Análise in vitro e in silico da atividade anti-Mycobacterium tuberculosis de derivados de benzoiltioureias
Data
2026-02-20
Autores
Gimenes, Ana Carolina Ramos
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Resumo
Resumo: A tuberculose (TB) é uma doença infectocontagiosa causada por Mycobacterium tuberculosis (Mtb) que afeta mais de 10 milhões de pessoas. Atualmente, uma preocupação mundial é o aumento do número de casos de resistência aos fármacos, o que ressalta ainda mais a necessidade de novas alternativas terapêuticas para a TB, com menor tempo de uso e menor toxicidade. A parede celular desse bacilo dificulta o desenvolvimento de novos antimicrobianos, porém, permite a utilização de alvos específicos, essenciais à sua manutenção, como as desidratases AB (HadAB). Sua inibição afeta a sobrevivência dos bacilos, como já demonstrado pelo fármaco isoxil, derivado de tioureias, que exerce esse efeito. Aliada a isso, metodologias mediadas por computador, como o docking molecular, permitem prever o encaixe da molécula de interesse no alvo desejado, aumentando as chances de sucesso na busca de novas moléculas inibidoras. No contexto da TB, sistemas de liberação de fármacos, como os lipossomas, permitem a entrega direcionada ao alvo, além de melhorarem a solubilidade das substâncias. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a atividade anti-Mtb de derivados de benzoiltiroureias livres e encapsulados (RTB05, RTB32, RTB286 e RTB287). E, posteriormente, realizar estudos in silico mais específicos para identificar novos possíveis hits, para que sua atividade seja avaliada in vitro. Para isso, as substâncias foram encapsuladas em lipossomas catiônicos, obtendo-se tamanhos médios (277,98 a 477,03 nm) em homogeneidade (20,60 a 26,86%) e não agregados (42,30 a 46,15 mV). A partir disso, a concentração inibitória mínima (CIM) das substâncias livres e encapsuladas foi determinada frente à cepa sensível H37Rv de Mtb, resultando em valores inibitórios acima de 1,0 mM. Com base nisso, estudos in silico foram conduzidos com as melhores tiouréias não oxidadas, da quimioteca do Laboratório de Síntese de Moléculas Medicinais, como forma de reavaliar sua abordagem como pró-fármacos, assim como o isoxil. Isso resultou em três moléculas (RTB288, RTB299 e RML35) que interagiam com pelo menos um resíduo de aminoácido do sítio catalítico da enzima HadAB (His41 e Asp36) e com uma das águas de reconhecimento molecular (HOH330, HOH339, HOH353 e HOH434). Elas ainda se adequaram a todas as regras de fármaco-similaridade, apresentando alta absorção intestinal e inibição da glicoproteína-P em estudos in silico. Todas as moléculas foram encapsuladas resultam em vesículas estáveis (22,06 a 27,56 mV), de tamanhos variados (428,50 a 983,53 nm) e com homogeneidade apenas nas RTB288 e RTB299 (37,10 e 23,50%). Posteriormente, um novo CIM foi determinado com as três moléculas livres RTB288 e RTB299 apresentaram valores de CIM menores 7,81x10-3 mM, e RML35 apresentou inibição > 1,0 mM. Tais resultados abriram novas perspectivas para estudos futuros com as substâncias encapsuladas em cepas resistentes, além de estudos de citotoxicidade frente a células de mamíferos, para determinar se os lipossomas conseguem reduzir o efeito citotóxico das substâncias
Descrição
Palavras-chave
Tuberculose, HadAB, Docking molecular, Tioureias, Lipossomas