Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular

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dc.contributor.advisorVidotto, Odilon [Orientador]pt_BR
dc.contributor.authorMartins, Guilherme Felippellipt_BR
dc.contributor.bancaGarcia, João Luispt_BR
dc.contributor.bancaGuimarães Junior, José da Silvapt_BR
dc.contributor.bancaBogado, Alexey L. G.pt_BR
dc.contributor.bancaPereira, Ademir Benedito da Luzpt_BR
dc.coverage.spatialLondrinapt_BR
dc.date.accessioned2024-05-01T14:49:25Z
dc.date.available2024-05-01T14:49:25Z
dc.date.created2015.00pt_BR
dc.date.defesa10.04.2015pt_BR
dc.description.abstractResumo: A coccidiose aviária é uma doença parasitária causada por protozoários do Filo Apicomplexa, do gênero Eimeria Diversos antígenos recombinantes vem sendo testados em vacinas sob condições experimentais apresentando resultados promissores A HSP7 é uma proteína que apresenta múltiplas funções em diversas fases do ciclo de vida deste parasito sendo considerada por diversos autores como promissora para utilização como imunógeno devido ao seu potencial imunogênico Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo produzir a proteína recombinante rHSP7 de E tenella, e avaliar a sua proteção contra desafio homólogo em frangos de corte O segmento de DNA, da proteína HSP7 foi obtido pela técnica de PCR utilizando primers específicos para o gene total Estes segmentos foram incorporados ao vetor de expressão de proteínas pTrcHis2 (Invitrogen) para produção dos plasmídeos recombinantes e posteriormente inseridos em E coli TOP1 competente quimicamente para obtenção e purificação das proteínas recombinantes Foram utilizadas 8 aves, não vacinadas contra coccidiose, distribuídas em quatro tratamentos: G1 - rHSP7 mais toxina colérica (n=2); G2 – soro albumina bovina e toxina colérica (n=2), G3 – somente PBS (controle positivo, n=2) e G4 - somente PBS (controle negativo, n=2) Os tratamentos foram executados por via ocular aos dias 7 e 14 do experimento No dia 21, todos os tratamentos foram desafiados com 5x14 oocistos esporulados de E tenella Foram avaliados o ganho de peso, conversão alimentar, eliminação de oocistos, fecundidade e anticorpos anti-rHSP7 A expressão do gene hsp7 permitiu a produção de uma proteína rHSP7 de aproximadamente 23kDa Quanto ao ganho de peso G1 apresentou um aumento de 2,7% em relação a G4, enquanto G3 apresentou redução de 2,22% neste parâmetro A titulação de anticorpos demonstrou uma intensa resposta humoral em G1 no pós-desafio Apesar da maior eliminação de oocistos em G1, não foram observadas diferenças estatísticas significantes entre os grupos desafiados (p=,162) Da mesma forma não foi observado diferença estatística entre os grupos desafiados no quesito escore de lesão (p=,137) Os tratamentos não promoveram a melhora nos parâmetros estudados à exceção dos níveis de anticorpos que mostraram altos títulos pós desafio, sugerindo tal proteína como promotora da imunidade humoralpt_BR
dc.description.abstractother1Abstract: Avian coccidiosis is a parasitic disease caused by protozoa of the Phylum Apicomplexa, genus Eimeria Several recombinant antigens in vaccines are being tested under experimental conditions shown promising results HSP7 is a protein that has the multiple functions at various stages of the life cycle of this parasite is considered by many authors as promising for use as an immunogen because of its immunogenic potential Thus, this study aimed to produce the recombinant protein of E tenella rHSP7, and assess their protection against homologous challenge in broilers The DNA segment, HSP7 protein was obtained by PCR using primers specific for the full gene These segments were incorporated into pTrcHis2 protein expression vector (Invitrogen) for production of recombinant plasmids and then inserted into E coli TOP1 chemically competent for collection and purification of recombinant proteins We used 8 birds not vaccinated against coccidiosis, distributed in four treatments: G1 - rHSP7 more cholera toxin (n = 2); G2 - bovine serum albumin, and cholera toxin (n = 2), G3 - PBS only (positive control, n = 2) and G4 - PBS only (negative control, n = 2) The treatments were performed by ocular route at days 7 and 14 of the experiment On day 21, all treatments were challenged with 5x14 sporulated oocysts of E tenella We evaluated weight gain, feed conversion, elimination of oocysts, fertility and anti-rHSP7 antibodies The expression of the hsp7 gene allowed the production of a protein of approximately 23kDa rHSP7 As for the weight gain G1 increased by 27% compared to G4, while G3 declined by 222% in this parameter The antibody titration showed a strong humoral response G1 post-challenge Despite the increased elimination of oocysts in G1, there were no statistically significant differences between the challenged groups (p=,162) Similarly was not statistical difference between the challenged groups in the item injury score (p=,137) The treatments did not promote the improvement in the parameters studied except for levels of antibodies that showed high post-competition titles, suggesting this protein as a promoter of humoral immunitypt_BR
dc.description.notesTese (Doutorado em Ciência Animal) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animalpt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/15460
dc.languagepor
dc.relation.coursedegreeDoutoradopt_BR
dc.relation.coursenameCiência Animalpt_BR
dc.relation.departamentCentro de Ciências Agráriaspt_BR
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-graduação em Ciência Animalpt_BR
dc.subjectCoccidiose em avept_BR
dc.subjectFrango de cortept_BR
dc.subjectDoençaspt_BR
dc.subjectEimeriapt_BR
dc.subjectFrango de cortept_BR
dc.subjectDiseasespt_BR
dc.subjectImmunologypt_BR
dc.subjectVeterinary vaccinespt_BR
dc.subjectBroilers (Poultry)pt_BR
dc.titleAvaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocularpt_BR
dc.typeTesept_BR

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