Variabilidade genética e nucleação de gelo em isolados de Pantoea ananatis, agente causal da mancha branca do milho
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Miller, Amanda Mota
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Resumo
Resumo: Medidas de controle da doença Mancha Branca do Milho (MBM), causada por Pantoea ananatis (Pa), são baseadas preferencialmente no desenvolvimento de cultivares resistentes, porém o desconhecimento e a falta de informações sobre a variabilidade genética do patógeno dificultam o estabelecimento de estratégias de manejo mais estáveis no sistema Assim, os objetivos do trabalho foram investigar a variabilidade genética de isolados de Pa obtidos de diferentes regiões do Brasil e caracterizá-los quanto à presença e expressão fenotípica do gene inaA, responsável pelo surgimento inicial dos sintomas da doença Para os estudos, foram utilizados isolados pertencentes ao banco de linhagens do Laboratório de Genética de Microrganismos da Universidade Estadual de Londrina, os quais tiveram seu DNA extraído e identidade confirmada por PCR utilizando os primers espécie-específicos ANAF/ANAR A investigação da variabilidade genética foi conduzida com marcadores moleculares AFLP (Amplified Fragment Lenght Polymorphism) Na seleção das combinações com maior quantidade de locus polimórficos, foram selecionados para Pa os primers: EcoRI-ACG/MseI-CT, EcoRI-ACG/MseI-CAC e EcoRI-ACG/MseI-CAG Com o intuito de encontrar possíveis variações no número de plasmídios na espécie, foi a realizada a extração do mesmo por lise alcalina A caracterização dos isolados quanto à presença do gene inaA foi realizada por PCR utilizando os primers upper INA A/ lower INA A A expressão do fenótipo INA+ foi avaliada adicionando-se ,1mL de cultura bacteriana em água ultra-pura com temperatura de -1 oC Dados de similaridade genética permitiram separar os isolados em dois grupos, porém sem correlação entre o local de origem do hospedeiro com a composição dos mesmos A porcentagem de polimorfismo de Pa variou de 24,64% a 92,46% e a diversidade gênica de ,7 a ,9 A análise de variância molecular mostrou que 99,18% da variabilidade genética encontra-se dentro das populações Os resultados obtidos para variabilidade genética apontam para a ação de forças evolutivas sobre as populações estudadas Este é o primeiro relato da descrição de plasmídio de Pa provenientes de lesões de MBM P ananatis apresenta pelo menos um plasmídio, com tamanho estimado com base na literatura entre 28-352 kb Correlação positiva entre a detecção do gene inaA e a atividade de nucleação de gelo foi obtida em Pa Dos 9 isolados em estudo, apenas três não amplificaram para o primer, e cerca de 2% dos isolados, embora portadores do gene, não expressaram o fenótipo nas condições avaliadas Concluiu-se que a expressão de gene inaA é dependente de características de cada individuo, pois sua presença no genoma não implica na manifestação fenotípica
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Palavras-chave
Milho, Doenças e pragas, Milho, Aspectos genéticos, Bactérias fitopatogênicas, Corn, Corn, Biological markers, Diseases and pests, Disease and pest resistance - Genetic aspects