primeiramente, foi realizado a detecção do gene sfp, envolvido na biossíntese da surfactina, no DNA genômico de sete linhagens Bacillus sp., por PCR. Em seguida, as linhagens foram cultivadas em meio contendo glicose e extrato de levedura, com 2% de inóculo, por 72 horas, 150 rpm, 37°C. A presença de biossurfactantes foi detectada por testes de índice de emulsificação e espalhamento de óleo. Os lipopeptídeos, extraídos por precipitação ácida seguida de extração orgânica, foram submetidos às análises de FTIR, espectrometria de massas, atividade antimicrobiana (antiviral, antifúngica e antibacteriana) e atividade antioxidante. Os resultados mostraram a amplificação de fragmento referente ao gene sfp no DNA de Bacillus sp. UELAsA5.1, Bacillus sp. UELAsF4.66 e Bacillus sp. UELAsA1.447. Os sobrenadantes das fermentações dessas três linhagens deslocaram a camada de óleo, e formaram emulsões estáveis com índices de emulsificação superiores a 50%, confirmando a presença de biossurfactantes com propriedades tensoativa e emulsificantes. As outras 4 linhagens não foram capazes de produzir biossurfactantes, nas condições experimentais usadas neste estudo. Os sobrenadantes das três linhagens selecionadas foram extraídos para obtenção de lipopeptídeos denominados LPA5.1, LPF4.66 e LPA1.447, que mostraram a presença de grupamentos químicos típicos de lipopeptídeos em análises de FTIR. Análises por espectrometria de massas reveleram a presença de isoformas de surfactinas nos três lipopeptídeos. O LPA5.1, na concentração de 12 mg/mL se destacou por sua atividade antifúngica contra Fusarium verticillioides, inibindo seu crescimento em 40%. O LPF4.66 foi capaz de reduzir em 51,8 % o radical DPPH, na concentração de 2mg/mL e apresentou atividade antiviral contra herpes simplex (HSV-1). O LPA1.447 apresentou baixa toxicidade, atividade antioxidante significativa (74,25%) e potente atividade antiviral contra HSV-1. O valor de IC50 (concentração que inibe 50% da atividade viral) foi de 43,9 µg/mL e o IS (índice de seletividade, que avalia a eficácia do composto com relação à toxicidade) foi de 10, destacando um potencial promissor de LPA1.447 como agente antiviral Esses resultados demonstram que os lipopeptídeos LPA5.1, LPF4.66 e LPA1.447 possuem atividade antiviral para aplicações biotecnológicas, como biocontrole na agricultura e uso na saúde como antivirais e antioxidantes naturaisItem Avaliação da sobrevivência de Heterorhabditis amazonensis após encapsulação com alginato de sódio(2025-02-22) Moura, Amália Gabriella Carvalho; Kobayashi, Renata Katsuko Takayama; Alves, Viviane Sandra; Brito, Benito Guimarães de; Ueno, Cláudio TakeoO Brasil destaca-se como um dos maiores produtores e exportadores de carde de frango, mas enfrenta desafios significativos no controle de pragas como Alphitobius diaperinus, que impacta negativamente a produção e saúde das aves. Por isso, novas alternativas de controle dessa praga vem sendo buscadas, e o nematoide entomopatogênico Heterorhabditis amazonensis (isolado UEL08) mostrou-se eficiente no controle desse inseto em condições de laboratório. No entanto, a produção in vitro e a formulação de produtos a base de nematoides entomopatogênicos ainda é um desafio no Brasil. Assim, este estudo teve como objetivo desenvolver uma estratégia de encapsulação para H. amazonensis, utlizando alginato de sódio e cloreto de cálcio, com o intuito de proteger o nematoide de fatores ambientais, bem como de avaliar condições ideais de armazenamento. A metodologia consistiu na formulação de cápsulas por meio da gelificação iônica, que foram acondicionadas em diferentes temperaturas (5°C, 10°C, 15°C, 25°C e 30°C). Foram realizados testes de viabilidade ao longo de 120 dias, avaliação de toxidade do citrato de sódio sobre o nematoide e quantificação dos nematoides encapsulados. Os resultados apontaram que a temperatura de 25°C foi a mais eficiente, mantendo 82% dos nematoides viáveis após 30 dias, enquanto temperaturas mais altas ou mais baixas comprometeram a sobrevivência. O citrato de sódio a 1% mostrou-se adequado para diluir as cápsulas sem comprometer a viabilidade, infectividade e reprodução dos nematoides. No entanto, contaminações por fungos foram observadas após 30 dias, indicando a necessidade de testes futuros com antifúngicos ou higienização prévia dos nematoides. O estudo conclui que a encapsulação com alginato é uma alternativa promissora para a formulação de H. amazonensis visando o desenvolvimento de produto para o controle do cascudinho-do-aviário com este inimigo natural, mas destaca a necessidade de mais estudos para garantir a segurança e a eficácia em condições reais de aviáriosItem Produção e modificação da Levana de Bacillus subtilis natto para aplicação na área da saúde(2024-03-11) Pereira, Beatriz Ticiani Vieira; Celligoi, Maria Antonia Pedrine Colabone; Orsato, Alexandre; Melo, Marcelo Rodrigues de; Rocha, Cristiani Baldo daA levana, exopolissacarídeo de frutose sintetizado pelo Bacillus subtilis natto, é reconhecida por suas diversas propriedades e aplicações biotecnológicas. Apesar da levana apresentar várias bioatividades relacionadas à sua estrutura, modificações químicas, como a sulfatação podem potencializar ou agregar novas atividades biológicas a essa macromolécula. