Desenvolvimento de um biossensor voltamétrico à base de extrato bruto de lacase, botriosferana e materiais nanoestruturados para aplicações analíticas
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Coelho, João Henrique
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Resumo
Resumo: No presente trabalho, uma nova arquitetura de biossensor utilizando botriosferana e lacase, ambos produzidos a partir do fungo lignolítico Botryosphaeria rhodina MAMB-5 foi descrito A enzima foi imobilizada por adsorção física em botriosferana na superfície do eletrodo de carbono vítreo modificado com nanotubos de carbono de paredes múltiplas O desempenho do novo biossensor foi avaliado pela determinação de dopamina, um típico composto fenólico Parâmetros experimentais como a concentração da enzima, valor de pH e parâmetros instrumentais das técnicas eletroquímicas foram otimizados Utilizando a voltametria de onda quadrada, determinou-se dopamina em uma faixa de concentração de 2,99 – 38,5 µmol L-1, com o limite de detecção de ,127 µmol L-1 O método proposto foi aplicado com sucesso na determinação de dopamina em formulações farmacêuticas e em fluidos biológicos, apresentando uma boa seletividade mesmo na presença de ácido úrico, ácido ascórbico e outros compostos fenólicos, atestando o potencial de aplicação deste biossensor em matrizes complexas Os diferentes aspectos a respeito da estabilidade operacional da lacase foram avaliados, demonstrando boa repetibilidade intra- e inter-dia e estabilidade em relação ao tempo de vida útil, com valores de desvios padrão relativos de 3,6, 4,3 e 8,2 %, respectivamente Além do método direto de determinação, o biossensor proposto pode ser aplicado na determinação indireta de espironolactona, apresentando um limite de detecção de ,94 µmol L-1 Os resultados obtidos na análise da mesma em amostras farmacêuticas comerciais foram satisfatórios quando comparados ao método oficial descrito na Farmacopéia Brasileira, a um nível de confiança de 95% Ademais, o biossensor proposto possui simplicidade de fabricação e pode ser aplicado como uma alternativa viável aos procedimentos utilizando enzimas puras
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Palavras-chave
Biossensores, Polissacarídeos, Enzimas imobilizadas, Biosensors, Polysaccharides, Immobilized enzymes, Chemistry