02 - Mestrado - Biotecnologia
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Navegando 02 - Mestrado - Biotecnologia por Autor "Baldani, José Ivo"
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Item Desenvolvimento de meios de cultivo e formulações inoculantes para Azospirillum brasiliense AbV5Marcelino, Paulo Ricardo Franco; Oliveira, André Luiz Martinez de [Orientador]; Oliveira, Suzana Mali de; Baldani, José IvoResumo: A utilização de inoculantes bacterianos em cultivos comerciais com leguminosas é uma prática conhecida e empregada há longo tempo e o substrato mais utilizado até o momento tem sido a turfa Diversos tipos de formulações inoculantes que existem no mercado visam oferecer uma alternativa ao emprego da turfa, principalmente devido à variabilidade na composição deste veículo oriundo de diferentes depósitos e a sua característica não renovável Com o objetivo de produzir inoculantes bacterianos de alto desempenho para veiculação de bactérias promotoras do crescimento vegetal, foram desenvolvidas formulações para a produção de biomassa celular de Azospirillum brasilense AbV5 e formulações inoculantes sólidas e líquidas, avaliando a sobrevivência de Azospirillum brasilense AbV5 durante o armazenamento nestas formulações Através de um planejamento fatorial 24 com 3 réplicas no ponto central foram desenvolvidas formulações de meio de cultivo para a produção de biomassa de A brasilense AbV5 Os meios Form1 e Form15 mostraram-se promissores, pois, foram capazes de promover uma elevada densidade celular (11 células/mL) e apresentaram elevador teor de exopolissacarídeos e reserva energética intracelular, possivelmente grânulos de poli-ß-hidroxibutirato (PHB) As seis formulações de veículos sólidos foram obtidas pelo processo de extrusão a quente O material extrusado (biocompósitos) foi embalado em pacotes de celofane com dimensões de 1, x 7, cm e esterilizado por calor seco à 16 ºC por 4 horas em estufa Após a esterilização, estes biocompósitos apresentaram pH entre 6,8 e 7,29, densidade de ,237 a ,278 g/cm3, índice de expansão (IE) de ,938 a 1,45 e capacidade ou índice de absorção de água, após 6 minutos de imersão, variando entre 1,8 e 2,75 g água/g amostra Os inoculantes sólidos baseados nos biocompósitos foram preparados pela adição de biomassa de A brasilense AbV5 crescida em meio Form15 por 36 horas, diluída e inoculada nas 6 formulações sólidas em uma densidade celular de aproximadamente 17 cél/g; a sobrevivência bacteriana foi monitorada nestes inoculantes por 12 dias O biocompósito de formulação 5 mostrou-se altamente promissor, proporcionando a manutenção de uma densidade de 16 cél/g ao final de 12 dias de monitoramento Formulações inoculantes líquidas foram preparadas utilizando biomassa celular produzida em diferentes condições de cultivo: cultivo no meio Form1 por 12 horas; cultico no meio Form15 por 12 horas; cultivo no meio Dyg’s por 12 horas;e cultivo no meio Form15 por 36 horasA densidade celular inicial para as formulações líquidas foi de aproximadamente 19 cél/mL, e após 12 dias de monitoramento da densidade de células viáveis nos inoculantes pode-se observar que a formulação preparada a partir de meio Dyg’s apresentou o melhor desempenho, mantendo 17 cél/mL As formulações desenvolvidas nesse trabalho representam um grande potencial para o desenvolvimento de novos produtos para a agriculturaItem Isolamento de bactérias promotoras do crescimento vegetal usando milho como planta-isca para a obtenção de isolados especializadosCosta, Karita dos Reis; Oliveira, André Luiz Martinez de [Orientador]; Baldani, José Ivo; Nogueira, Marco AntonioResumo: Estudos sobre a diversidade microbiológica associada a plantas sadias de milho são de grande relevância para a elucidação da interação microrganismo-planta e por possibilitar a identificação de isolados eficientes na promoção do crescimento de plantas com aplicação potencial no desenvolvimento de insumos biotecnológicos Bactérias diazotróficas representam um componente importante no suprimento de nitrogênio em diversos ecossistemas, e, além de contribuírem para a fixação biológica do nitrogênio (FBN), promovem o desenvolvimento de plantas a partir da produção de outras substâncias, como o AIA, ezimas líticas, solubilização de fosfato entre outros O desenvolvimento de uma metodologia específica para o isolamento de bactérias promotora do crescimento vegetal (BPCVs) pode ser alcançado a partir do conhecimento sobre a ecologia deste grupo bacteriano e as estratégias utilizadas para isolar simbiontes altamente eficientes O conhecimento da diversidade de BPCV em solos sob diferentes tipos de uso pode fornecer indicativos dos melhores sítios de prospecção de isolados-elite, bem como identificar estratégias de manejo que favoreçam a ocorrência deste grupo bacteriano nos solos de cultivo agrícola Este trabalho experimentou quatro tipos de solos para o isolamento seletivo de bactérias com potencial associativo a plantas de milho, de onde obteve-se 63 isolados diazotróficos e que apresentaram grande diversidade filogenética, com dominância do filo Proteobacteria A estratégia do uso da armadilha fisiológica utilizando o milho como planta-isca foi eficiente para o isolamento de estirpes associativas presentes em populações acima de 16 células por grama de tecido vegetal Através desta abordagem, isolados bacterianos compatíveis para a associação com plantas de milho puderam ser obtidos mesmo quando presentes em populações relativamente pequenas em solo nativo Os isolados obtidos foram caracterizados bioquimicamente quanto à produção de AIA, enzimas líticas, solubilização de fosfatos e atividade antagonista, como também quanto à capacidade de promover o desenvolvimento inicial de plantas de milho Não houve relação entre os parâmetros bioquímicos de cada isolado com o efeito que estes apresentaram sobre o comprimento da raiz principal de milho, porém, foi possível identificar dentre os isolados, aqueles que promoveram efeitos de estimulação e de inibição sobre o desenvolvimento inicial de plantas Quatro isolados foram selecionados por reunir características desejáveis para a promoção do crescimento vegetal com incrementos significativos na emergência de raiz principal de plântulas de milho: 23AGR2, 11AGR1, 36GRM1 e 48GRM1 Estas estirpes foram isoladas a partir de raízes de milho cultivado em solos com diferentes diluições, caracterizando a eficiência da metodologia de armadilha fisiológica proposta neste trabalho