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi produzir, modificar por sulfatação e avaliar a atividade antiviral, anticoagulante e antioxidante da levana nativa e das amostras sulfatadas. Um planejamento fatorial Box-Benhken 3³ incompleto, com as variáveis tempo de fermentação (h) (X1), concentração de sacarose (g/L) (X2) e o pH inicial (X3) foi realizado para avaliação da biomassa, consumo de sacarose e da produção de levana. A levana produzida na melhor condição foi submetida a dois processos de sulfatação, com diferentes proporções do complexo trióxido enxofre-piridina. A levana nativa e as amostras sulfatadas foram testadas quanto a ação antiviral, contra o Herpes simplex vírus tipo 1 (HSV-1); anticoagulante, frente ao ensaio de tromboplastina parcial ativado (KPTT) e tempo de protrombina (TP) e e antioxidante pelo método de DPPH. Os resultados mostraram uma produção de levana de 26,86g/L em 24h, 200g/L de sacarose e pH 7,0. As variáveis concentração de sacarose e pH foram significativas, demonstrando que alta concentração de sacarose e o pH próximo do neutro favorecem a produção de levana. O grau de substituição (DS) foi de 1,36 e 1,37 para a levana sulfata 1 e a levana sulfatada 2, respectivamente. O processo de sulfatação melhorou a resistência térmica da levana, com o aumento da temperatura de carbonização de 578°C para 740°C, podendo ser útil para os processos industriais. A atividade antiviral da levana aumentou com a sulfatação exaustiva, diminuindo a concentração inibitória de 50% (IC50) em 57%. As amostras sulfatadas prolongaram o KPTT de acordo com a concentração, enquanto a levana nativa não apresentou a atividade anticoagulante. Além disso, atividade antioxidante aumentou em 52% com a sulfatação. Esses resultados demonstraram que o processo de sulfatação potencializou a ação antiviral, anticoagulante e antioxidante da levana e esses dados podem contribuir para a criação de novas metodologias terapêuticas para a área da saúdeItem Soforolipídios de Starmerella bombicola e óleo de copaíba aplicados em uma formulação dermatológica antimicrobiana e antiviral(2025-10-23) Ferreira, Tainã de Oliveira; Celligoi, Maria Antonia Pedrine Colabone; Nakazato, Gerson; Bigotto, Briani GiseleCutibacterium acnes e o vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) são os principais causadores da acne e da foliculite herpética. A busca por moléculas ativas com propriedades biológicas pode indicar uma alternativa promissora. O objetivo desse estudo foi aplicar os soforolipídios e óleo de copaíba em formulações dermatologias com atividades antiacne e antiviral. Os soforolipídios foram produzidos em biorreator de bancada com glicose e ácido oleico atingindo 38,37g/L com predominância de forma lactônica diacetilada. Foram realizados os testes de citotoxicidade, atividades antimicrobiana, virucida e antiviral dos soforolipídios e do óleo de copaíba e com a associação dos ativos. Soforolipídios e óleo de copaíba tiveram ação contra C. acnes e HSV-1, assim foram desenvolvidas três formulações com estes ativos variando as concentrações de 0,3 a 0,9 g/% de soforolipídios e de 1,5 a 0,9 % do óleo de copaíba. A formulação com 0, 9 % de soforolipídios e 0,9 % de óleo de copaíba destacou-se pela melhor atividade antimicrobiana contra a C. acnes, com inibição de 91,45%. Assim esta formulação apresenta elevado potencial de aplicação dermatológica, contra doenças de pele, como acne vulgar e foliculite herpéticaItem Condicionamento biológico de solo com materiais compósitos biodegradáveis: influência no crescimento de tomate, na atividade microbiana e no perfil metabolômico sob diferentes níveis de disponibilidade hídrica(2025-04-25) Neumann, Amanda; Oliveira, André Luiz Martinez de; Rodrigues, Elisete Pains; Silva, Adriana Pereira da; Bauermeister, AnelizeO cenário mundial de mudanças climáticas e crescimento populacional impõe sobre a agroindústria o desafio de aumentar a produtividade dos cultivos com menor impacto ambiental, priorizando práticas sustentáveis. O trabalho teve como objetivo analisar os efeitos do déficit hídrico associado ao uso de biomaterial no perfil metabolômico do solo e no desenvolvimento da planta. O experimento foi conduzido em casa de vegetação por 60 dias, adotando um delineamento com duas condições bióticas: com plantio de tomate e sem plantio de tomate; dois tipos de substrato: com adição de biomaterial e sem adição de biomaterial; e dois níveis de disponibilidade hídrica: 70% C.C. (capacidade de campo) e 50% C.C. Foram feitas análises biométricas (altura de parte aérea, comprimento de raiz e biomassa seca) para analisar o efeito no desenvolvimento vegetal, e bioquímicas (??-glicosidase, arilsulfatase, respiração basal, carbono da biomassa microbiana e quociente metabólico) que trazem informação sobre atividade microbiana no solo. Também foram feitas análises de cromatografia gasosa e espectrometria de massas (GC-MS) para a identificação de alterações no perfil metabolômico. Os resultados biométricos mostram que a presença do biomaterial teve influência positiva no desenvolvimento da planta, demonstrando aumento significativo no comprimento da parte aérea e na biomassa de parte aérea e de raiz. Os resultados obtidos nas análises bioquímicas apresentaram efeito somente da presença/ausência de planta, sem efeito significativo de biomaterial ou déficit hídrico. Os resultados de metabolômica permitiram agrupar os diferentes tratamentos com base nos perfis dos substratos, influenciados pela presença de biomateriais, níveis de disponibilidade hídrica e interação com plantas de tomate. Foram observados compostos com potencial relevância para a atividade microbiana e o desenvolvimento vegetal, sugerindo que os biomateriais podem atuar como bioinsumos, promovendo o crescimento das plantas e auxiliando na mitigação do estresse hídricoItem Produção e avaliação das propriedades antioxidantes de lipopeptídeos bacterianos(2025-07-22) Bertoncini, Giovana Élika Silveira; Rocha, Cristiani Baldo da; Sartori, DanieleLipopeptídeos, metabólitos produzidos por espécies do gênero Bacillus, destacam-se por suas propriedades antioxidantes e seu potencial de aplicação nas indústrias alimentícia, cosmética e farmacêutica. A crescente demanda por antioxidantes naturais, em substituição aos sintéticos que podem representar riscos à saúde, ressalta a relevância de soluções biotecnológicas sustentáveis e renováveis. Nesse contexto, este estudo teve como objetivo produzir, caracterizar e avaliar as propriedades antioxidantes de lipopeptídeos produzidos pela