Caracterização fenotípica e molecular de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa produtores de metalo-beta-lactamases

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dc.contributor.advisorPelayo, Jacinta Sanchez [Orientador]pt_BR
dc.contributor.authorCarrara-Marroni, Floristher Elainept_BR
dc.contributor.bancaGarcia, Lourdes Botelhopt_BR
dc.contributor.bancaVenâncio, Emerson Josépt_BR
dc.contributor.bancaNóbrega, Gisele Maria Andrade dept_BR
dc.contributor.bancaOgatta, Sueli Fumie Yamadapt_BR
dc.contributor.coadvisorTognim, Maria Cristina Bronharo [Coorientadora]pt_BR
dc.coverage.spatialLondrinapt_BR
dc.date.accessioned2024-05-01T11:34:36Z
dc.date.available2024-05-01T11:34:36Z
dc.date.created2009.00pt_BR
dc.date.defesa16.12.2009pt_BR
dc.description.abstractResumo: A produção de metalo-beta-lactamases (MßL) é um importante mecanismo de resistência aos carbapenêmicos detectado com aumentada freqüência entre isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa recuperados no Brasil Este estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o perfil de sensibilidade aos antimicrobianos, pesquisar a ocorrência de MßL e caracterizar fenotipicamente e genotipicamente isolados de Pseudomonas aeruginosa recuperados de pacientes internados ou atendidos no Hospital Universitário de Londrina e no Ambulatório do Hospital das Clínicas Um total de 24 isolados de P aeruginosa, coletados consecutivamente durante o período de março de 23 a março de 25, foram avaliados Destes, 141 isolados que não apresentaram sensibilidade à ceftazidima e/ou aos carbapenêmicos foram selecionados para a pesquisa de MßLs e detecção por PCR de genes codificadores destas enzimas Uma alta taxa de resistência aos antimicrobianos foi verificada entre as P aeruginosa estudadas sendo que somente as polimixinas mostraram atividade contra 1% dos isolados Quarenta e sete isolados foram produtores de MßL e os genes blaSPM-1 e blaIMP-16 foram encontrados em 45 e 2 isolados, respectivamente Os isolados produtores de SPM-1 foram agrupados em 11 clones com diferentes perfis de multirresistência aos antimicrobianos As cepas de P aeruginosa pertencentes ao clone A apresentaram relação genética com o clone epidêmico brasileiro produtor de SPM-1, denominado SP, e a disseminação deste clone foi verificada em diferentes setores do HU Os isolados produtores de SPM-1 foram recuperados com maior freqüência entre pacientes internados na Enfermaria Masculina e nas UTIs do HU, sugerindo um importante papel destes setores na disseminação e manutenção de cepas produtoras de MßLs neste hospital Os isolados Pa3 e Pa43, produtores de IMP-16, não apresentaram resistência aos carbapenêmicos e foram agrupados em um clone distinto O seqüenciamento dos isolados Pa3 e Pa43 mostrou a presença do gene blaIMP-16 como um único cassete gênico localizado em um novo integron da classe 1 O gene cassete blaIMP-16 foi precedido por um promotor Pc fraco e por um outro promotor P2 inativo Este gene está localizado num plasmídeo de 6Kb nos dois isolados produtores de IMP-16 Os isolados Pa3 e Pa43 apresentaram níveis transcricionais de oprD e de ampC similares aos da cepa de referência Pa1 indicando que, provavelmente, estes isolados apresentam uma expressão normal da porina OprD e produzem quantidades basais da enzima AmpC Uma hiperexpressão dos sistemas de efluxo MexAB-OprM, MexCD-OprJ e MexXY foi verificada em ambos isolados produtores de IMP-16 Este estudo relata a primeira detecção do gene blaIMP-16 na região Sul do Brasil e a primeira descrição de isolados clínicos de P aeruginosa produtores de IMP-16 não resistentes aos carbapenêmicospt_BR
dc.description.abstractother1Abstract: Metallo-ß-lactamases (MßL) production is an important mechanism of carbapenem resistance among clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa that is becoming more frequently observed in Brazil This study was designed to evaluate the antimicrobial susceptibility profile, MßL occurrence and the phenothypic and genotypic traits of Pseudomonas aeruginosa clinical isolates recovered from inpatients and outpatients, treated at Hospital Universitário de Londrina and Ambulatório do Hospital das Clínicas Initially, a total of 24 isolates consecutively collected from March 23 to March 25 were evaluated and 141 isolates non-susceptible to ceftazidime and/or carbapenems were selected to detect MßL production and the presence of MßL genes A high rate of antimicrobial resistance was found and only polymyxins showed 1% activity against the P aeruginosa isolates evaluated A total of 47 isolates were MßL-producers and the blaSPM-1 and blaIMP-16 genes were detected in 45 and 2 isolates, respectively SPM-1 isolates comprised 11 clones with different multidrug-resistant profiles The SPM-1-producing P aeruginosa strains of clone A showed close genetic relatedness to the Brazilian epidemic SPM-1 strain termed SP clone and the dissemination this clone was verified in different wards in HU The SPM-1-producing isolates were mainly recovered from patients hospitalized in the male patients’ ward and ICUs, suggesting an important role of these areas in the nosocomial dissemination and maintenance of MßL-producing strains in this hospital The two IMP-16-producing isolates were clustered in a distinct clone and no exhibited resistance to carbapenems Sequencing revealed that both isolates carried the blaIMP-16 genes as a single cassete in a novel class-1 integron The blaIMP-16 gene cassete were preceded by a weak Pc promotor and an inactive P2 promoter This gene was carried on a 6Kb plasmid in both IMP-16- producing isolates Pa 3 and Pa 43 showed transcriptional levels of oprD and ampC similar to that PA1 reference strain, probably indicating normal expression of the porin OprD and basal production of ampC enzyme A hiperexpression of the efflux systems MexAB-OprM, MexCD-OprJ and MexXY were verified in both IMP-16-producers This study report the first detection of blaIMP-16 gene in the Southern Brazil and the first description of IMP-16-producing P aeruginosa isolates non-resistant to carbapenemspt_BR
dc.description.notesTese (Doutorado em Microbiologia) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Microbiologiapt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/8551
dc.languagepor
dc.relation.coursedegreeDoutoradopt_BR
dc.relation.coursenameMicrobiologiapt_BR
dc.relation.departamentCentro de Ciências Biológicaspt_BR
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-Graduação em Microbiologiapt_BR
dc.subjectPseudomonas aeruginosapt_BR
dc.subjectInfecções por bactérias gram-negativaspt_BR
dc.subjectAntibióticos beta-lactâmicospt_BR
dc.subjectMicrobiologiapt_BR
dc.subjectGram-negative bacterial infectionspt_BR
dc.subjectBeta-lactam antibioticspt_BR
dc.titleCaracterização fenotípica e molecular de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa produtores de metalo-beta-lactamasespt_BR
dc.typeTesept_BR

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