Regeneração organogênica de soja sob transformação via agrobacterium
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Rodrigues-Otubo, Benedita Maria
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Resumo
Resumo: A soja [Glycine max (L) Merrill] é uma das culturas mundialmente mais importantes pelas altas concentrações de óleo e proteína presentes nos grãos Com o avanço das novas tecnologias, o melhoramento dessa leguminosa, por meio da transformação, viabilizou a introdução de características, até então, impossíveis por outros métodos A transformação genética tem sido uma ferramenta utilizada para transpor barreiras entre as espécies possibilitado a obtenção de plantas transgênicas, sendo o seu sucesso altamente dependente de um bom protocolo de regeneração in vitro No entanto, a inexistência de protocolos altamente reproduzíveis e com altas taxas de transformação tem dificultado o emprego desta tecnologia Este trabalho teve por objetivo selecionar cultivares de soja com maior potencial organogênico, e avaliar o efeito do tempo no meio de indução de brotações, tempo no meio de recuperação, tempo de sonicação e das concentrações de acetosiringona em plantas regeneradas de eixos embrionários de sementes maduras da cultivar Conquista, sob transformação via Agrobacterium Foram apresentados dois artigos No primeiro artigo foram delineados dois experimentos, onde no primeiro foi avaliado a regeneração organogênica das cultivares Conquista, Valiosa RR, Perdiz, VMax, Pintado, Tucunaré, Potência, BRS-232 e Tabarana, no delineamento em blocos ao acaso, com quatro repetições e parcelas com dez eixos embrionários Aos 7 dias do início da cultura foram avaliados a frequência de regeneração, o número médio de brotos por eixo e a frequência de multibrotação No segundo experimento, foram avaliadas a regeneração organogênica e a eficiência de expressão do gene GUS em eixos embrionários da cultivar Conquista, cultivados no meio de indução de brotações durante um e dois dias e a manutenção por 1, 15 e 2 dias na fase de recuperação Utilizou-se o delineamento de blocos ao acaso, no esquema fatorial, de 2 x 3, quatro repetições e parcelas com cinco eixos embrionários Aos 7 dias do início da cultura, foram avaliadas a regeneração de plântulas e a eficiência da expressão estável do gene GUS No segundo artigo (primeiro experimento), foram avaliados o efeito da manutenção de eixos embrionários da cultivar Conquista no meio de indução de brotações por um, dois e três dias com sonicação de ,; 2,5; 7,5; 15, e 3, segundos na fase de agroinfecção, na regeneração organogênica e na eficiência de expressão do gene GUS, sob transformação via Agrobacterium na OD6 ,5 Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados, no esquema fatorial 3 x 5, quatro repetições e parcelas de 12 eixos No segundo experimento, foram avaliados os efeitos das concentrações de 1 e 2 µM de acetosiringona na agroinfecção de eixos embrionários da cultivar Conquista com sonicação de ,; 2,5; 7,5; 15, e 3, segundos, na regeneração organogênica e na eficiência de expressão do gene GUS, sob transformação via Agrobacterium na OD6 ,2 Utilizou-se o delineamento de blocos casualizados, no esquema fatorial 2 x 5, com 1 e 2 µM de acetosiringona e tempos de sonicação de ,; 2,5; 7,5; 15, e 3, segundos, quatro repetições e parcelas com 12 eixos; sendo as avaliações dos experimentos realizadas aos 7 dias do início dos cultivos No primeiro artigo (primeiro experimento), as cultivares apresentam potencial para regeneração organogênica O maior potencial para número de brotos é observado nas cultivares Valiosa RR e Conquista e, para frequência de multibrotação na cultivar Valiosa RR No segundo experimento, o cultivo de eixos embrionários da cultivar Conquista por dois dias no meio de indução e 2 dias no meio de recuperação estimulam maior regeneração de plântulas e maior expressão do gene GUS No segundo artigo (primeiro experimento) A maior elongação das plântulas e maior expressão do gene GUS ocorrem em eixos embrionários da cultivar Conquista mantidos por dois e três dias no meio de indução e com 2,5 e 15, segundos de sonicação na suspensão de Agrobacterium OD6 ,5 No segundo experimento, a maior elongação das plântulas e maior expressão do gene GUS ocorrem em 1 µM de acetosiringona, com 7,5 e 3, segundos de sonicação de eixos embrionários da cultivar Conquista na suspensão de Agrobacterium OD6 ,2
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Palavras-chave
Soja, Melhoramento genético, Fenóis, Soja, Regeneração, Soybean, Breeding, Soybean, Regeneration