Produção e entrega de moléculas de dsRNA para o controle de Digitaria insularis (capim-amargoso)

Página do item simplificado
dc.contributor.advisorNepomuceno, Alexandre Lima
dc.contributor.authorRosa, Juliana da
dc.contributor.bancaAdegas, Fernando Storniolo
dc.contributor.bancaSousa, Natália Lima de
dc.contributor.bancaSartori, Daniele
dc.contributor.bancaViana, Américo José Carvalho
dc.contributor.coadvisorMarin, Silvana Regina Rockenbach
dc.coverage.extent82 p.
dc.coverage.spatialLondrina
dc.date.accessioned2025-08-01T19:12:50Z
dc.date.available2025-08-01T19:12:50Z
dc.date.issued2022-03-31
dc.description.abstractCapim-amargoso é uma planta daninha que causa redução de produtividade e prejuízos econômicos nas lavouras de todo Brasil. Novas tecnológias como RNAi podem contribuir para o atual portifólio de herbicidas. O objetivo desse trabalho foi desenvolver estratégias de produção e entrega de dsRNAs para o silenciamento do gene Phytoene desaturase (PDS) via RNAi em capim-amargoso. Para a produção de dsRNAs de boa qualidade e especificidade foram testados dois vetores: L4440 e New-Vector. New-vector se mostrou mais eficiente na produção de dsRNAs com tamanho esperado. Com relação à extração de dsRNAs dois métodos foram testados: Trizol e Etanol. O método trizol garantiu um maior rendimento comparado ao método por Etanol (3,9 µg/mL e 2,5 µg/mL), apesar disso o método de extração por Etanol se mostrou mais eficiente na extração de dsRNAs com tamanho esperado. Utilizando o vetor L4440 o indutor alternativo proporcionou um rendimento maior quando comparado ao New- vector (5,7 µg/mL e 3,5 µg/mL). Entre os métodos de aplicação de dsRNAs em capim- amargoso os mais eficientes foram aplicação por folhas e em pré-emergência. A aplicação em folhas, em 3 e 5 dias após a aplicação, e em pré-emergência, 5 dias após a aplicação, levou a redução da expressão do gene PDS em 35%. Ainda, o tratamento que recebeu dsPDS em pré-emergência apresentou uma redução da massa seca em 24%. Já na aplicação em raízes houve redução do número de transcritos 10 dias após a aplicação dos dsRNAs. Os resultados desse trabalho abrem perspectivas para novos estudos e desenvolvimento de produtos baseados em RNAi para controle de plantas daninhas.
dc.description.abstractother1Sourgrass is a weed which reduce productivity and cause economic losses in crop all over Brazil. New Technologies such as RNAi can contribute to current herbicide portfolio. The goal of this work was develop strategies for production and delivery of dsRNAs for Phytoene desaturase (PDS) gene through RNAi in sourgrass. For the dsRNA production with high quality and specificity two vectors were tested: L4440 e New-Vector. New-vector was more efficient in producing dsRNA with expected size. To extract dsRNAs, two methods were tested: Trizol and Ethanol. The trizol method result a higher yield compared to Ethanol metod (3,9 µg/mL e 2,5 µg/mL), although Ethanol extraction method was more efficienty in extracting dsRNA of the expected size. Using the L4440 vector the alternative inductor provided a higher yield compared to New-vector (5,7 µg/mL e 3,5 µg/mL). Among the delivery methods of dsRNAs in sourgrass, the most efficienty were leaf and pré-emergence aplication. Leaf delivery, 3 and 5 days after application, and pre-emergence delivery 5 days after application resulted in the reduction of PDS gene expression by 35%. In addition, the treatment that received dsPDS in pre-emergence had a 24% reduction in dry mass. In roots delivery, there was a reduction in the number of transcripts 10 days after the application of dsRNAs. The results of this work open perspectives for new studies and development of RNAi-based products for weed control.
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/18910
dc.language.isopor
dc.relation.departamentCCB - Departamento de Biologia Geral
dc.relation.institutionnameUniversidade Estadual de Londrina - UEL
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-Graduação em Genética e Biologia Molecular
dc.subjectProdução de dsRNA
dc.subjectEscherichia coli HT115 (DE3)
dc.subjectPhytoene desaturase
dc.subjectRNA de interferência
dc.subjectEntrega de dsRNA
dc.subjectRNA fita dupla (dsRNA) - Genoma viral
dc.subjectGenética
dc.subjectGene Phytoene desaturase (PDS) - Via RNAi - Capim-amargoso
dc.subjectDigitaria insularis (capim-amargoso) - Controle
dc.subject.capesCiências Biológicas - Biologia Geral
dc.subject.cnpqCiências Biológicas - Biologia Geral
dc.subject.keywordsdsRNA production
dc.subject.keywordsEscherichia coli HT115 (DE3)
dc.subject.keywordsPhytoene Desaturase
dc.subject.keywordsinterfering RNA
dc.subject.keywordsdsRNA delivery
dc.subject.keywordsDouble-stranded RNA (dsRNA) - Viral genome
dc.subject.keywordsGenetics
dc.subject.keywordsDigitaria insularis (bitter grass) - Control
dc.titleProdução e entrega de moléculas de dsRNA para o controle de Digitaria insularis (capim-amargoso)
dc.title.alternativeProduction and delivery of dsRNA molecules for the control of Digitaria insularis (sourgrass)
dc.typeTese
dcterms.educationLevelDoutorado
dcterms.provenanceCentro de Ciências Biológicas

Arquivos

Pacote Original
Agora exibindo 1 - 2 de 2
Imagem de Miniatura
Nome:
CB_GEN_Dr_2022_Rosa_Juliana.pdf
Tamanho:
1.3 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Texto completo. Id. 193987
Baixar
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
CB_GEN_Dr_2022_Rosa_Juliana_TERMO.pdf
Tamanho:
230.38 KB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Termo de autorização.
Baixar
Licença do Pacote
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
license.txt
Tamanho:
555 B
Formato:
Item-specific license agreed to upon submission
Descrição:
Baixar

Coleções

01 - Doutorado - Genética e Biologia Molecular