Alteração neurológica na infecção experimental murina por Candida parapsilosis e caracterização de antígenos solúveis

Página do item simplificado
dataload.collectionmapped01 - Doutorado - Patologia Experimentalpt_BR
dataload.filenamenourau4625.pdfpt_BR
dataload.handlemapped123456789/20pt_BR
dataload.idpergamum171567pt_BR
dataload.idvirtuanourauvtls000196235pt_BR
dataload.idvirtuapergamumvtls000196235pt_BR
dataload.idvirtuapergamum.sameurlnourauSIMpt_BR
dataload.linknourauhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000196235pt_BR
dataload.linknourau.regularSIMpt_BR
dataload.linknourau.retificadohttp://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000196235pt_BR
dataload.linknourau.size64.00pt_BR
dc.contributor.advisorItano, Eiko Nakagawa [Orientador]pt_BR
dc.contributor.authorSilva, Paula Leonello Álvares ept_BR
dc.contributor.bancaHirooka, Elisa Yokopt_BR
dc.contributor.bancaTatibana, Berenice Tomokopt_BR
dc.contributor.bancaWatanabe, Maria Angelica Eharapt_BR
dc.contributor.bancaOno, Mário Augustopt_BR
dc.coverage.spatialLondrinapt_BR
dc.date.accessioned2024-05-01T14:44:46Z
dc.date.available2024-05-01T14:44:46Z
dc.date.created2014.00pt_BR
dc.date.defesa05.06.2014pt_BR
dc.description.abstractResumo: Candida parapsilosis é um importante patógeno associado a infecções sanguíneas mas estudos sobre virulência e patogenicidade são escassos Considerando que estudo evidenciou alteração comportamental em camundongo infectado, avaliou-se efeito imunopatológico no decorrer de infecção sistêmica em camundongos, aliada a caracteriazação parcial de fator hemolítico de C parapsilosis Grupos de camundongo SWISS e BALB/c foram infectados por via endovenosa (1x18 leveduras/animal), sendo o primeiro por 56 dias e o segundo durante 7, 14, 28 e 56 dias, tendo como controle o PBS Foram analisadas: alterações comportamentais determinando-se número de giros/5min, detecção de células de Purkinje por imunofluorescência (anti-calbindin), contagem de células Purkinje por histopatologia, análise de apoptose utilizando anti-ligante de Fas por imunohistoquímica, no cerebelo de camundongos infectados durante 56 dias Determinou-se também antigenemia por CFU e ELISA CAPTURA, níveis de citocinas (INF-?, IL- 4, IL-17 e IL-1), expressão e atividade de indoleamine 2,3 dioxigenase (IDO) no cerebelo de camundongos infectados durante 7, 14, 28 e 56 dias No decorrer de infecção foi avaliada também respostas imune humoral (ELISA), celular (DTH) anti “cell free antigen” (CFA) de C parapsilosis e citocinas circulantes (INF-?, IL- 4, IL-17 e IL-1) Para a caracterização de fator hemolítico, foi avaliada a atividade lítica de eritrócitos de camundongos utilizando CFA na forma nativa e aquecida (56°C, 1 h) e as frações de CFA obtidas por gel filtração (Sephadex G-1/12) e por filtração em Amicon (1k e 5k) Os níveis de carboidratos totais, capacidade de ligação à ConA e de reatividade aos anticorpos específicos (anti-eritrocito autólogo sensibilizado com CFA) foram determinados em frações de gel filtração Além disso, as frações foram analisadas por western blotting, investigada a capacidade de anticorpos neutralizarem a atividade hemolítica e foram determinados os níveis de IgG anti-fração hemolítica em camundongos infectados com C parapsilosis Os resultados demonstraram diminuição de células de Purkinje (p<,5) e correlação significativa entre a diminuição dessas células e o aumento no número de giros (r= 9876) e reação com anti- 12 ligante de Fas foi negativa, no cerebelo Detectou-se aumento significativo em CFU (7 e 14 dias) (p<,5), de todas as citocinas (7 dias) (p<,5) e expressão de IDO (7>14>28 dias) (p<,5) ou de atividade de IDO (7,14 dias) (p<,5) no cerebelo, em relação ao controle Além disso, níveis elevados de anticorpos IgG (p <,5) ou DTH (p <,5) a CFA (p <,5) (28 e 56 dias) e de níveis séricos de citocinas INF-? (7 e 14 dias) (p<,5), IL-1 (56 dias) (p<,5) e IL-17 (56 dias) (p<,5) foram detectados no decorrer de infecção de camundongos Concluímos pelos resultados que as respostas imunes especificas e modulação de citocinas devem participar na diminuição de carga fúngica no cérebro, mas por outro lado devem apresentar efeito imunopatológico, possivelmente com participação de IDO levando a diminuição quantitativa de células Purkinje no cerebelo e como consequência induzindo alteração comportamental dos camundongos infectados, o que requer estudos adicionais Em relação ao fator hemolítico, concluímos que o fungo C parapsilosis apresenta fator hemolítico de alta MM (~ 28kDa e ~ 3kDa), é termoestável e apresenta a capacidade de induzir resposta imune no decorrer de infecção e, se essa resposta específica participa na defesa, requer estudos adicionaispt_BR