linhagem Bacillus sp. UELAsF1.483, e aplicar os lipopeptídeos em formulações filmogênicas. A linhagem foi cultivada em meio contendo glicose e ácido glutâmico, com 2% de inóculo, por até 96 horas, a 150 rpm e 37°C. A presença de biossurfactantes foi confirmada por meio de ensaios de índice de emulsificação e espalhamento de óleo. Os lipopeptídeos foram extraídos por precipitação ácida seguida de extração orgânica e submetidos às análises de suas características estruturais e ensaios de atividade antioxidante, e desenvolvimento de formulação filmogênica. Os resultados indicaram que o sobrenadante induziu dispersão na camada de óleo e formou emulsões estáveis com índices de emulsificação superiores a 50%, confirmando a presença de biossurfactantes com propriedades tensoativas e emulsificantes, especialmente após 72 de fermentação. A atividade antioxidante aumentou significativamente após 48 horas de cultivo, estabilizando entre 35–40% em 72 horas. Com base nesses resultados, o tempo de fermentação de 72 horas foi escolhido para os experimentos subsequentes. Nesse intervalo, a produção de biossurfactantes alcançou 0,45 g/L. A análises estruturais confirmou a presença de grupos funcionais típicos de lipopeptídeos, identificando tempos de retenção compatíveis com padrões descritos na literatura. O lipopeptídeo produzido foi denominado LP.F1483 e apresentou 47,26% de inibição de radicais DPPH, em baixas concentrações, além de apresentar atividade antioxidante total, equivalente ao Trolox, antioxidante de referência. Além disso, o lipopeptídeo LP.F1483 foi incorporado em filmes biodegradáveis à base de amido e gelatina, 0%, 2.5 mg, 5 mg e 25 mg/100g polímero. A solubilidade em água aumentou de forma dependente da concentração de LP.F1483, atingindo 56,97% nos filmes com maior teor do aditivo, o que evidencia a desestabilização da matriz polimérica e maior afinidade com a água. A análise por espectroscopia FT-IR confirmou a presença de interações típicas entre os componentes dos filmes e grupos funcionais relacionados ao lipopeptídeo. Por fim, a atividade antioxidante nos filmes foi observada apenas na formulação com 25 mg de LP.F1483, que apresentou 45,53% de inibição de radicais DPPH, demonstrando um efeito dose-dependente e o potencial desses materiais para uso como embalagens ativas ou cosméticos funcionais. Esses achados destacam o potencial de Bacillus sp. UELAsF1.483 como uma ferramenta biotecnológica promissora, contribuindo para o desenvolvimento de alternativas naturais aos antioxidantes sintéticos e abrindo novas perspectivas para inovações sustentáveis nas indústrias cosmética, alimentícia e farmacêutica.Item Avaliação da atividade anti-inflamatória e antioxidante de di-ramnolipídeos produzidos por Pseudomonas aeruginosa.(2022-03-30) Sawoniuk, Isadora Caroline; Camilios Neto, Doumit; Casagrande, Rúbia; Melo, Marcelo Rodrigues de; Camilios, Josiane A. VignoliA pele é o maior órgão do corpo humano e sua principal função é agir como barreira química e física contra danos externos. A radiação UVB chama bastante atenção por estar atingindo constantemente a superfície da Terra e causando diversos danos na pele, como envelhecimento e o desenvolvimento de câncer. Assim a suplementação da pele com produtos naturais parece ser uma alternativa interessante para mitigar os efeitos nocivos da exposição aos raios UVB. Neste trabalho foi realizada a produção de ramnolipídeos por fermentação submersa, seguida de extração, para obtenção de extrato bruto concentrado, e processo de purificação com obtenção de Di- ramnolipídeos (Di-RL) de alto grau de pureza (99,9 %). A inflamação e o estresse oxidativo foram induzidos por radiação UVB com uma dose de 4,14 J/cm2 e o tratamento com Di-RL, in vivo, indicou uma considerável redução na inflamação cutânea evidenciada através: da diminuição do edema de pele; da diminuição de recrutamento de neutrófilos, da redução do espessamento da epiderme; da redução da contagem de mastócitos; e da redução da degradação de fibras de colágenos e da atividade/secreção da metaloproteínase – induzidos por irradiação UVB. Enquanto a proteção da pele contra o estresse oxidativo foi confirmado pelos níveis da glutationa reduzida (GSH), atividade da enzima catalase, que se manteve a níveis basais, além de reduzir a produção de hidroperóxidos lipídicos e de ânions superóxidos. Deste modo, os resultados obtidos no presente trabalho sugerem que os Di-RL apresentam atividade anti-inflamatória e antioxidante e consequente grande potencial para proteção da pele contra a irradiação UVB.Item Produção de proteases por Aspergillus welwitschiae.(2023-03-31) Paes, Amanda Bordignon; Sartori, Daniele; Pan, Nicole Caldas; Melo, Marcelo Rodrigues deAs proteases apresentam grande interesse comercial, com aplicações na indústria farmacêutica, de cosméticos, têxtil, alimentícia, como aditivos para detergentes, entre outros. Os fungos do gênero Aspergillus tem grande potencial biotecnológico por serem bons produtores de enzimas em substratos de custo reduzido, como os resíduos agroindustriais. O resíduo de malte é muito abundante e possui quantidade considerável de proteínas, adequado como fonte nutricional para a produção de proteases por microrganismos. A produção de proteases pode ser obtida a partir de linhagens selecionadas de microrganismos associadas aos parâmetros abióticos padronizados. