Avaliação da atividade antiproliferativa e metabólica do óleo essencial de orégano (Origanum vulgare L.) em células trofoblásticas BeWo infectadas com a cepa RH de Toxoplasma gondii
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Nunes, Angélica Paulina
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Resumo
Resumo: A toxoplasmose é uma doença causada pelo protozoário Toxoplasma gondii Possui importância na saúde pública principalmente por promover, muitas vezes, quadros graves na infecção congênita O tratamento atual limita-se ao uso de espiramicina ou associação de sulfadiazina, pirimetamina e ácido folínico Os efeitos tóxicos causados pelos fármacos, levam à necessidade de novas estratégias terapêuticas Assim, o óleo essencial de orégano (Origanum vulgare L) (OEO) apresenta-se como uma alternativa promissora devido ao seu potencial antibacteriano, antifúngico e antiparasitário O objetivo deste trabalho foi analisar a capacidade antiproliferativa e mecanismos de ação diretos do OEO em taquizoítos de T gondii (cepa RH) Para investigar a toxicidade do OEO em células BeWo foi realizado o ensaio de MTT utilizando concentrações de ,7 a 15 µg/mL Para avaliar a viabilidade de taquizoítos após tratamento com OEO utilizou-se método de exclusão por azul de tripan Em seguida, foram calculados a concentração citotóxica (CC5), inibitória (CI5) e índice de seletividade (IS) A atividade antiproliferativa do tratamento com OEO foi determinada pelos índices de infecção e proliferação intracelular do parasito tratados com OEO utilizando concentrações 6,2; 12; 25 e 5 µg/mL e confirmados pela microscopia de luz por meio da coloração de azul de toluidina Os mecanismos envolvidos na morte direta do parasito também foram avaliados, sendo eles, níveis de espécies reativas de oxigênio (ERO), potencial de membrana mitocondrial e gotículas lipídicas A apoptose e a permeabilização da membrana plasmática foram investigados por citometria de fluxo através da marcação com Anexina-V e iodeto de propídio, além de autofagia por monodansilcadaverina Para avaliar topologia (SEM) e ultraestrutura (TEM) foram realizadas análises de microscopia eletrônica de varredura e transmissão O tratamento com OEO apresentou baixa citotoxicidade nas células BeWo (CC5 de 114,8 µg/mL ± ,1), redução da viabilidade de taquizoítos (CI5 de 12,5 ± ,6 µg/mL), e IS de 9,18 Houve redução da proliferação intracelular de 55% e 84% nas concentrações de 25 e 5 µg/mL, respectivamente Em taquizoítos livres, o tratamento causou aumento dos níveis de EROs, despolarização da membrana mitocondrial e formação de gotículas lipídicas, bem como tumefação da mitocôndria observadas em TEM Estas alterações estão atreladas à indução do processo de autofagia e permeabilização de membrana plasmática, com extravasamento do conteúdo citoplasmático e alterações nucleares, confirmadas através de TEM e SEM, culminando em um processo de morte celular O tratamento com OEO demonstrou atividade anti-T gondii direcionando a morte do parasito por alterações metabólicas sem causar toxicidade às células, podendo ser um composto promissor no tratamento da toxoplasmose
Descrição
Palavras-chave
Toxoplasmose, Toxoplasmose, Tratamento alternativo, Toxoplasmose, Tratamento, Toxoplasmosis - Alternative treatment, Toxoplasmosis - Treatment - Essential oil of oregano (Origanum vulgare L.)