dc.description.abstractother1Abstract: Candida parapsilosis has emerged as an important pathogen of bloodstream infections and studies on the virulence and experimental pathogenicity concerning this species are few In our previous study it was observed behavioral change in C parapsilosis infected mice The objective of this study was to evaluate immunopathological effect on the course of systemic mice infection and partially characterize C parapsilosis hemolytic factor Groups of SWISS and BALB/c mice were infected intravenously (1x18 yeast), the first for 56 days and second for 7, 14, 28 and 56 days and as a control only PBS in both groups It were analyzed: behavioral changes by determining the number of turns/5min, Purkinje cells detection by immunofluorescence (anti-calbindin), quantitative Purkinje cells determination by histopathology, apoptosis with anti-Fas ligand by immunohistochemistry in the mice cerebellum infected for 56 days Fungi CFU and CAPTURE ELISA, cytokines (IFN-?, IL-4, IL-17 and IL-1), indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) expression (qRT-PCR) and activity (kynurenine) were evaluated in the cerebellum of mice infected for 7, 14, 28 and 56 days Also humoral immune responses (ELISA), cellular (DTH) to "cell free antigen" (CFA) from C parapsilosis and circulating cytokines (INF-?, IL-4, IL-17 and IL-1) levels were assessed during the course of infection For hemolytic factor characterization it was evaluated mice erythrocytes lysis by using native form and heated (56 ° C, 1 h) CFA and fractions CFA obtained by gel filtration (Sephadex G-1/12) and Amicon filtration (1k and 5k) The total carbohydrates levels, ConA binding capacity and reactivity with specific antibodies (immunization with autologous erythrocyte sensitized with anti-CFA) were determined in gel filtration fractions In addition, components recognized by western blotting, the antibodies inhibitory ability and IgG anti-hemolytic fraction levels in infected were evaluated The results showed a reduction in number of Purkinje cells (p<5), correlation between the decrease of these cells and the increase in the number of turns (r = 9876) and no reactivity with anti-Fas ligand in cerebellum In the course of infection a significant increase in CFU (7 and 14 days) (p <5), all cytokines (7 days) (p <5) and expression (7> 14> 28 days) or activity of IDO 14 (7,14 days) were resulted in the cerebellum of infected, in relation to control Also higher levels of antibody IgG (p <5) or DTH(p <5) to CFA and serum INF-? (7 and 14 days) (p <5), IL-1 (56 days) (p <5) and IL-17 (56 days) (p <5) were detected in the course of mice infection By the results of experimental immunopathological effect in a systemic C parapsilosis mice infection study, we conclude that the specific immune responses and modulation of cytokines induced should participate in the reduction of fungal burden in the brain, but on the other hand must display pathological effect, with possible involvement of IDO in quantitative decrease of Purkinje cells in the cerebellum and consequently inducing behavioral changes of infected mice, which requires further study In relation to hemolytic factor, we conclude that the fungus C parapsilosis has hemolytic factor with high MM (~ 28kDa and ~ 3kDa) which is thermostable and has the ability to induce immune response during infection and if this specific response participates in the defense, requires additional studiespt_BR
dc.description.notesTese (Doutorado em Patologia Experimental) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Patologia Experimentalpt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/15072
dc.languagepor
dc.relation.coursedegreeDoutoradopt_BR
dc.relation.coursenamePatologia Experimentalpt_BR
dc.relation.departamentCentro de Ciências Biológicaspt_BR
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-Graduação em Patologia Experimentalpt_BR
dc.subjectComportamentopt_BR
dc.subjectAlteraçãopt_BR
dc.subjectCerebelopt_BR
dc.subjectCitocinaspt_BR
dc.subjectVirulência (Microbiologia)pt_BR
dc.subjectCerebellumpt_BR
dc.subjectCytokinespt_BR
dc.subjectVirulence (Microbiology)pt_BR
dc.subjectMycosespt_BR
dc.subjectMice as laboratory animalspt_BR
dc.titleAlteração neurológica na infecção experimental murina por Candida parapsilosis e caracterização de antígenos solúveispt_BR
dc.typeTesept_BR

Arquivos

Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Imagem de Miniatura
Nome:
4625.pdf
Tamanho:
1.39 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Baixar

Coleções

01 - Doutorado - Patologia Experimental