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar parâmetros abióticos para a produção de proteases por Aspergillus welwitschiae UELAs 15.262 a partir do resíduo de malte. Foi avaliado a produção de proteases sob os parâmetros de temperatura, com variação de 28 °C até 42 °C e pH variando de 4,2 até 9,8. As maiores quantidade de proteases produzidas foram 95,95 ± 1,08 U/mL (35 °C, pH 9,8), 94,72 ± 3,27 U/mL (35 °C, pH 7,0), 91,65 ± 4,10 U/mL (30 °C, pH 9,0), 91,05 ± 5,71 U/mL (35 ºC, pH 4,2) e 87,72 ± 1,57 U/mL (30°C, pH 5,0). Dentre as condições que mais produziram proteases, quatro foram selecionadas para avaliar o tempo de produção enzimática. A 35 °C, pH 4,2, a maior quantidade de proteases foi obtida no terceiro dia de fermentação, enquanto nas demais condições a maior quantidade de proteases foi obtida no quarto dia de fermentação. O Extrato Bruto Enzimático (EBE) obtido no terceiro dia de fermentação nas condições 35 °C, pH 4,2 e 9,8, foram submetidos a avaliação de atividade de proteases em meio contendo leite em pó como substrato, a 25 °C e 37 °C. Em ambas as temperaturas as proteases permaneceram ativas por até 24 horas, contudo, a melhor atividade de proteases foi obtida a 37 °C. Esses resultados indicaram que A. welwitschiae UELAs 15.262 produziu proteases em resíduo de malte e que a temperatura tem influência na produção dessas enzimas. A avaliação de parâmetros abióticos associados à linhagem UELAs 15.262 é de grande importância para maior produção de proteases usando resíduos de baixo custo.Item Hidrólise ácida da lactose extraída do resíduo da manteiga ghee(2023-03-08) Barreto, Maria Beatriz Góes; Oliveira, Suzana Mali de; Gasparin, Fabiana Guillen Moreira; Melo, Marcelo Rodrigues de; Mantovan, JanainaNos últimos anos, tem-se vivenciado uma elevada demanda por produtos lácteos sem lactose, devido ao aumento de consumidores com intolerância à lactose. Junto ao crescente consumo de produtos sem esse dissacarídeo, também há o aumento da quantidade de resíduos industriais derivados dos laticínios, que apresentam potencial de reaproveitamento, com redução do descarte inapropriado. Um resíduo pouco explorado é o resultante da produção da manteiga ghee, que é gerado após a coagulação da parte sólida não gordurosa do leite, permanecendo os demais componentes do leite em seu resíduo, como a lactose. Os usos tradicionais da lactose são insuficientes para atender a quantidade de resíduos gerados mundialmente, se fazendo necessário o estudo de novos meios de reaproveitamento da mesma. Deste modo, esse trabalho teve como objetivo desenvolver processo de hidrólise ácida da lactose proveniente do resíduo da manteiga ghee empregando-se a combinação de um método físico (tratamento hidrotérmico em autoclave) e químico (hidrólise ácida) em etapa única. O resíduo da manteiga ghee foi caracterizado quanto à sua composição centesimal, e fracionado para a obtenção de uma fração rica em lactose (FRL), que foi submetida ao processo de hidrólise ácida em comparação com uma amostra de lactose comercial pura. A hidrólise ácida foi realizada em autoclave, com pressão de 1,0 e 1,5 atm, e temperaturas de 121 e 127 °C, respectivamente, na presença de solução de ácido sulfúrico (1%) ou ácido cítrico (5 e 10%), por um período de 30 min. As amostras que resultaram na maior eficiência de hidrólise foram submetidas à pressão de 1,5 atm a 127 °C, combinadas ao ácido sulfúrico 1% e ácido cítrico 10%, resultando em eficiências de hidrólise para a FRL de 22,64 e 20,92%, e para a lactose comercial com valores de 92,83 e 69,88%, respectivamente. O processo de hidrólise ácida realizado em etapa única pela combinação do processo hidrotérmico na presença de ácidos se mostrou promissor como uma alternativa para o reaproveitamento de resíduos lácteos ricos em lactoseItem Avaliação da influência de soluções extratoras e de parâmetros na extração de óleos essenciais de plantas aromáticas(2022-04-08) Batista, Michel Pedro; Camilios Neto, Doumit; Arakawa, Nilton Syogo; Sartori, DanieleOs óleos essenciais (OEs) são compostos naturais normalmente obtidos por métodos de destilação dos extratos brutos de plantas. Apresentam um odor agradável, marcante e uma ampla variedade de atividades biológicas. Possuem alto valor comercial por serem utilizados nas indústrias químicas, farmacêuticas e na aromaterapia. Por isso, o desenvolvimento de processos ou produtos que intensifiquem sua extração ou rendimento é de extrema importância. Portanto, o objetivo desta pesquisa foi estudar parâmetros de extração, entre eles massa de material vegetal e tempo de extração, e a aplicação de soluções extratoras obtidas a partir de tensoativos naturais, com a intenção de determinar as condições para os melhores rendimentos dos OEs. O extrator de bancada e o processo de extração se mostrou eficiente para as espécies de ervas aromáticas avaliadas – Cymbopogon flexuosus, Cymbopogon winterianus e Melaleuca alternifolia –, obtendo-se rendimentos satisfatórios com a utilização do adaptador. O armazenamento do material vegetal não influenciou o rendimento dos OEs e o tempo de extração demonstrou ser um fator com grande relevância na extração, influenciando no custo-benefício do método nas três plantas testadas. A aplicação da solução de ramnolipídeos (RL) apresentou uma resposta positiva no rendimento do Cymbopogon winterianus, que subiu de 0,62% para 0,89% (m/m). Já com aplicação da solução de decilglicosídeos (DC), os rendimentos ficaram entre 0,91% com 60 minutos e 1,03% com 30 minutos, demonstrando a influência positiva do tempo. O mesmo pode ser observado para o Cymbopogon flexuosus, sendo que o rendimento obtido foi de 0,32% com 60 minutos e de 0,31% com 30 minutos. Já para a Melaleuca alternifolia, foram obtidos rendimentos que variaram entre 1,51 a 2,12%, entre os tratamentos. O melhor rendimento foi obtido aplicando a solução de RL 0,1% na extração do OE das folhas destacadas e de 1,89%, em 90 minutos, sem aplicação de solução extratora. A solução de cloreto de sódio demonstrou ser promissora, devido ao seu baixo custo e relativa eficiência. Os OEs obtidos apresentaram boa pureza e, em sua composição, os compostos químicos majoritários característicos descritos na literaturaItem Identificação de fungos produtores de micotoxinas em grãos de milho destinados à produção de ração animal(2023-03-10) Lima, Mauro César Piotto de; Sartori, Daniele; Rodrigues, Elisete Pains; Melo, Marcelo Rodrigues deO milho (Zea mays L.) é um dos mais importantes produtos do agronegócio brasileiro e majoritariamente utilizado para a produção de ração animal. A qualidade do milho depende de características intrínsecas e de práticas adequadas de produção, colheita e armazenamento. A infecção por fungos em grãos de milho é um fator poreocupante devido ao potencial de produção de micotoxinas por algumas espécies, levando a perdas econômicas e danos à saúde animal e humana. