01 - Doutorado - Genética e Biologia Molecular
URI Permanente para esta coleção
Navegar
Navegando 01 - Doutorado - Genética e Biologia Molecular por Assunto "Bacillus cereus"
Agora exibindo 1 - 2 de 2
Resultados por página
Opções de Ordenação
Item Diversity and functional analysis of Rap-Phr systems from Bacillus cereus groupCardoso, Priscilla de Freitas; Vilas-Bôas, Gislayne Fernandes Lemes Trindade [Orientador]; Lereclus, Didier; Mahillon, Jacques; Pontes, Rose Gomes Monnerat Solon de; Slamti, Leyla; Fazion, Fernanda Aparecida Pires; Pereira, Luiz Filipe Protasio; Lereclus, Didier [Coorientador]Resumo: O grupo Bacillus cereus é formado por oito espécies de bactérias Gram positivas esporulantes que podem colonizar diversos nichos ecológicos As espécies mais importantes do grupo são B cereus, bactéria ubíqua do solo e patógeno oportunista; B thuringiensis, entomopatógeno amplamente utilizado como biopesticida; e B anthracis, agente etiológico do antraz Embora apresentem fenótipos diferentes, essas espécies são próximas geneticamente e seus principais fatores de virulência são codificados por plasmídeos O ciclo infeccioso de B thuringiensis na larva de inseto é regulado pela ativação consecutiva de sistemas de quorum sensing da família RNPP Dentre eles, o sistema Rap-Phr foi amplamente estudado em B subtilis, porém apenas pontualmente explorado nas espécies do grupo B cereus Os sistemas Rap-Phr regulam vários processos fisiológicos bacterianos, inclusive a esporulação O objetivo deste estudo foi analisar os sistemas Rap-Phr no grupo B cereus, com intuito de conhecer sua distribuição, localização e diversidade a fim de obter um panorama desses sistemas neste grupo Além disso, o possível envolvimento desses sistemas no controle do processo de esporulação foi predito com base nos dados estruturais descritos para RapH de B subtilis Genes rap, sempre associados a um gene phr, estão presentes em todas as 49 linhagens estudadas com uma média de seis alelos rap-phr por linhagem e 3% dos sistemas estão localizados em plasmídeos As linhagens de B thuringiensis possuem seis vezes mais sistemas Rap-Phr plasmidiais do que as linhagens de B cereus Ademais, linhagens filogeneticamente próximas apresentam um perfil similar de genes rap-phr Um terço das proteínas Rap foram preditas como inibidoras da esporulação e estas proteínas estão preferencialmente localizadas em plasmídeos e, portanto, em linhagens de B thuringiensis A predição foi parcialmente validada por ensaios de esporulação sugerindo que os resíduos identificados pelo envolvimento na atividade de fosfatase em B subtilis são conservados no grupo B cereus, porém não são suficientes para predizer a função sobre a esporulação Em seguida, o sistema Rap63-Phr63 codificado pelo plasmídeo pAW63 da linhagem B thuringiensis HD73 foi caracterizado A proteína Rap inibe moderadamente a esporulação e retarda a expressão de genes regulados por SpoA Rap63 é inibida por seu peptídeo cognato Phr63, cuja forma madura corresponde à extremidade carboxi-terminal do pro-peptídeo Ensaios de esporulação em larvas de inseto sugerem uma atividade sinérgica dos sistemas Rap63-Phr63 e Rap8-Phr8 (do plasmídeo pHT8_1 da linhagem B thuringiensis HD73) sobre a esporulação Apesar da similaridade entre Phr63 e Phr8 não foi observado cross-talk entre os dois sistemas, confirmando sua especificidade Desta forma, o conjunto dos resultados demonstra a grande diversidade dos sistemas Rap-Phr no grupo B cereus e destaca o impacto de sistemas plasmidiais no desenvolvimento destas bactérias Consequentemente, reforça a importância dos plasmídeos na adaptação e sobrevivência dessas espécies, particularmente em B thuringiensisItem Role of plasmids of Bacillus cereus group in insect larvaeFazion, Fernanda Aparecida Pires; Vilas-Bôas, Gislayne Fernandes Lemes Trindade [Orientador]; Lereclus, Didier; Arantes, Olívia Márcia Nagy; Mahillon, Jacques; Pereira, Luiz Filipe Protasio; Lereclus, Didier [Coorientador]Resumo: Bacillus cereus (Bc) e Bacillus thuringiensis (Bt) são duas espécies bacterianas estritamente relacionadas Bc é uma espécie patogênica causadora de gastroenterites de origem alimentar Bt é uma bactéria entomopatogênica, cujo ciclo de vida em larvas de insetos é controlado por sistemas de quorum sensing, como o sistema Rap-Phr, que regula os processos de esporulação, formação de biofilme e conjugação A presença desses genes em plasmídeos tem sido identificada e, além disso, plasmídeos tem sido envolvidos na adaptação de bactérias a seus nichos ecológicos Com objetivo de compreender o papel dos plasmídeos nessas espécies, dois trabalhos complementares foram realizados Primeiro, larvas de insetos, o nicho ecológico privilegiado de Bt, foram infectadas com linhagens de Bt e Bc possuindo diferente conteúdo plasmidial O fitness foi avaliado com a contagem de células vegetativas e esporos em quatro tempos Linhagens de Bt e Bc foram classificadas em cinco grupos de acordo com o fitness bacteriano Nesses grupos, o plasmídeo afetou o fitness bacteriano positivamente ou negativamente Os resultados desse estudo demonstram que linhagens do grupo do B cereus que recebem um plasmídeo patogênico não é o suficiente para um aumento efetivo da população bacteriana, ie, colonizar o hospedeiro O segundo artigo caracterizou o sistema rap/phr presente no plasmídeo críptico pHT8_1 A proteína Rap8 inibiu o processo de esporulação na larva de inseto Essa proteína foi diretamente inibida pelo peptídeo sinalizador ativo Phr8 O sistema Rap-Phr8_1 permitiu a bactéria exercer um rigoroso controle da esporulação em cadáveres de insetos permitindo a sobrevivência e disseminação Assim, os resultados do segundo trabalho demonstram que plasmídeos podem prover igualmente vantagens para a adaptação e evolução de B thuringiensis em seu nicho ecológico, enquanto que os resultados do primeiro trabalho indicam que linhagens do grupo do B cereus devem possuir um conteúdo genético adequado para apresentar um alto fitness permitindo uma ótima multiplicação e disseminação da poulação bacteriana dentro da larva de insetos