Efeitos do zinco no teleósteo de água doce Prochilodus lineatus e na linhagem celular de hepatócitos de Danio rerio (ZF-L)
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Salvestrin, Nadjha Tanassovia
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Resumo
Resumo: O zinco (Zn) é um metal essencial, mas que em concentrações mais altas que as necessárias ao organismo pode se tornar tóxico Assim, o objetivo desta Dissertação foi verificar os efeitos deste metal, em concentrações dentro dos limites previstos pela legislação brasileira para corpos de água doce, por meio de testes in vivo com a espécie de peixe neotropical Prochilodus lineatus e testes in vitro com a linhagem celular de hepatócitos de Danio rerio (ZF-L), utilizando-se diversos biomarcadores Nos testes in vivo juvenis de P lineatus foram expostos, durante 24 h, a duas concentrações de Zn, ,2 mg L-1 (Zn ,2) e 2 mg L-1 (Zn 2), ou apenas a água desclorada (CTR) Após a exposição foram analisados as concentrações de zinco em diversos tecidos, biomarcadores bioquímicos, como formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), capacidade antioxidante total (CAOT), concentração do antioxidante glutationa (GSH), ocorrência de danos oxidativos, lipoperoxidação lipídica (LPO), carbonilação de proteínas (PCO), concentração de proteínas semelhantes a metalotioneínas (PSMT) e atividade da acetilcolinesterase (AChE), biomarcadores genotóxicos, como ocorrência de danos no DNA, e biomarcadores fisiológicos, como concentração de hemoglobina (Hb), hematócrito (Hct), contagem de eritrócitos (RBC), osmolalidade plasmática e glicemia Os resultados mostraram que a concentração de Zn foi significativamente maior no sangue, músculo e fígado dos peixes do grupo Zn 2, quando comparados com o grupo CTR Apesar de não terem sido observadas variações significativas nas medidas de ERO e CAOT, a concentração de GSH foi significativamente maior no fígado dos peixes do grupo Zn 2 e nas brânquias dos peixes do grupo Zn ,2 Essa importante defesa contra ERO deve ter colaborado com a proteção desses órgãos contra a LPO, porém a PCO no fígado e a ocorrência de danos no DNA nos eritrócitos foi significativamente maior nos animais dos grupos Zn ,2 e Zn 2 A concentração de PSMT foi significativamente maior no fígado e brânquias dos animais do grupo Zn 2 A atividade da AChE não sofreu alteração diante da exposição ao zinco, assim como Hb, RBC e glicose plasmática, porém houve aumento no Hct e osmolalidade dos animais do grupo Zn ,2 Nos ensaios in vitro a linhagem ZF-L foi exposta às mesmas concentrações de zinco (Zn ,2 e Zn 2) durante os períodos de 1, 3 e 6 h Após o período de exposição foram realizados testes de citotoxicidade para avaliar a integridade de membrana através do ensaio de exclusão do azul de tripan (AT), a viabilidade lisossomal, pela incorporação do vermelho neutro (VN) e viabilidade mitocondrial pela redução do brometo de 3-4,5-dimetiliazol-2-il-2,5-difeniltetrazólio (MTT) Também foram verificadas as ERO e CAOT e danos no DNA através do ensaio do cometa Os resultados do ensaio AT mostraram menor viabilidade das células expostas ao Zn 2 após 6 h, maior atividade lisossomal das ZF-L expostas ao Zn ,2 e Zn 2, após 3 e 6 h, maior CAOT após 1 h de exposição ao Zn 2 e maior escore de danos no DNA das células expostas ao Zn 2, em todos os tempos testados Em conjunto, esses resultados indicam que as concentrações de Zn, estabelecidas como limites para água doce (,18 e 5 mg L-1) pela legislação brasileira, não são seguras para a biota, visto que as concentrações testadas causaram danos oxidativos (PCO) e aumento na ocorrência de danos no DNA em P lineatus Os efeitos citotóxicos e genotóxicos do Zn, na concentração de 2 mg L-1 também foram constatados nos testes in vitro com as células ZF-L
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Palavras-chave
Prochilodus lineatus, Peixe, Efeito dos metais, Zinco, Bioacumulação, Biological markers, Genetic toxicology, Zinc, Bioaccumulation, Fish - Effect of metals on