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar a incidência de fungos em amostras de grãos de milho (n = 10) destinadas à produção de ração animal e identificar as principais espécies de fungos que infectam os grãos de milho. Todas as amostras avaliadas estavam infectadas com fungos, sendo a maior incidência de Aspergillus sp. (92,8%), seguido de Fusarium sp. (2,9%). Inicialmente as Unidades Formadoras de Colônias (UFCs) foram identificadas morfologicamente, com predomínio de Aspergillus section Aspergillus (80,6 %), seguido por A. section Flavi (16,0 %) e A. section Cremei (3,4 %). Um total de 53 isolados representativos de cada seção e origem foi selecionado para análise do perfil genético resultando em cinco grupos. No grupo I foram alocados os isolados identificados morfologicamente como A. section Flavi, nos grupos II e III, os isolados identificados como A. section Aspergillus, no grupo IV, os isolados identificados como A. section Cremei e no grupo V, os isolados identificados como Fusarium sp. Membros representantes de cada grupo foram identificados pela análise das sequencias das regiões parciais dos genes BenA e CaM. Os membros do grupo I (28 isolados) foram identificados como grupo A. flavus / A. oryzae. Os membros dos grupos II e III foram identificados como A. chevalieri (17 isolados) e A. montevidensis (04 isolados), respectivamente. Os isolados alocados no grupo IV, foram identificados como A. dimorphicus (1 isolado) e A. wentii (1 isolado), enquanto os isolados do grupo V, foram identificados como F. verticillioides (2 isolados). Este foi o primeiro relato de maior incidência de Aspergillus seção Aspergillus em grãos de milho, com predominância de A. chevalieri e A. montevidensis. Esses dados concordam com relatos de maior disponibilidade de água metabólica, favorecendo a infecção e o crescimento de espécies menos xerofílicas e potencialmente produtoras de micotoxinas, como as do grupo A. flavus, segundo incidente mais comum em grãos de milho neste estudo, e F. verticillioides.Item Prospecção de bactérias promotoras de crescimento visando a redução do estresse oxidativo causado pelo déficit hídrico em plantas de tomate(2023-04-14) Silva, Lettícia Marques da; Oliveira, André Luiz Martinez de; Batista, Jesiane Stefania da Silva; Galvão, Carolina WeigertO tomate (Solanum lycopersicum L.) é classificado como uma frutífera, pertencente à família Solanaceae. É uma das olerícolas mais cultivadas no mundo ao lado da batata. Apesar da facilidade de cultivo, a sua produção enfrenta diversas dificuldades, como altas temperaturas, estresse hídrico, solos secos e ácidos. O déficit hídrico é um problema abiótico que tem afetado diversas culturas com maior intensidade. A restrição hídrica sob as plantas causa fechamento dos estômatos, diminuição da taxa fotossintética e, consequentemente, a produção descontrolada de espécies reativas de oxigênio (ROS), causando o estresse oxidativo. Para combater altas concentrações de ROS nas células, as plantas possuem um sistema de defesa, composto por enzimas antioxidantes, como: superóxido dismutase (SOD), peroxidase (POD) e catalase (CAT). Essas enzimas convertem ROS em formas não reativas, diminuindo a sua concentração na planta. Bactérias promotoras de crescimento (PGPB) vêm sendo muito utilizadas nas últimas décadas para diminuir danos causados pelo estresse biótico e abiótico de diferentes culturas. PGPB são microrganismos presentes principalmente na rizosfera de plantas, e atuam positivamente, de forma direta ou indireta, no crescimento vegetal. O objetivo deste trabalho foi identificar bactérias promotoras de crescimento vegetal com potencial para reduzir danos oxidativos decorrentes do estresse hídrico induzido por polietilenoglicol, utilizando plantas de tomate como modelo experimental. Sementes de tomate foram submetidas a germinação em meio ágar-água como controle, e meio ágar- água com adição de polietilenoglicol (PEG) em diferentes concentrações: 0%, 25% e 50% com objetivo de simular o estresse osmótico. Os tratamentos ficaram em câmara de crescimento por 30 dias (25°C/dia 22°C/noite, 16 horas de fotoperíodo e 80% UR). Após esse período, as plântulas foram pesadas para determinar a massa fresca da parte área. As análises para determinação de peróxido de hidrogênio (H2O2), proteínas solúveis totais, atividade de superóxido dismutase e peroxidase foram realizadas em espectrofotômetro. Os dados foram submetidos ao teste não paramétrico de Kruskal - Wallis e as médias foram comparadas pelo teste de Dunn a 5% de probabilidade. Os isolados B5 – Herbaspirillum sp. (114), B6 – Trinickia sp. (24), B7 – Bacillus sp. (4) e B8 – Bacillus sp. (145) demonstraram boa capacidade em induzir a planta a tolerar o déficit hídricoItem Caracterização de uma coleção de bactérias associativas e seleção de estirpes com potencial de mitigar o estresse hídrico utilizando o tomate (“solanum lycopersicum”) como modelo experimental(2023-03-13) Serqueira, Juliana Marques; Oliveira, André Luiz Martinez de; Melo, Marcelo Rodrigues de; Oliveira, Admilton Gonçalves de; Rodrigues, Elisete PainsExistem estimativas de aumento significativo na temperatura atmosférica para os próximos anos, juntamente com alterações no regime pluvial que resultem na frequência de eventos extremos como seca e enchentes. A ocorrência frequente de eventos extremos de seca causa grande preocupação para o setor agropecuário, uma vez que a menor disponibilidade hídrica no solo resulta em