Imobilização de lipase extracelular de Beauveria bassiana em sílica gel por adsorção física

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dataload.collectionmapped02 - Mestrado - Biotecnologiapt_BR
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dc.contributor.advisorVaréa, Geni da Silva [Orientador]pt_BR
dc.contributor.authorSugahara, Vanessa Hitomipt_BR
dc.contributor.bancaZanin, Gisella Mariapt_BR
dc.contributor.bancaBuzato, João Batistapt_BR
dc.coverage.spatialLondrinapt_BR
dc.date.accessioned2024-05-01T13:53:43Z
dc.date.available2024-05-01T13:53:43Z
dc.date.created2010.00pt_BR
dc.date.defesa19.03.2010pt_BR
dc.description.abstractResumo: Este trabalho teve como objetivo estudar a imobilizacao de lipase produzida pelo fungo entomopatogenico Beauveria bassiana em diferentes carreadores Oito cepas de B bassiana (CG481, CG432, CG71, CG152, Unioeste 4, Unioeste 4, Bbio44 e Bbio61) foram testadas quanto a capacidade produtora de lipase em cultivos submersos em meio de Vogel acrescido de oleo de oliva 1%, ureia 1,5%, CaCl2 ,1% e Triton X-1 ,1%, durante 4 dias, 28oC, 2 rpm O extrato bruto obtido do cultivo de B bassiana CG481 foi ultrafiltrado (membrana 1kDa) e testado para imobilizacao de lipase em treze diferentes tratamentos: adsorcao em suportes inorganicos (Al2O3, CaCO3, CaSO42H2O, celite 545, silica gel), ligacao iônica (Amberlite MB-1 e Dowex com e sem tratamento com metanol), ligacao covalente com glutaraldeido (Amberlite MB-1 e Dowex) e aprisionamento em gel (alginato e alginato/gelatina) Silica gel foi selecionado como melhor suporte exibindo 94,8% de rendimento Lipase de B bassiana adsorvida em silica gel (ILS) manteve as condicoes ótimas de atividade da enzima livre (FL) (pH 8,5 e temperatura de 45°C), porem, ILS apresentou melhora da atividade lipolitica em valores elevados de pH (9,-1,5) e temperatura (6°C) Alem disso, ILS mostrou aumento da estabilidade quando incubada em pH 7, por 12 h, com retencao de 69,% da atividade inicial, enquanto FL exibiu apenas 33,3% A estabilidade termica de FL e ILS foi avaliada na faixa de 3 a 6°C por 1 hora em meio aquoso e em solvente organico (somente ILS) A 6oC, ILS exibiu aumento da estabilidade termica tanto em meio aquoso (tampao Tris-HCl) (retencao de 64,6% de atividade residual) como em meio organico (n-heptano) (95,1%) Ja FL manteve apenas 4,6% da atividade inicial em meio aquoso e nao exibiu atividade em meio organico mesmo sem tratamento termico O tratamento de ILS com NaCl ,8 M preveniu a dessorcao de lipase enquanto Triton X-1 ,1% facilitou sua liberacao para o meio ILS foi reutilizada por quatro ciclos de esterificacao, com duracao de 24 h cada, com manutencao de 8,8% da atividade inicial O estudo envolvendo a imobilizacao de lipase produzidas por B bassiana e inedito e os resultados obtidos abrem novas perspectivas para o emprego deste biocatalisador em processos biotecnologicos, inclusive em sistemas contendo solventes organicos como meio reacionalpt_BR
dc.description.abstractother1Abstract: This work aimed to study the immobilization of lipase produced by the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana on different carriers Eight strains of B bassiana (CG481, CG432, CG71, CG152, Unioeste 4, Unioeste 4, Bbio44 and Bbio61) were tested for their ability to produce lipase in submerged cultures in Vogel salt broth added by 1% olive oil, 15% urea, 1% CaCl2 and 1% Triton X-1 during 4 days, 28oC, 2 rpm The crude extract obtained from the Beauveria bassiana CG481 was ultrafiltered (1kDa membrane) and tested for lipase immobilization in thirteen different treatments: adsorption on inorganic supports (Al2O3, CaCO3, CaSO42H2O, celite 545, silica gel), ionic binding (Amberlite MB-1 and Dowex with and without treatment with methanol), covalent binding (Amberlite MB-1 and Dowex) and gel entrapment (alginate and alginate/gelatin) Silica gel was selected as the best support displaying 948% of activity yield B bassiana lipase adsorbed on silica gel (ILS) maintained the optimum conditions of activity of free lipase (FL) (pH 85 and temperature of 45 °C) However, ILS improved the lipolytic activity in higher values of pH (9-15) and temperature (6°C) In addition, ILS has shown increased stability when incubated at pH 7 for 12 h, with retention of 69% of initial activity, while FL showed only 333% The thermal stability of FL and ILS was evaluated at the range of 3 to 6° C for 1 hour in aqueous medium and organic solvents (only for ILS) At 6oC, ILS exhibited increased thermal stability both in aqueous (TRIS-HCl) (646% residual activity) and in organic liquids (n-heptane) (951%) FL remained only 46% of initial activity in aqueous medium and exhibited no activity in organic medium The treatment of ILS with 8 M NaCl prevented desorption of lipase while 1% Triton X-1 facilitated their release to the reaction environment ILS was reused for four cycles of esterification reaction (24 h incubation each) and maintenance 88% of initial activity The study involving the immobilization of B bassiana lipase is unpublished and these results open new perspectives for the use of this biocatalyst in biotechnological processes, including systems containing organic solvents as reaction mediapt_BR
dc.description.notesDissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Exatas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologiapt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/12403
dc.languagepor
dc.relation.coursedegreeMestradopt_BR
dc.relation.coursenameBiotecnologiapt_BR
dc.relation.departamentCentro de Ciências Exataspt_BR
dc.relation.ppgnamePrograma de Pós-graduação em Biotecnologiapt_BR
dc.subjectLipasept_BR
dc.subjectFungospt_BR
dc.subjectBiotecnologiapt_BR
dc.subjectSílica gelpt_BR
dc.subjectBeauveria bassianapt_BR
dc.subjectLipasept_BR
dc.subjectFungipt_BR
dc.subjectSilica gelpt_BR
dc.subjectBiotechnologypt_BR
dc.titleImobilização de lipase extracelular de Beauveria bassiana em sílica gel por adsorção físicapt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR

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