Padronização de modelo animal com custo reduzido para o estudo da necrose isquêmica da cabeça femoral : análise por radiografia digital, tomografia computadorizada, microscopia de luz, imunohistoquímica e estudo da marcha
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Miashiro, Edson Hidenori
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Resumo
Resumo: Introdução: A necrose isquêmica da cabeça femoral (NICF) afeta adultos, entretanto acomete também crianças, na forma da Doença de Legg-Calvé-Perthes (DLCP) Objetivos: Nosso objetivo é padronizar um modelo experimental de NICF para o estudo da DLCP, com custo reduzido Também, propõe-se introduzir testes de avaliação da marcha, proporcionando uma análise funcional Material e métodos: Onze leitões machos foram submetidos ao procedimento cirúrgico no quadril direito, sendo o esquerdo utilizado como controle Induziu-se a necrose por meio de cerclagem dupla sobre o colo do fêmur direito (COLFD) com fio inabsorvível Seccionou-se o ligamento redondo Os leitões foram divididos em: Grupo A, com oito animais, sacrificando-se dois animais respectivamente na 2ª, 4ª, 6ª e 8ª semanas após a indução da necrose e Grupo B, com dois animais, submetidos a todo procedimento, exceto à cerclagem do COLFD para comprová-la como indutora da necrose (Sham) Realizou-se a observação visual da marcha nos determinados tempos de estudo, utilizando a Classificação de Etterlin et al: , marcha normal;1, marcha irregular; 2, claudicação moderada e 3, claudicação severa ou ausência de deambulação O Grupo B foi sacrificado na 6ª semana Os fêmures foram dissecados e armazenados por congelamento A seguir realizou-se a radiografia digital (RD), tomografia computadorizada (TC) e análise macroscópica Mediu-se a altura da epífise (A) do ápice da superfície articular até o ponto médio da fise metafisária Mediu-se a largura da epífise (D) do ponto máximo medial ao máximo lateral na transição cabeça-fise metafisária Calcularam-se os coeficientes epifisários (COE) por meio da razão entre “A” e “D” Os fêmures foram armazenados e preparados para microscopia de luz e imunohistoquímica utilizando o “Transforming Growth Factor Beta 1” (TGF-ß1) Resultados: No Grupo A foram operados 9 leitões, com 8 evoluindo para NICF direita e 1 óbito por sepse Todos os leitões apresentaram marcha grau 2 As cabeças femorais direitas apresentaram na RD e TC, áreas de esclerose óssea, achatamento, colapso e fragmentação Os valores da “A” e do COE da cabeça femoral direita apresentaram-se menores que os da contralateral e da “D” em 7 animais (87,5%) Nas placas de crescimento das cabeças femorais direitas observaram-se condrócitos agrupados desordenadamente e separados por lacunas vazias No Grupo B, Sham, não ocorreram sinais de NICF nos exames de imagem e histológicos e apresentaram marcha normal O Grupo A, apresentou redução da expressão do TGF-ß1 nas cabeças femorais direitas com 2 e 6 semanas de pós-operatório e esquerdas com oito semanas No Grupo B não houve diferenças de expressão entre os lados Conclusões: O modelo experimental descrito, com estrutura simples demonstrou alterações de isquemia nos exames de imagem, marcha e histo-morfologia O congelamento dos fêmures possibilita a realização da RD e TC nos laboratórios de humanos em data programada e sem o prejuízo do diagnóstico de isquemia por imagem Este recurso permite a conservação da peça anatômica até que seja possível realizar os exames
Descrição
Palavras-chave
Necrose isquêmica, Cabeça femoral, Fêmur, Necrose, Doença de Legg-Calvé-Perthes, Ischemic necrosis - Femoral head, Femur - Necrosis, Legg-Calvé-Perthes disease