Toxoplasma gondii : comparação das técnicas de diagnóstico direto e indireto em galinhas caipiras
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Minutti, Ana Flávia
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Resumo
Resumo: Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular cosmopolita que pode infectar todos os animais de sangue quente inclusive o homem A prevalência da infecção em galinhas caipiras é um bom indicador da presença deste parasito no ambiente Este trabalho teve como objetivo comparar diferentes técnicas de diagnóstico direto e indireto para detectar Toxoplasma gondii em galinhas caipiras criados no Norte do Paraná As técnicas de reação de imunofluorescência indireta (RIFI), aglutinação modificada (MAT) e o ensaio imunoenzimático (ELISA) foram utilizados para a detecção de anticorpos contra T gondii As aves que apresentaram reação positiva em pelo menos uma das provas sorológicas tiveram um “pool” de órgãos (coração, cérebro, pulmão e fígado) utilizados para isolamento do agente por meio do bioensaio em camundongos Os sangues totais e tecidos (coração, cérebro, pulmão e fígado), bem como, o material da digestão péptica das galinhas positivas ao bioensaio foram submetidos à reação em cadeia pela polimerase (PCR) para comparar os marcadores PCR-529pb convencional, Nested-PCR ITS1, e qPCR-529pb Amostras de 386 frangos foram obtidas em 24 propriedades do Paraná Cento e dezenove aves (3,8%) foram positivas em pelo menos uma das provas sorológicas, sendo 12 (26,4%) na RIFI, 64 (16,6%) no MAT, e 62 (16,%) no ELISA A RIFI foi utilizada como padrão ouro, sendo que o MAT apresentou maior sensibilidade (46,%) e especificidade (94,%) A realização das provas sorológicas em paralelo demonstrou ser uma boa opção de triagem para o diagnóstico de T gondii em tecidos de galinhas Nos testes de PCR, o marcador 529pb detectou o DNA do T gondii em 3% (27/9), em ITS1 38,8% (35/9) e em qPCR 4,% (36/9) das amostras Como padrão ouro o qPCR-529pb, a sensibilidade foi maior em ITS1 Nested-PCR, 69,4% e especificidade em PCR-529pb convencional 9,7% O MAT e o ELISA tiveram similaridade nas análises de concordância Dos 18 isolados o órgão que obteve maior positividade foi o coração, seguido do cérebro
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Palavras-chave
Ave doméstica, Doenças, Toxoplasmose em animais, Sorodiagnóstico, Reação em cadeia de polimerase, Diseases, Toxoplasmosis in animals, Poultry