Caracterização e epidemiologia molecular de cepas de Klebsiella pneumoniae produtoras de ESBLs isoladas de pacientes do Hospital Universitário de Londrina, no período de 2000-2004
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Vespero, Eliana Carolina
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Resumo
Resumo: Klebsiella pneumoniae desempenha papel importante em infecções hospitalares causando, principalmente, pneumonia, sepse, infecção urinária e de ferida cirúrgica Os objetivos deste estudo foram: determinar os perfis de resistência a antimicrobianos, caracterizar ESBLs (ß-lactamases de espectro ampliado), avaliar a similaridade genética, comparar técnicas de tipagem molecular bacteriana e pesquisar a presença de integrons, em 141 cepas de K pneumoniae isoladas de pacientes do Hospital Universitário de Londrina, no período de cinco anos (2-24) Após determinados os perfis de resistência (Kirby-Bauer), foram definidas as CIMs (Concentrações Inibitórias Mínimas) aos antimicrobianos, utilizando o método de diluição em ágar (CLSI 26) A produção de ESBLs foi confirmada utilizando os testes de associação com ácido clavulânico e de disco sinergismo A pesquisa de genes de ß-lactamases blaTEM, blaSHV e blaCTX-M, foi realizada por PCR e sequenciamento; foi ainda realizada pesquisa de classes de integrons e caracterização do integron classe 1 Para determinar a similaridade genética entre as cepas foram utilizados métodos baseados em PCR e RFLP-PFGE Todas as amostras apresentaram sensibilidade aos antimicrobianos imipenem, meropenem e cefoxitina Presença de diferentes genes e combinações de genes que codificam enzimas nas cepas, foi observado, sendo blaCTX-M-2 o mais freqüente (131 isolados) A presença de integrons revelou: 131 (93%) cepas com integron classe 1; nove (6,4%) com classe 2 e sete (5%) cepas com ambas as classes Não foi detectada a presença de integron classe 3 A caracterização do integon classe 1 transportando o gene blaCTX-M-2 demostrou tratar-se de um integron classe 1 incomum Entre os métodos de tipagem, PFGE apresentou elevado índice de discriminação (DI) com ,989, REP-PCR (,969), combinação dos cinco métodos (,999), combinação rep-PCR e RAPD (,986); seguidos de RAPD (,946), ERIC-PCR (,938) e BOX-PCR (,937) Nossos resultados sugerem que os métodos baseados em PCR são apropriados para análise inicial de cepas de K pneumoniae e que RFLP-PFGE seria indicada para análise complementar CTX-M-2 foi a ESBL prevalente em nossa região e os genes que a codificam encontram-se localizadas em um integron classe 1 incomum Este integron já foi descrito transportando a mesma enzima na Argentina e no Uruguai, no entanto, este é o primeiro relato deste integron em nossa região, no Brasil Nossos resultados sugerem que ESBLs, em K pneumoniae, sobre tudo CTX-M-2 e SHV-5 são as enzimas mais freqüentes em nossa região E que a multiplicidade de genótipos pode ser resultante da disseminação da enzima CTX-M-2 e de genes de resistência presentes em elementos genéticos móveis, incluindo integrons
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Palavras-chave
Epidemiologia molecular, Microbiologia, Streptococcus pneumoniae, Molecular epidemiology, Microbiology