Desenvolvimento de método para diagnóstico da paracoccidioidomicose humana utilizando antígeno recombinante de Paracoccidioides brasiliensis
Arquivos
Data
Autores
Assunção, Tatiana Reichert da Silva
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Resumo
Resumo: Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada por Paracoccidioides brasiliensis É considerada a micose sistêmica de maior prevalência na América do Sul, principalmente no Brasil, o qual apresenta o maior número de casos A glicoproteína de 43 kDa, gp43, é o principal antígeno utilizado no diagnóstico e epidemiologia da PCM O objetivo deste trabalho foi produzir gp43 recombinante na forma solúvel para utilização no diagnóstico de PCM humana Para a produção da proteína recombinante, primeiramente o gene gp43 foi clonado em vetor de expressão pETTEV Algumas construções do gene neste vetor foram feitas com a finalidade de obter melhor expressão e solubilidade da proteína Para isso, foram realizadas estratégias para deleção de 2 aminoácidos das regiões N-terminal e/ou C-terminal A proteína, com deleção na região N-terminal (gp43?Nt), foi produzida em E coli BL21 e purificada por cromatografia de afinidade Sua reatividade foi avaliada empregando-se soros de pacientes com PCM A gp43?Nt, apesar de ter sido obtida na forma insolúvel, apresentou semelhanças em relação à gp43 nativa e foi reconhecida por soros de pacientes com PCM nos testes de ELISA indireto, Western blot e dot blot Os melhores resultados foram observados quando utilizada em dot blot, apresentando 1% de correlação com o teste de Imunodifusão Radial Dupla (IDRD) que é o método mais usado no diagnóstico da micose Portanto, o teste de dot blot com gp43?Nt pode ser útil no diagnóstico da PCM em humanos
Descrição
Palavras-chave
Paracoccidioidomicose, Diagnóstico, Paracoccidioides brasiliensis, Antígenos de fungos, Micoses fungóides, Diagnosis, Fungal antigens, Fungoid mycosis, Paracoccidioidomycosis