Otimização de parâmetros para a produção de ácido lipóico por Bacillus spp, sua citotoxicidade e seu potencial antioxidante
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Morioka, Luiz Rodrigo Ito
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Resumo
Resumo: A descoberta contínua de novos metabólitos microbianos que possuem aplicação farmacêutica e em alimentos tem levado ao desenvolvimento de sistemas de cultivo eficientes e de baixo custo A escolha de um microrganismo apropriado e condições para produção adequadas são fatores cruciais para o processo de recuperação do metabólito Membros da espécie de Bacillus são os procariotos mais freqüentemente usados para produção industrial de metabólitos de interesse Esses organismos são sobretudo favorecidos pelo fato de que seu cultivo em sistemas de produção em larga escala são de simples operação, porém com certos cuidados e além de um custo não elevado Bacillus spp são bactérias Gram positivas de solo, que secretam numerosas proteínas que degradam uma grande variedade de substratos, possibilitando à bactéria a sobreviver em ambientes que estão em mudança contínua O Bacillus spp sintetiza uma coenzima conhecida como Ácido Lipóico (AL) que é um componente bioativo natural encontrado tanto em membranas celulares bem como, em compartimentos celulares aquosos Neste estudo, inicialmente foi avaliado o efeito de diferentes fontes de carbono e nitrogênio na concentração de AL na biomassa de Bacillus spp e em seguida aplicou-se a técnica de análise de superfície de resposta que definiram as melhores condições de cultivo (temperatura, agitação e concentração de nutrientes) A extração e determinação do ácido lipóico da biomassa do Bacillus spp foram determinadas pela técnica preconizada por Kataoka et al, 1993 e Aboul-Enein; Hoenen (25) A capacidade antioxidante e o mecanismo de ação do AL foi determinada pela capacidade de seqüestro do radical livre estável DPPH•, a inibição da degradação da deoxirribose por radical hidroxila e a atividade queladora do íon Fe2+ A toxicidade do AL foi realizada utilizando a técnica de Mosmann (1983) Verificou-se que a melhor fonte de carbono e de nitrogênio foram glicerol e extrato de levedura, respectivamente Houve uma máxima concentração de AL quando o Bacillus spp foi cultivado em glicerol (25 mg/mL) e extrato de levedura (15 mg/mL) a 3 ºC, 15 rpm Nessas condições de cultivo a concentração obtida de AL apresentou atividade seqüestradora de radicais livres e queladora de íons Fe2+ Na avaliação da citotoxicidade do AL os resultados demonstraram que não houve influência na viabilidade celular, apresentado proliferação celular nas diferentes concentrações testadas no tempo de 3 h Por outro lado, no período de incubação de 24 h observou-se um efeito citotóxico somente nas maiores concentrações de 565 a 226 µg/mL
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Palavras-chave
Ácido lipóico, Aplicações industriais, Antioxidantes, Lipoic acid, Antioxidants, Industrial applications