Desenvolvimento de método imunológico para detecção de Fusarium verticillioides em ração de aves
Arquivos
Data
Autores
Omori, Aline Myuki
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Resumo
Resumo: O fungo Fusarium verticillioides é um patógeno primário de milho capaz de produzir diversas micotoxinas causando prejuízos econômicos e problemas à saúde humana e animal Assim, é necessário o desenvolvimento de métodos para detectar esse fungo e fazer o controle de qualidade dos produtos à base de milho Os métodos tradicionais de identificação e detecção geralmente consomem muito tempo e apresentam baixa especificidade e reprodutibilidade A detecção de exoantígeno por meio de métodos imunológicos é uma alternativa rápida e sensível O objetivo deste trabalho, portanto, foi desenvolver um método imunológico para detectar F verticillioides em amostras de ração de aves Inicialmente, anticorpos policlonais IgY contra exoantígeno de F verticillioides 97K foram produzidos em galinhas e caracterizados por ELISA (“Enzyme-linked immunosorbent assay”) e “Western blot” O anticorpo IgY reagiu com o exoantígeno de F verticillioides 97K, porém apresentou reatividade cruzada com exoantígeno de outras espécies fúngicas A análise da reatividade do anticorpo com exoantígeno de diferentes isolados de F verticillioides por “Western Blot” mostrou que duas proteínas, de massas moleculares de 67 kDa e 113 kDa, foram reconhecidas em todos os exoantígenos dos diferentes isolados e portanto, apresentam potencial para serem antígenos espécie-específicos Assim, visando anticorpos mais específicos, anticorpos policlonais de coelho contra a proteína de 67 kDa do exoantígeno de F verticillioides 97K foram produzidos e caracterizados Este anticorpo apresentou menor reatividade cruzada com exoantígeno de outras espécies fúngicas e foi utilizado na detecção de exoantígeno de F verticillioides em amostras de ração por meio de ELISA competitivo indireto com limite de detecção de ,29 µg/mL A concentração de exoantígeno determinada por este método imunoenzimático apresentou forte correlação positiva com a concentração de fumonisina determinada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência na ração com coeficiente de correlação de Pearson de ,76, sugerindo que o ELISA competitivo indireto desenvolvido neste estudo tem potencial para ser utilizado na imunodetecção de F verticillioides em amostras de ração de aves
Descrição
Palavras-chave
Fungos toxigênicos, Fusario, Anticorpos policlonais, Técnicas imunoenzimáticas, Rações, Toxigenic fungi, Fusarium, Ave, Feeds