Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis

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dc.contributor.advisorItano, Eiko Nakagawa [Orientador]pt_BR
dc.contributor.authorGerez, Juliana Rubirapt_BR
dc.contributor.bancaNakamura, Celso Vatarupt_BR
dc.contributor.bancaVenâncio, Emerson Josépt_BR
dc.coverage.spatialLondrinapt_BR
dc.date.accessioned2024-05-01T13:09:45Z
dc.date.available2024-05-01T13:09:45Z
dc.date.created2007.00pt_BR
dc.date.defesa06.05.2007pt_BR
dc.description.abstractResumo: Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis que libera diversos componentes imunogênicos, dentre eles o de alta massa molecular (hMM) O objetivo desse trabalho foi obter a sub-fração do componente de alta massa molecular por digestão com tripsina, assim como avaliar a resposta imune humoral a este componente na paracoccidioidomicose experimental Inicialmente a fração hMM (~38KDa) foi obtida por cromatografia em Coluna de Sephadex G - 2 e a seguir tratada com tripsina por 6', 12', 15' a 37ºC e re-analisada por Cromatografia em Coluna de Sephadex G 1 A sub - fração F17 -II selecionada foi analisada por SDS - PAGE e utilizada na imunização de camundongos BALB/c A seguir foi analisado o nível de IgG anti-gp43 , anti-hMM e gp43 solúvel nos grupos experimentais de camundongos normal, imunizado, imunizado/infectado e infectado utilizando ELISA indireto e ELISA de captura Os resultados obtidos demonstraram nível significativo de IgG anti - sub-fração F17 -II 28 e 56 dias pós imunização No entanto não houve diferença significativa no nível de IgG anti-sub-fração F17 -II entre o grupo imunizado/infectado e infectado Foi observado nível elevado de IgG anti - gp43 ou anti - hMM nos animais infectados em relação ao controle mas não entre infectados e imunizados/infectados Concluímos pelo trabalho que a fração hMM de P brasiliensis apresenta suscetibilidade à ação da enzima tripsina, podendo gerar dois fragmentos de massa molecular distintas em função do tempo de incubação A F17-II resultante da digestão com tripsina apresenta massa molecular similar a gp43 e não é capaz de potencializar a resposta imune humoral na PCM experimental em camundongos por processo de imunizaçãopt_BR
dc.description.abstractother1Abstract: Paracoccidioides brasiliensis (Pb), the etiologic agent of a systemic mycosis, produces high molecular mass (hMM) antigens The objective of this investigation was to obtain the sub - fraction from hMM antigens by trypsin digestion, as well as evaluate the humoral immune response to this component in the murine experimental PCM The hMM fraction (~38KDa) was obtained by Sephadex G-2 cromatography and digested with trypsin at 37ºC during 6, 12, 15 min followed by cromatography on Sephadex G-1 Two fractions were obtained and the selected sub-fraction (F17-II) was analyzed by SDS-PAGE Groups of BALB/c mice were immunized with F17-II and the levels of IgG anti- F17-II were analyzed in serum samples from 28 and 56 days post-immunization by ELISA Additionally, groups of mice immunized/infected (iv) with 1 x 16 yeast cells (Pb18) and as controls only infected or inoculated with adjuvant or with PBS were used After 56 days post-infection the levels of IgG anti-gp43, IgG anti-hMM and soluble gp43 were analyzed by indiret and capture ELISA A significant high level of IgG to F17-II (p<1) was observed in 28 and 56 days post-immunization The analysis of serum IgG anti- gp43, IgG anti-hMM and soluble gp43 demonstrated a higher level in the group of infected animals in relation to the control but not among immunized/infected and infected groups In conclusion, the hMM antigen is susceptible to trypsin and at least two digestion products, one with MM ~ 43 kDa (F17-II) can be obtained Also this sub-fraction F17-II doesn't present the capacity to increase the humoral immune response in murine PCMpt_BR
dc.description.notesDissertação (Mestrado em Patologia Experimental) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Patologia Experimentalpt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/11060
dc.languagepor
dc.relation.coursedegreeMestradopt_BR
dc.relation.coursenamePatologia Experimentalpt_BR
dc.relation.departamentCentro de Ciências Biológicaspt_BR
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-Graduação em Patologia Experimentalpt_BR
dc.subjectParacoccidioides brasiliensispt_BR
dc.subjectParacoccidioidomicosept_BR
dc.subjectTripsinapt_BR
dc.subjectResposta imunept_BR
dc.subjectImmune responsept_BR
dc.subjectTrypsinpt_BR
dc.titleResposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensispt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR

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