Transformação genética do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana via Agrobacterium tumefaciens

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dc.contributor.advisorFurlaneto, Márcia Cristina [Orientador]pt_BR
dc.contributor.authorReis, Maria Cecília dospt_BR
dc.coverage.spatialLondrinapt_BR
dc.date.accessioned2024-05-01T11:34:24Z
dc.date.available2024-05-01T11:34:24Z
dc.date.created2004.00pt_BR
dc.date.defesa27.08.2004pt_BR
dc.description.abstractResumo: A metodologia de transformação genética mediada pela bactéria Agrobacterium tumefaciens (agro-transformação) foi aplicada com sucesso para o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana Conídios de B bassiana foram transformados utilizando-se o gene hph de Escherichia coli que confere resistência ao antibiótico higromicina B como marcador seletivo, sob controle de promotores heterólogos e a seqüência de término trpC de Aspergillus nidulans A eficiência de transformação foi de até 28 e 96 transformantes por 14 e 15 conídios alvos, respectivamente, utilizando três vetores binários distintos Alta estabilidade mitótica dos transformantes (8-1%) foi observada após 5 passagens sucessivas em meio não seletivo A ocorrência de transformantes abortivos foi observada para todos os vetores binários utilizados Os transformantes foram analisados quanto a presença do gene hph por PCR e Southern blot A análise de Southern revelou a ocorrência de integração de mais de uma cópia do gene hph no genoma dos transformantes O método de agro-transformação foi efetivo na obtenção de transformantes de B bassiana resistentes à higromicina, possibilitando seu emprego em estudos de mutagênese insersional neste fungopt_BR
dc.description.abstractother1Abstract: Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (agro-transformation) was successfully applied to the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana Conidia of B bassiana were transformed to hygromycin B resistance using the hph gene of Escherichia coli as the selective trait, under the control of a heterologous fungal promoter and the Aspergillus nidulans trpC terminator The efficiency of transformation was up to 28 and 96 transformants per 14 and 15 target conidia, respectively, using three distinct vectors High mitotic stability of the transformants (8-1%) was demonstrated after five successive transfers on non-selective media Abortive transformants were observed for all the hphr vectors used Putative transformants were analysed for the presence of the hph gene by PCR and Southern analysis The latter analysis revealed the integration of two or more copies of the hph gene in the genome The agro-transformation method was found to be effective for the isolation of B bassiana hygromycin resistant transformants and may represent a useful tool for insertional mutagenesis studies in this funguspt_BR
dc.description.notesDissertação (Mestrado em Microbiologia) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Microbiologiapt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/8529
dc.languagepor
dc.relation.coursedegreeMestradopt_BR
dc.relation.coursenameMicrobiologiapt_BR
dc.relation.departamentCentro de Ciências Biológicaspt_BR
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-Graduação em Microbiologiapt_BR
dc.subjectAgrobacteriumpt_BR
dc.subjectAspergilluspt_BR
dc.subjectFungos patogênicospt_BR
dc.subjectMicrobiologiapt_BR
dc.subjectMicrobiologypt_BR
dc.subjectPathogenic fungipt_BR
dc.titleTransformação genética do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana via Agrobacterium tumefacienspt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR

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