consequências negativas diretas para o crescimento e produtividade das plantas. Pensando nisso, esse trabalho teve como objetivo caracterizar 129 isolados bacterianos selecionados a partir de uma coleção de isolados bacterianos previamente obtida a partir de plantas jovens de espécies arbóreas nativas da Mata Atlântica, na busca por microrganismos capazes de mitigar o efeito negativo do estresse hídrico sobre o desenvolvimento de plantas. Os isolados selecionados para este estudo compunham grupos filogenéticos sem potencial patogênico, e sua caracterização envolveu atributos relacionados com a promoção de crescimento vegetal: produção de compostos indólicos, capacidade de solubilização de fosfato de ferro, biossíntese de sideróforos, formação de biofilme e tolerância ao estresse hídrico. Com base nesta caracterização, e capacidade de mitigar o estresse hídrico a fim de prospectar estirpes candidatas para desenvolver um bioinsumo. Foram identificadas as 10 estirpes mais tolerantes ao estresse osmótico, que foram utilizadas em um ensaio de inoculação em sementes de tomate (Solanum lycopersicum). Estas plantas foram cultivadas em câmara de crescimento por 30 dias sob diferentes concentrações de polietilenoglicol (PEG) para simular o estresse hídrico, sendo avaliadas quanto ao acúmulo de prolina nas raízes e biomassa de raízes. Na ausência de estresse osmótico, cinco dos dez isolados avaliados promoveram incremento na massa fresca de raízes (19,1% a 190,4%) e cinco isolados promoveram incremento no conteúdo de prolina (25,6% a 332,8%) em comparação aos valores obtidos de plantas não inoculadas, com destaque para Bacillus spp. estirpe 112R1CT que promoveu incremento em ambas as variáveis. Na presença de estresse osmótico moderado (250 g PEG L-1), todas as estirpes inoculadas promoveram incremento na biomassa fresca de raízes (53,9% a 348,3%) e redução no conteúdo de prolina (13,8% a 81,4%). Nesta condição, houve destaque para as estirpes Herbaspirillum spp. 114JL e Bacillus spp. 145CT, que promoveram incrementos superiores a 300% na biomassa de raízes e redução de quase 80% no conteúdo de prolina. Sob estresse osmótico elevado (500 g PEG L-1), sete estirpes foram capazes de aumentar a massa fresca de raízes (incrementos de 44,4% a 388,9%), com grande variação nos teores de prolina conforme a estirpe inoculada. As estirpes Herbaspirillum spp. 114JL e Trinickia spp. 24JL, promoveram os maiores aumentos na biomassa de raízes de plantas crescidas sob estresse osmótico elevado (incrementos de 388,9% e 308,3% respectivamente). Em conjunto, os resultados sugerem que as estirpes Herbaspirillum spp. 114JL, Trinickia spp. 24JL e Bacillus spp. 145CT possuem potencial para o desenvolvimento de um novo bioinsumo voltado ao aumento da tolerância de plantas ao estresse hídrico. Além disso, a proteção contra o estresse hídrico promovida pelas estirpes mais promissoras parece não estar relacionada com o aumento nos teores de prolina dos tecidos radicularesItem Caracterização e expressão dos genes da família NAC sobre estresse hídrico em Arabidopsis thaliana e Glycine max(2024-04-08) Souza, Enya Maria Gois de; Henning, Liliane Marcia Mertz; Sartori, Daniele; Moraes, Larissa Alexandra CardosoA soja, originária do continente asiático, vem cada vez mais ganhando espaço e importância. Atualmente, o Brasil vem se destacando como o principal produtor global de soja, contudo, a cultura enfrenta desafios substanciais associados a estresses bióticos e abióticos, sendo a seca particularmente proeminente. Para mitigar os efeitos adversos da seca, uma abordagem central é a seleção e desenvolvimento de variedades de soja que apresentem maior tolerância à escassez de água. Essa estratégia requer uma compreensão aprofundada dos mecanismos moleculares subjacentes à resposta das plantas ao estresse hídrico. Estudos recentes identificaram fatores de transcrição NAC, como elementos fundamentais na modulação da tolerância ao estresse hídrico e no desenvolvimento das plantas. Tais fatores exercem influência sobre a expressão gênica e os processos fisiológicos que capacitam as plantas a enfrentarem condições adversas de seca. A elucidação desses mecanismos não apenas amplia o entendimento da soja, mas também abre perspectivas promissoras para o avanço de estratégias biotecnológicas direcionadas à criação de variedades de soja mais robustas e adaptadas às condições de estresse hídrico. Os resultados destacam uma regulação diferencial dos genes NAC, sobressaindo-se o aumento significativo na expressão dos genes ANAC 105/NAC 76.2 e ATAF 1/NAC 2.2 na cultivar BR 16, sensível à seca, além de um incremento aproximado de 16,5% na expressão do gene ANAC 40/NAM na cultivar Embrapa 48, reconhecida pela sua tolerância à escassez hídrica. Tais descobertas conferem importantes subsídios para o delineamento de estratégias de melhoramento genético destinadas a aprimorar a tolerância à seca na soja, potencialmente contribuindo para a garantia da segurança alimentar e a sustentabilidade agrícolaItem Acetilação de celulose extraída de resíduos da agroindústria(2022-02-21) Paiva, Mayara Thamela Pessoa; Oliveira, Suzana Mali de; Mantovan, Janaina; Garcia, Patrícia SalomãoO acetato de celulose (AC) é o derivado éster da celulose mais empregado industrialmente, e a modificação química através (via) da acetilação da celulose extraída de resíduos lignocelulósicos se configura como uma alternativa em potencial para a valorização destes resíduos. O método padrão de acetilação utiliza os ácidos sulfúrico e acético, como catalisador e solvente, respectivamente. Sendo assim, os objetivos desse trabalho foram produzir AC a partir da celulose extraída de dois resíduos, a casca de aveia (CA) e a casca de soja (CS), empregando o método de acetilação homogênea convencional e propor um processo hidrotérmico alternativo, visando uma rota eco-amigável, livre de solvente e catalisador. O AC obtido foi