Análise da expressão de fatores de transcrição relacionados com tolerância à seca em raízes de soja
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Resumo
Resumo: Eventos de seca têm aumentado nas últimas décadas, provavelmente associados às mudanças climáticas decorrentes do aquecimento do planeta Atualmente as perdas provocadas pelo déficit hídrico constituem um problema grave na produção de grãos Centenas de genes estão envolvidos na resposta a estresses abióticos e a análise da expressão destes genes demonstra a existência de diversos sistemas regulatórios estresses-responsivos Os fatores de transcrição interagindo nas complexas rotas metabólicas de resposta aos estresses ambientais induzem alterações nos níveis de expressão de alguns genes, que, em muitos casos, proporcionam o aumento da tolerância a esses estresses Em trabalho anterior utilizando a técnica de microarranjos de cDNA, foram encontrados 145 genes diferencialmente expressos em condição de seca, os quais foram identificados e categorizados de acordo com suas funções biológicas Dentre as categorias, os fatores de transcrição, normalmente envolvidos na regulação das respostas gênicas, foram escolhidos para terem seus níveis de expressão quantificados pela técnica de PCR em Tempo Real Foram selecionados os fatores de transcrição bZIP5, C2H2, MYBJ7 e NAC2, que quando tem suas seqüências de aminoácidos alinhadas com as de outros vegetais, utilizando o programa Clustalx, apresentaram os domínios e/ou regiões conservadas que os caracterizam como pertencentes às famílias bZIP, C2H2, MYB e NAC respectivamente Assim, o objetivo deste trabalho foi quantificar a expressão gênica dos fatores de transcrição, bZIP5, C2H2, MYBJ7 e NAC2, identificados como diferencialmente expressos no estudo com microarranjos de cDNA, através da técnica de PCR em tempo real Deste modo, um experimento foi realizado em hidroponia com as cultivares de soja MG/BR46 (cultivar Conquista) - tolerante a períodos de seca, e BR16 - padrão de sensibilidade à seca Quando atingiram o estagio V3 de desenvolvimento, as plantas foram submetidas a estresses de déficit hídrico, sendo aplicados os tratamentos: tempo (controle), 25 mim, 5 mim, 75 mim e 1 min Para a extração de RNA total e síntese de cDNA foram coletadas raízes de cada tratamento Os resultados da quantificação relativa mostraram que todos os fatores de transcrição avaliados tiveram sua expressão aumentada quando amostras de plantas submetidas ao estresse hídrico foram comparadas com plantas utilizadas como controle Estes dados confirmam que tais fatores de transcrição participam de rotas metabólicas importantes de resposta à seca, como já relatado em trabalhos anteriores e na literatura Deste modo, passos futuros para este estudo serão a construção de cassetes de superexpressão ou silenciamento visando a obtenção de cultives de soja mais tolerantes à seca
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Palavras-chave
Soja, Déficit hídrico, Genética molecular, Soja, Melhoramento, Molecular genetics, Soybean - Breeding