Candida spp. isoladas da mucosa bucal de pacientes portadores de HIV : identificação, expressão de fatores de virulência e sensibilidade às substâncias antifúngicas
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Paula, Suelen Balero de
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Resumo: A introdução da terapia antirretroviral associada aos inibidores de protease (IP) reduziu a ocorrência de infecções oportunistas em indivíduos portadores do HIV (Human immunodeficiency virus) Contudo, a candidíase orofaríngea continua sendo a infecção fúngica oportunista mais frequente nesses indivíduos A sensibilidade variada e a emergência de isolados resistentes aos antifúngicos entre essas espécies reforçam a necessidade de um diagnóstico microbiológico específico para essas infecções Além disso, a resistência apresentada pelo biofilme à maioria dos fármacos justifica o estudo de novas substâncias com potencial antifúngico Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi identificar, e caracterizar leveduras isoladas da cavidade bucal de pacientes HIV positivos quanto a: sensibilidade a nistatina e fluconazol; expressão dos fatores de virulência; efeito do eugenol sobre células planctônicas e sésseis de Candida dubliniensis e Candida tropicalis Amostras de enxágue bucal de 244 pacientes foram utilizadas nesse trabalho Do total de pacientes, 5,41% estavam colonizados por Candida spp, sendo que 11 pacientes apresentaram co-colonização por duas espécies Candida albicans (1) foi a espécie mais prevalente, correspondendo a 74,1% dos isolados Outras espécies foram isoladas de 35 pacientes, sendo 27 C glabrata, 2 C krusei, 3 C tropicalis e 3 C dubliniensis A maioria dos isolados (59,26%) foi considerada sensível ao fluconazol, 22,96% e 18,52% dos isolados foram considerados sensíveis dose-dependente e resistentes ao fluconazol, respectivamente A maioria dos isolados (86,7%) apresentou CIM entre 2 e 4 µg/mL e 14,15% apresentaram entre 8 e 128 µg/mL para a nistatina A média relativa de HSC (hidrofobicidade da superfície celular) analisada pelo método bifásico, utilizando xileno como hidrocarboneto, foi de 63,47 ± 21,48 e a maioria dos isolados (54,81%) foi classificada como altamente hidrofóbicos Todos os isolados foram capazes de formar biofilme na superfície de poliestireno, entretanto foi observada maior atividade metabólica em biofilmes formados por isolados de C tropicalis Cinco isolados não apresentaram atividade proteolítica em presença de albumina de soro bovino (BSA), entretanto 48,89%, 36,29% e 11,11% apresentaram alta, intermediária e baixa atividade de protease, respectivamente Somente 36,29% dos isolados apresentaram atividade de fosfolipases extracelulares em presença de gema de ovo como substrato A hemólise completa de sangue de carneiro foi observada em apenas 17,4% dos isolados Foi possível verificar, por PCR em tempo real, uma redução significativa na expressão das SAP2 de C albicans isoladas de pacientes em tratamento com os IP quando comparados com aqueles sem esse tratamento O eugenol apresentou atividade sobre células planctônicas, sobre a formação de biofilme e biofilme maduro, sendo que o tratamento com o eugenol reduziu drasticamente a quantidade de células sobre as superfícies O tratamento com o eugenol foi capaz de reduzir a CSH, a adesão em células Hep-2 e em poliestireno Além disso, o tratamento com o eugenol reprimiu a expressão dos genes ALS Os resultados corroboram a importância da identificação e análise do perfil de sensibilidade aos antifúngicos para o planejamento terapêutico adequado para cada paciente
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Palavras-chave
Candida albicans, Virulência (Microbiologia), Drogas, Resistência em microorganismos, HIV (Vírus), Virulence (Microbiology), Drug resistance in micro-organisms, Anti-infective agents, AIDS virus