Lactobacillus plantarum modulates intestinal toxicity : an ex vivo approach
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Resumo: Antimicrobianos têm sido amplamente utilizados na dieta de leitões para promover o crescimento e reduzir a incidência de diarreia A resistência dos patógenos aos antimicrobianos e a possibilidade de resíduos nos produtos de origem animal aumentaram o interesse em alternativas de additivos nas dietas As bactérias ácido lácticas (LAB) são uma alternativa potencial ao uso de antibióticos O desoxinivalenol (DON) é um metabólito secundário da família dos tricotecenos produzido pelo Fusarium graminearum e F culmorum que afeta a saúde animal e humana A deterioração de alimentos devido à contaminação por fungos e produção concomitante de micotoxinas é um problema crescente, particularmente quando se considera a possibilidade dos fungos adquirirem resistência a conservantes químicos comumente usados Portanto, métodos eficazes de detoxificação são estratégias úteis para minimizar esses riscos A biotransformação de micotoxinas por LAB é uma forma promissora de reduzir os efeitos deletérios destas toxinas O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos de duas cepas de Lactobacillus plantarum (LP) inativadas por calor e seus sobrenadantes de cultura (SC) isoladas ou associadas ao DON em explantes de jejuno de suínos As LAB foram inativadas por esterilização (121°C por 3 min) e posteriormente as suspensões (1,1 x 18 e 2, x 19 CFU ml-1 de LAB para a cepa 1 e cepa 2, respectivamente) foram centrifugadas (3 g, 1 min, 5°C) Os pellets resultantes (LP1 e LP2) e os sobrenadantes (CS1 e CS2) foram separados e armazenados a -2 °C até sua utilização Os explantes foram incubados a 37°C durante 4 horas sob agitação orbital com os seguintes tratamentos: meio de cultura DMEM (controle), MRS, LP1+DMEM, LP2+DMEM, CS1+DMEM, CS2+DMEM, DON (1 µM), DON+LP1, DON+LP2, DON+CS1 e DON+CS2 Após a incubação, os explantes foram processados para análise histológica, morfométrica e ultraestrutural Os explantes controle apresentaram atrofia leve das vilosidades e edema da lâmina própria, enquanto que os explantes expostos a LP1, LP2, LP1+DON e LP2+DON apresentaram atrofia difusa das vilosidades, necrose apical e achatamento dos enterócitos As principais alterações nos explantes tratados com CS1, CS2, CS1+DON e CS2+DON foram atrofia leve das vilosidades e necrose apical leve dos enterócitos A análise morfométrica mostrou um aumento significativo na altura das vilosidades nos explantes tratados com o sobrenadante da cultura de L plantarum individualmente ou combinado com DON em comparação com o grupo DON e com ambas as cepas das bactérias A avaliação ultraestructural demonstrou vilosidades do grupo controle bem delineadas com alguns leucócitos na superfície dos enterócitos Os explantes tratados com DON mostraram uma atrofia severa das vilosidades acompanhada de um elevado número de leucócitos e restos celulares na superfície intestinal Os explantes tratados com LP+DON mostraram atrofia moderada de vilosidade com necrose apical multifocal Os explantes expostos aos sobrenadantes de ambas as cepas, individualmente ou associados ao DON apresentaram vilosidades bem delineadas e com deposição de muco na superfície A capacidade antioxidante do L plantarum e dos sobrenadantes foi avaliada por meio das técnicas ABTS e FRAP O tratamento com CS2 induziu um aumento significativo na resposta antioxidante em comparação ao grupo tratado com DON Em conclusão, os sobrenadantes de L plantarum apresentaram efeitos benéficos nos explantes intestinais expostos ao DON caracterizados por incremento na morfologia intestinal e na capacidade antioxidante
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Palavras-chave
Toxicologia veterinária, Micotoxicoses em animais, Lactobacillus plantarum, Bactérias produtoras de ácido láctico, Jejuno, Veterinary toxicology, Mycotoxicoses in animals, Lactic acid bacteria, Jejunum