caracterizado quanto ao grau de substituição (GS), massa molar viscosimétrica (Mv), solubilidade, hidrofobicidade, capacidade de absorção de óleo (CAO), molhabilidade, espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FT-IR) e sua morfologia. A celulose foi extraída na presença do ácido peracético (APA), o quê resultou em um aumento do teor de celulose de 15,14% para 85,58% na celulose da CA, e de 37,78% para 79,52% na celulose da CS. Através da acetilação homogênea e hidrotérmica da celulose da casca de aveia (CEA) foi possível obter-se monoacetatos e diacetatos, com GS variando de 1,62 a 2,50. Para a celulose da casca de soja (CES), na acetilação homogênea foram obtidos em maioria triacetatos, com GS em torno de 2,70 a 2,86 e, no processo hidrotérmico, todos os materiais foram caracterizados como monoacetatos, com GS variando de 1,58 a 1,91. A modificação da celulose, por ambos os métodos foi confirmada através do surgimento de banda característica no espectro de FT-IR em 1750 cm-1, que foi atribuída ao alongamento da ligação C - O do grupo éster. Constatou-se o aumento da Mv dos AC, para os ambos os métodos de acetilação, com variações de 16,26 a 519,70% em ganho de massa. Além disso, a inserção de novos grupos funcionais diminuiu a cristalinidade, aumentou a hidrofobicidade das amostras, alterando sua molhabilidade, aumentando a CAO e solubilidade em diversos solventes orgânicos. Portanto, ambos os métodos empregados se mostraram eficientes em modificar a celulose extraída das CA e CS, e o processo hidrotérmico se mostrou uma alternativa viável para a produção de acetato de celuloseItem Desenvolvimento de gel de nanocelulose com ácido hialurônico e nanopartículas de prata com propriedades antibacterianas(2022-05-18) Modesto, Mirian; Tischer, César Augusto; Kobayashi, Renata Katsuko Takayama; Oliveira, Suzana Mali de; Nakazato, GersonO presente trabalho refere-se ao desenvolvimento de um gel compósito de liberação sustentada, tópico hidrofílico composto por nanocelulose, ácido hialurônico, sorbato de potássio e nanopartículas de prata. O compósito constituído entre nanocelulose e ácido hialurônico tem a característica de formar uma rede hidrofílica capaz de reter grandes quantidades de água, se tornando semelhante aos tecidos biológicos e com capacidade de incorporar agentes com finalidade especificas, dando origem a eficientes sistemas de liberação. Nanopartículas de prata, exibem um conjunto de mecanismos de ação antimicrobiana, de forma aprimorada e apresentando amplo espectro contra várias cepas de bactérias e outros patógenos, com efeito de longa duração em baixas concentrações, o que limita relativamente a toxidade da prata para as células humanas. Neste estudo, foi avaliada a atividade antibacteriana das AgNPs quimicamente sintetizadas frente a bactéria Gram-negativa Pseudomonas aeruginosa. A atividade antibacteriana foi avaliada utilizando técnicas de disco-difusão em ágar, microdiluição seriada em caldo para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM), e curva de tempo de morte. As nanopratas foram caracterizadas pelas técnicas de microscopia eletrônica de varredura (MEV), Espectroscopia Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR), Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) e Espectroscopia na Região do Ultravioleta-visível (UV vis). Pelas imagens da MEV, se constatou que o compósito apresentou arranjo randômico, tridimensional e com preenchimento de toda a rede de nanofibrila da celulose. Pelos ensaios de atividade antimicrobiana, CIM apresentou valor de 1,5 µg/mL e efeito bactericida. O ensaio de Curva de morte constatou que o agente teve efeito bacteriostático com 1 hora de ação e em 3 horas cessou o crescimento bacteriano. O gel formulado exibiu grande potencial para aplicação como bactericida, em baixas concentrações do ativo sendo proposto como alternativa para o tratamento e controle de infecções causados por P. aeruginosa usando nanopartículas de prata como agente antimicrobianoItem Hidrogéis biodegradáveis superabsorventes: processo de produção, caracterização e potencial de aplicação na agricultura(2024-02-28) Kishima, João Otávio Ferraro; Oliveira, Suzana Mali de; Oliveira, André Luiz Martinez de; Beluci, Natália de Camargo Lima; Mantovan, JanainaOs indícios das mudanças climáticas e dos impactos relacionados ao uso extensivo de materiais sintéticos não biodegradáveis são cada vez mais evidentes. Os seus prejuízos vão além da destruição da fauna e flora, incluindo também a inutilização, quase permanente, de recursos hídricos e terrestres, bem como o aumento da insegurança alimentar. Sabendo disso, a busca por soluções para esses problemas se mostra de extrema urgência. Biopolímeros, são materiais poliméricos de fonte renovável, que apresentam grande aplicabilidade para a produção de hidrogéis, materiais poliméricos tridimensionalmente reticulados, com elevada capacidade de absorção de água. A extrusão reativa é uma tecnologia que pode ser empregada para a obtenção de novos materiais e misturas poliméricas, usando processos que ocorrem na ausência de solventes e efluentes, geralmente em etapa única, e em um curto espaço de tempo. O estudo teve como objetivo, produzir e caracterizar hidrogéis biodegradáveis superabsorventes para uso na agricultura a partir das misturas de diferentes biopolímeros (amido, gelatina, celulose, e goma xantana) e glicerol como plastificante, empregando-se o processo de extrusão reativa em etapa única e ácido cítrico como agente reticulante. Foram obtidos hidrogéis no formato de pellets, com a capacidade de absorver entre 187% a 492% o seu peso em água. O processo de extrusão reativa foi capaz de induzir novas ligações, ésteres e amidas, evidenciadas pelas bandas características na espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). O uso do ácido cítrico como agente reticulante se mostrou eficiente, e o maior teor de ácido cítrico (3%) levou à obtenção de amostras com maior grau de intumescimento, além disso a porosidade da sua estrutura interna parece ter favorecido o maior intumescimento. Nos ensaios preliminares de aplicação, verificou-se que quando a formulação com maior teor de ácido cítrico foi empregada, a concentração de 5% do hidrogel em solo aumentou significativamente a capacidade de retenção de água do solo e resultou na maior taxa de germinação das sementes de milho testadas. O processo de extrusão se mostrou eficiente na obtenção de hidrogéis biodegradáveis, com as vantagens de ser um processo escalonável e ambientalmente amigávelItem Estratégias de controle pré e pós colheita da contaminação por micotoxinas em grãos de milho (Zea mays L.)