Estudo de proteases degradadoras de cutícula produzidas por Beauveria bassiana

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Donatti, Ariane Coelho

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Resumo

Resumo: O fungo entomopatogênico Beauveria bassiana é considerado um promissor agente de controle microbiano de insetos-praga da agricultura, a exemplo, do gafanhoto Rhammatocerus schistocercoides que ataca plantações economicamente importantes na região Centro-oeste brasileira B bassiana é capaz de penetrar na cutícula do hospedeiro através de ação mecânica exercida pelo apressório e ação de enzimas degradadoras de cutícula, como as proteases, que são consideradas fatores de virulência O isolado CG425 de B bassiana apresenta virulência comprovada contra R schistocercoides A produção de proteases extracelulares, tipo subtilisina (Pr1) e tipo tripsina (Pr2) pelo isolado CG425 foi analisada após crescimento em meio contendo cutícula de R schistocercoides e substrato não cuticular A produção de proteases tipo-Pr1 e tipo-Pr2 foi superior em presença de cutícula, sugerindo que estes tipos proteolíticos são induzidos por componentes cuticulares Os valores superiores de Pr1 em relação a Pr2 sugerem que o sistema de regulação destas enzimas pode ser distinto A regulação da produção de proteases tipo-Pr1 e tipo-Pr2 foi analisada após cultivo do isolado CG425 na presença de diferentes aminoácidos Dos aminoácidos testados, apenas a metionina, que é um aminoácido pouco encontrado na cutícula de algumas espécies de gafanhotos, parece ter papel na expressão destes tipos proteolíticos Transformantes de B bassiana obtidos via transformação por Agrobacterium tumefaciens foram analisados quanto a alterações na conidiação, uma vez que a produção de conídios por fungos entomopatogênicos é uma característica importante no contexto de controle microbiano de pragas Dos 179 transformantes analisados, 14 apresentaram alterações quanto a conidiação, comparativamente ao isolado selvagem Um dos transformantes com tal alteração foi submetido a análise por TAIL-PCR com vistas à identificação e etiquetagem de seqüências de DNA genômico que flanqueiam a região de T-DNA neste transformante

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Palavras-chave

Enzimas proteolíticas, Beauveria bassiana, Pragas agrícolas, Controle biológico, Proteolytic enzymes, Biological control, Agricultural pests

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