Mycoplasma ovis e patógenos transmitidos por carrapatos em cavalos e carrapatos de um assentamento rural do sul do Brasil
Data
2022-02-21
Autores
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual de Londrina
Resumo
Resumo: Patógenos transmitidos por carrapatos (PTC) são um importante grupo de organismos que podem afetar animais e seres humanos na América do Sul. Hemoplasmose em cavalos pode ser considerada uma infecção acidental ou incomum. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar a ocorrência dos agentes como Theileria equi, Babesia caballi e Ehrlichia sp., e hemoplasmas em equinos de um assentamento rural, localizado no Sul do Brasil, identificar as espécies de carrapatos e determinar os fatores associados à exposição/infecção. Amostras de sangue de 22 cavalos foram triadas para anti-T. equi e anti-Ehrlichia spp. anticorpos por ensaios de anticorpos fluorescentes indiretos (IFA). As amostras também foram testadas por ensaios de PCR visando o gene 18S rRNA de T. equi e B. caballi, e o gene 16S rRNA de hemoplasmas. Além disso, ensaios de PCR direcionados ao gene 16S rRNA, proteína formadora de ligação dissulfeto (dsb) de Ehrlichia spp. também foram realizados. Carrapatos foram coletados dos animais (inspeção) e do ambiente (arrasto de flanela e armadilhas de gelo seco), estes foram identificados por meio de chave de identificação. Adicionalmente 28 carrapatos adultos provenientes dos animais e 4 ninfas provenientes do ambiente, tiveram as glandulas salivares extraídas e triadas para Ehrlichia spp. (dsb gene) e Mycoplasma spp. (16S gene). Anticorpos para T. equi e Ehrlichia spp. foram detectados em 22/09 (40,91%; IC 95%: 23,26-61,27%) e 22/07 (31,81%; IC 95%: 16,36-52,68%) cavalos, respectivamente. DNA de T. equi, B. caballi e Mycoplasma spp. foram encontrados em 13/22 (59,09%), 1/22 (4,55%) e 11/22 (50%) cavalos, respectivamente, e todos foram negativos para Ehrlichia spp. Todas as sequências apresentaram ≥99% de identidade com múltiplas sequências de T. equi (18S rRNA), B. caballi (rap-1) e Mycoplasma ovis (16S rRNA) depositadas no GenBank. Todos os carrapatos adultos foram identificados como Dermacentor nitens 44/47 (93,62%) e Rhipicephalus microplus 3/47 (6,38%). Todas as glândulas salivares foram negativas para o gene dsb de Erhlichia spp. Dois de 28 (7,14%) glândulas provenientes de adultos dos animais foram positivos por PCR convencional, 11/28 (39,29%) e duas de 4 ninfas (50%) provenientes do ambiente foram positivos por PCR real time para o gene 16S rRNA para Mycoplasma spp. Este é o primeiro relato de infecção por M. ovis em equinos no Brasil, utilizando técnicas moleculares. Mycoplasma spp. foi detectada em glândulas salivares de D. nitens e R. microplus, sendo necessários mais estudos para esclarecer a ação vetorial dessas espécies. Foi possível observar uma baixa ocorrência de Ehrlichia spp. e ausência de PCR positivo em região onde não foram encontrados carrapatos Amblyomma sculptum.
Abstract: Tick-borne pathogens (TBP) are an important group of organisms that can affect animals and humans in South America. Hemoplasma in horses can be considered an accidental or unusual infection. Therefore, this study aimed to determine the occurrence of agents such as Theileria equi, Babesia caballi and Ehrlichia sp., and hemoplasmas in horses from a rural settlement located in southern Brazil, identify the tick species and determine the factors associated with exposure/infection. Blood samples from 22 horses were screened for anti-T. equi and anti-Ehrlichia spp. antibodies by indirect fluorescent antibody (IFA) assays. The samples were also tested by PCR assays targeting the 18S rRNA gene from T. equi and B. caballi, and the 16S rRNA gene from hemoplasmas. In addition, PCR assays targeting the 16S rRNA gene, a disulfide bond forming protein (dsb) from Ehrlichia spp. were also carried out. Ticks were collected from the animals (inspection) and from the environment (flannel trawling and dry ice traps), and they were identified by means of an identification key. Additionally, 28 adult ticks from the animals and 4 nymphs from the environment had their salivary glands extracted and screened for Ehrlichia spp. (dsb gene) and Mycoplasma spp. (16S gene). Antibodies to T. equi and Ehrlichia spp. were detected in 09/22 (40.91%; 95% CI: 23.26-61.27%) and 07/22 (31.81%; 95% CI: 16.36-52.68%) horses, respectively. DNA from T. equi, B. caballi and Mycoplasma spp. were found in 13/22 (59.09%), 1/22 (4.55%) and 11/22 (50%) horses, respectively, and all were negative for Ehrlichia spp. All sequences showed ≥99% identity with multiple T. equi (18S rRNA), B. caballi (rap-1) and Mycoplasma ovis (16S rRNA) sequences deposited in GenBank. All adult ticks were identified as Dermacentor nitens 44/47 (93.62%) and Rhipicephalus microplus 3/47 (6.38%). All salivary glands were negative for Erhlichia spp. by dsb gene. Two of 28 (7.14%) glands from adult animals were positive by conventional PCR, 11/28 (39.29%) and two of 4 nymphs (50%) from the environment were positive by real time PCR for the gene 16S rRNA for Mycoplasma spp. This is the first report of M. ovis infection in horses in Brazil, using molecular techniques. Mycoplasma spp. was detected in salivary glands of D. nitens and R. microplus, and further studies are needed to clarify the vectorial action of these species. It was possible to observe a low occurrence of Ehrlichia spp. and absence of positive PCR in region where Amblyomma sculptum ticks were not found.
Descrição
Palavras-chave
Babesia caballi, Mycoplasma hemotrópico, Theileria equi, Dermacentor nitens, Ehrlichia spp