Desenvolvimento de formulação para utilização como veículo líquido inoculante visando a alta produção de endósporos de Bacillus velezensis ZK
Data
2025-09-05
Autores
Volponi, Jessica Naiara Gomes
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Resumo
A utilização de inoculantes em culturas agrícolas e florestais tem se mostrado uma prática eficiente para melhorar o desempenho agronômico e auxiliar em processos como o reflorestamento. Entre os microrganismos de interesse, o gênero Bacillus destaca-se por ser composto por bactérias Gram-positivas, aeróbicas e formadoras de endósporos, apresentando elevada tolerância às condições ambientais adversas. Essas características conferem a várias espécies do gênero importância significativa em aplicações biotecnológicas. Neste estudo, foram desenvolvidos veículos líquidos de inoculantes com o objetivo de avaliar a sobrevivência da estirpe Bacillus velezensis ZK ao longo do tempo. Para a formulação dos veículos, foram utilizadas diferentes concentrações de sacarose, extrato de levedura e extrato de malte. Cada veículo recebeu uma concentração inicial de inóculo de 1,0 x 104 UFC/mL. Foram elaborados 13 diferentes veículos líquidos e incubados sob agitação orbital (200 rpm) a 27 °C por até 120 horas. Após o período de incubação, alíquotas das culturas foram submetidas a diluições seriadas, precedidas por tratamento térmico a 80 °C por 10 minutos, com o objetivo de eliminar células vegetativas e selecionar apenas os endósporos viáveis de Bacillus velezensis ZK. Em seguida, volumes de 50 µL das diluições entre 10⁻⁴ e 10⁻⁶ foram inoculadas em placas com meio TSA (Tryptic Soy Agar) e incubados a 30 ± 2 °C por 24 horas para a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC). Entre as formulações testadas, os veículos BV5 e BV8 apresentaram os menores e maiores valores de produção de endósporos, com contagens de 9,20 x 107 UFC/mL e 8,69 x 108 UFC/mL, respectivamente, ambos utilizando sacarose como fonte de carbono. Com base nesses resultados, foi aplicada a metodologia de Superfície de Resposta (RSM) com três variáveis independentes: concentração de sacarose (x1), extrato de levedura (x2) e extrato de malte (x3), visando à otimização das formulações e para a máxima produção de endósporos. Assim, para melhor desempenho a formulação deve conter 2,2g L-1 de sacarose e 0,1g L-1 de extrato de levedura, excluindo extrato de malte o qual não houve efeito significativo na formulação
Descrição
Palavras-chave
Bacillus velezensis, Endósporos, Sacarose, Formulações, Bactérias formadoras de endósporo, Esporos bacterianos