Caracterização de cepas de rotavírus humanos em cultura de células
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Santos, Alessandra Cristina Soares dos
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Resumo
Resumo: O rotavírus é um patógeno comum, principal causador de gastroenterite em crianças em todo o mundo, acometendo, principalmente, crianças abaixo de 24 meses de idade A infecção é responsável por aproximadamente 45% das doenças diarréicas severas em bebês e crianças, tanto em países desenvolvidos quanto em países em desenvolvimento Este trabalho foi proposto no sentido de isolar/adaptar cepas de rotavírus humano em cultura de células MA-14 (rim fetal de macaco verde africano), a partir de amostras de campo Para este propósito utilizou-se culturas de células em tubos de vidro, inoculadas com materiais fecais positivos para rotavírus, clarificados e descontaminados Cinqüenta e três extratos fecais clarificados foram inoculados em cultura de células, sendo que os materiais foram submetidos à no mínimo três passagens cegas sucessivas, para permitir a adaptação, antes de considerá-las não adaptáveis A comprovação do isolamento das cepas foi realizada através de: a) observação do efeito citopático (ECP), b) reação de imunofluorescência indireta (RIF), c) ensaio de plaque (EP) e reação em cadeia da polimerase associada à transcriptase reversa (RT-PCR) Doze amostras processadas apresentaram resultados compatíveis com a adaptação viral em cultura de células, demonstrado através do efeito citopático (ECP) típico de rotavírus, além da apresentação de fluorescência específica granular e de distribuição, predominantemente, perinuclear nas culturas submetidas à RIF O isolamento viral foi também comprovado através da capacidade das cepas desenvolverem plaques, assim como pela possibilidade das cepas serem amplificadas por RT-PCR O EP possibilitou ainda a demonstração de plaques com variação de diâmetro
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Palavras-chave
Microbiologia, Rotavírus, Células, Cultura e meios de cultura, Microbiology, Cell culture, Gastroenteritis