Variabilidade genética de Beauveria bassiana e desenvolvimento de Marcador Isolado-Específico
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Ferri, Daniel Vinícius
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Resumo
Resumo: Um dos problemas da cultura da banana é a presença de pragas que limitam a produção e afetam a qualidade dos frutos Dentre as pragas dessa cultura destaca-se o Cosmopolites sordidus (coleóptera Dryophthoridae) A utilização do fungo entomopatogênco Beauveria bassiana como agente de controle biológico de C sordidus pode contribuir para a redução do uso de inseticidas químicos Para o desenvolvimento de produtos a base de B bassiana é importante o conhecimento da variabilidade genética da espécie e a seleção de isolados mais efetivos para ocontrole da praga de interesse Da mesma forma, o desenvolvimeto de marcadores isolados-específicos é de importância para o monitoramento de persistência e comportamento de um isolado em campo O objetivo desta Dissertação foi avaliar a variabilidade genética de B bassiana e desenvolver um marcador isolado-específico para detecção e monitoramento em campo Para tanto, foi realizada a análise de Polimorfismo de DNA Amplificado ao Acaso (RAPD) e análise de Polimorfismo de Comprimento de Fragmentos Amplificados (AFLP) de 42 isolados de Beauveria bassiana, obtidos de diversas regiões geográficas do Brasil e de diferentes hospedeiros da família Dryophthoridae A partir dos fingerprints de DNA gerados pelas técnicas RAPD e AFLP obteve-se, respectivamente 92% e 88% de locos polimórficos Os isolados de B bassiana foram atribuídos a 2 clusters genotípicos quando considerados os dados de RAPD, e 3 clusters genotípicos quando analisados por AFLP O sequenciamento da região ITS1-5,8S-ITS2 do cluster de DNA ribossomal permitiu identificar que os isolados pertencem ao clado A de B bassiana A análise da variância molecular (AMOVA), também realizada separadamente para os dados gerados por RAPD e AFLP, mostrou que a variabilidade entre os isolados não está correlacionada com a origem geográfica ou com os hospedeiros Um marcador de RAPD específico para o isolado CG 124 foi clonado e sequenciado A partir das sequências obtidas foram desenhados primers PCR específicos 124F838 (5’TGC GGC TGA GGA GGA CT 3’) e 124R838 (5’ TGC GGC TGA GTG TAG AAC 3’), para detecção e monitoramento do referido isolado em campo
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Palavras-chave
Beauveria bassiana, Fungos, Genética, Fungos, Controle biológico, Genetics, Biological control, Banana root bover, Fungi