Modelo hepático ex vivo em suínos : efeito do acetaminofeno, da fumonisina e do ácido fítico
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Resumo: Devido à similaridade orgânica ao homem, suínos são utilizados como modelos experimentais Os explantes ex vivo são promissores na avaliação de xenobióticos no organismo Assim, objetivou-se avaliar os efeitos da fumonisina (FB1), acetaminofeno e do ácido fítico (IP6) utilizando-se o modelo de explante hepático de suínos Foram realizados dois experimentos, nos quais foram analisados: resposta ao estresse oxidativo, morfologia e biomarcadores hepáticos O experimento (E1) avaliou o efeito de IP6 (5mM) nos explantes expostos ao acetaminofeno (2mM) Utilizou-se nove suínos de terminação provenientes de frigoríficos (grupo experimental 1 - GE1) e seis suínos com 4 dias (grupo experimental 2 - GE2), estes eutanasiados Os explantes (8 mm) passaram pelos seguintes tratamentos durante quatro horas: controle 4h (somente meio); IP6 (5mM); acetaminofeno (2mM) e IP6 + acetaminofeno Explantes não incubados (Ctrl h) foram colhidos para comparação com incubados (Ctrl 4h) Os sobrenadantes foram colhidos após 1/2h, 2h e 4h de incubação para análise de biomarcadores (ALT, AST, FA, GGT, proteína e colesterol) Após 4h, (3/tratamento) foram fixados, processados para análise histológica ou congelados (2/tratamento) a - 8ºC, para avaliação do estresse oxidativo: substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), tetrazólio de nitroazul (NBT), capacidade antioxidante por meio da glutationa reduzida (GSH), potencial de redução do ferro (FRAP) e capacidade de eliminação de radicais livres (ABTS) Para GE1 e GE2, na presença de IP6, observou-se atividade enzimática menor de GGT e FA em relação ao controle Com acetaminofeno, a atividade enzimática (FA, AST, ALT), PT e colesterol reduziram comparado ao controle Para o GE2, notou-se queda de FA e ALT para acetaminofeno mais IP6 em relação ao controle Os explantes incubados apenas com meio de cultura (Ctrl 4h) apresentaram aspectos histológicos similares aos não incubados (Ctrl h) Assim, a incubação não interferiu na integridade do tecido Para o ensaio TBARS (GE1), ocorreu diferença entre controle 4h e acetaminofeno, menor para este último Estes achados indicam que provavelmente não houve peroxidação lipídica nos explantes expostos ao acetaminofeno Houve redução da GSH no grupo exposto ao IP6 Para o GE2, houve aumento da capacidade antioxidante (GSH, FRAP e ABTS) do grupo acetaminofeno comparado com controle 4h, IP6 e acetaminofeno acrescido de IP6 e para o NBT diferença entre controle 4h e acetaminofeno, maior para este último, indicando possível lesão oxidativa No segundo experimento (E2), a metodologia foi similar ao primeiro, sendo os explantes submetidos aos tratamentos: controle h; controle 4h; IP6 (5mM); FB1 (1 µM); FB1 + IP6 Não houve diferença no escore da lesão entre GE1 e GE2 Para o GE1 e GE2, os tratamentos IP6 e FB1 + IP6 diminuíram a atividade de FA em relação ao controle e FB1 Quando o IP6 foi adicionado ao FB1, reduziu a atividade de ALT e PT comparado ao FB1 e ao controle Para o GE1 e GE2, a FB1 induziu ao aumento de GSH comparado ao IP6 e controle, respectivamente, enquanto a incubação com FB1 + IP6 dimininui GSH em comparação ao FB1 Os resultados obtidos evidenciaram uma ação protetora do IP6
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Palavras-chave
Suíno, Marcadores biológicos, Estresse oxidativo, Morfologia (Animais), Ácido fítico, Swine, Biological markers, Oxidative stress, Morphology (Animals), Phytic acid