(2011-05-23) Souza, Aline Francisca de; Ono, Elisabete Yurie Sataque; Yabe, Maria Josefa Santos; Zucareli, ClaudemirO milho (Zea mays L.) é um cereal de importância econômica mundial, caracterizado pela alta qualidade nutricional, que o torna susceptível à contaminação por fungos toxigênicos, como Fusarium spp. A contaminação pode ocorrer no campo, durante o desenvolvimento dos grãos, ou no período de colheita, reduzindo a qualidade do grão, além da produção de metabólitos secundários tóxicos (micotoxinas), que causam graves doenças em seres humanos e animais. A prevenção na pré-colheita constitui o melhor método para controlar a contaminação por micotoxinas, porém quando ocorre a contaminação, os riscos associados a toxinas devem ser controlados por procedimentos pós-colheita. No presente trabalho foi avaliada a contaminação fúngica e fumonisinas em diferentes cultivares de milho (Asteca, Caiano, IPR 114 e DKB 390), submetidos à adubação orgânica (cama de frango), mineral (NPK) e controle (sem adubação) e a utilização de um híbrido de milho (Mon 810) submetido à adubação fosfatada (superfosfato triplo, fosfato de gafsa, fosfato de itafós e a mistura superfosfato triplo e fosfato de gafsa, superfosfato triplo e fosfato de itafós e testemunha) com e sem a aplicação de inoculante (Pseudomonas fluorescens). Paralelamente foi realizada a otimização da remoção de desoxinivalenol (DON) in vitro por sorventes orgânico (ß-glucana) e inorgânico (carvão ativado). O experimento das diferentes cultivares submetidas à adubação orgânica, mineral e controle foi conduzido sob delineamento experimental de blocos casualizados em esquema fatorial (4x3) nas safras de 2009 e 2010, totalizando 96 parcelas, enquanto o experimento com a cultivar submetida a diferentes fontes de fertilizantes fosfatados foi realizado em blocos casualizados, esquema fatorial (6x2) na safra de 2010, totalizando 48 parcelas. Os resultados foram avaliados por Analise Estatística de Componentes Principais (ACP). A otimização da remoção de DON por sorventes orgânico e inorgânico in vitro foi realizada por meio de um planejamento estatístico 24 e os resultados foram avaliados por meio da análise de variância ANOVA e Metodologia de Superfície de Resposta (MSR). No tratamento com adubação orgânica e mineral, utilizando diferentes cultivares, a contaminação por Fusarium spp. e Penicillium spp. foi detectada em 83 % e 100 % das amostras na safra 2009 e em 100 % e 69 % das amostras na safra 2010, respectivamente. Aspergillus spp. foi detectado somente na safra 2009 em 14,5 % das amostras. As maiores médias de contaminação por fumonisinas (FB1 + FB2) foram detectadas nas cultivares Asteca (4,59 µg/g), Caiano (3,04 µg/g) e IPR 114 (4,04 µg/g), enquanto que nos tratamentos com adubações, as amostras submetidas à adubação orgânica apresentaram maior média de contaminação por fumonisinas (3,74 µg/g) quando comparada com os tratamentos sem adubação (3,15 µg/g) e adubação mineral (2,18 µg/g). A cultivar DKB 390, aliada ao tratamento com adubação mineral, apresentou menores níveis de fumonisinas (FB1 + FB2). Na aplicação de adubação fosfatada com e sem a aplicação de inoculante (P. fluorescens), na safra de 2010, Fusarium spp. e Penicillium spp., foram detectados em 77 % e 75 % das amostras, respectivamente. As maiores médias de Fusarium spp. foram detectadas nos tratamentos testemunha, com (2,6 x 104 UFC/g) e sem (3,4 x 104 UFC/g) a aplicação de inoculante (P. fluorescens). A FB1 e FB2 foram detectadas em 100 % e 75 % das amostras, respectivamente. As maiores médias de fumonisinas (FB1+ FB2) foram detectadas nos tratamentos sem P. fluorescens (de 0,18 a 1,12 µg/g), enquanto que os tratamentos com a aplicação de P. fluorescens apresentaram a menor média de contaminação por fumonisinas (de 0,08 a 0,83 µg/g). Quanto às diferentes fontes de fertilizantes fosfatados, a menor 6 contaminação por fumonisinas (0,17 µg/g) foi detectada no tratamento com a aplicação do fosfato solúvel (Superfosfato triplo), fato que pode estar relacionado à disponibilidade imediata desse nutriente para a planta. Nos testes de sorção de desoxinivalenol (DON) in vitro, no modelo do planejamento estatístico 24 a maior percentagem de sorção ocorreu com a utilização de 2 % de carvão ativado e ß-glucana na proporção 70:30 (>95,6 %), nos tempos de incubação de 30, 60 e 90 minutos. As menores sorções foram detectadas utilizando 0,2 % de carvão ativado e ß-glucana na proporção 0:100 (de 14,4 % a 77,3 %). Os valores de pH (3,0, 5,0 e 7,0) não influenciaram no processo de sorção de DON in vitro. A mistura dos dois sorventes (carvão ativado e ß-glucana) na concentração de 2 % foi eficaz na faixa de pH entre 3,0 e 7,0, cobrindo a faixa encontrada no trato gastrointestinal de animais ruminantes e monogástricos, sugerindo seu potencial para minimizar o risco de contaminação por DON. A contaminação de milho por micotoxinas no campo pode ser reduzida por meio de práticas agrícolas (seleção de cultivares e aplicação de fertilizantes). Quando a contaminação em campo é inevitável, práticas de descontaminação, como a aplicação de sorventes podem ser aplicadas a fim de minimizar os riscos à saúde animal.