02 - Mestrado Profissional - Clínicas Veterinárias

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Navegando 02 - Mestrado Profissional - Clínicas Veterinárias por Autor "Baptista, Ana Angelita Sampaio"

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    Avaliação do efeito antagonista de Lactobacillus spp. frente a isolados de Escherichia coli patogênica aviária
    (2025-02-27) Stevanato, Gabriela Alexandre; Baptista, Ana Angelita Sampaio; Dall Agnol, Alais Maria; Lorenzetti, Elis
    A colibacilose aviária, causada por Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC), representa um desafio significativo para a avicultura, impactando a produtividade e resultando em prejuízos econômicos. O presente estudo teve como objetivo caracterizar o perfil fenotípico de resistência a antimicrobianos, perfil genotípico de virulência, identificar sequence typing, avaliar o efeito antagonista de cepas comerciais de Lactobacillus spp. frente aos isolados de APEC e desenvolver um material complementar educacional sobre colibacilose aviária. Para isso, foram selecionadas 38 isolados de APEC da bacterioteca do Laboratório de Medicina Aviária (LMA) da Universidade Estadual de Londrina (UEL) isoladas de matrizes de frango de corte com quadro de colibacilose. Para tanto foram realizados os testes de sensibilidade aos antimicrobianos, determinação de genes de virulência e identificação dos sequence typing por Polimerase chain reaction (PCR), avaliação do efeito antagonista do pool de Lactobacillus spp. comercial contra os isolados de APEC pela técnica spot on the lawn e elaboração de mapas mentais utilizando a plataforma Canva. Os resultados do teste de sensibilidade aos antimicrobianos demostraram resistência ao ácido nalídixico 29/38 (76,32%), tetraciclina e enrofloxacina 17/38 (44,74%), bem como, ciprofloxacina 13/38 (34,21%), ampicilina 10/38 (26,32%), sulfa+trimetoprim 3/38 (7,89%), seguido por gentamicina, fosfomicina e cloranfenicol apresentaram 1/38 (2,63%). Menor número de isolados 21,05% (8/38) apresentou perfil de resistência a múltiplas drogas (MDR) e todas os isolados eram negativas para ESBL. Observou-se que os isolados apresentaram positividade para os genes de virulência ompT, hlyF e iss 97,36% (37/38), 94,73% (36/38) e 84,21% (32/38) respectivamente. Já para os genes de virulência iutA e iroN, foram observados a presença em 78,94% (30/38) e 81,57% (31/38) dos isolados. No que tange a identificação do perfil de ST, observou-se que 21,05% (8/38) com sendo ST131, 2,63% (1/38) sendo ST23 e 76,32% (29/38) não foi possível determinar. A média dos halos de inibição bacteriana foram de 5,61 mm, e frente a dois isolados (ID: 2953 e 3005) de ST131 foi de 8,5 mm e 8 mm de atividade inibitória. A coletânea de mapas mentais sobre a colibacilose aviária foi utilizada como recurso acessível e funcional contribuindo para tomada de decisão por profissionais da avicultura. Conclui-se que o uso de probióticos foi capaz de inibir APEC com perfil de resistência a antimicrobianos e MDR, assim como atuar frente a possíveis clones de alto risco (ST131) para a produção avícola
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    Efeito antagonista de Lactobacillus spp. frente a Salmonella spp.
    (2025-01-29) Benteo, Ana Carolina Bergamo; Baptista, Ana Angelita Sampaio; Rocha, Sérgio Paulo Dejato da; Oba, Alexandre
    Resumo: A resistência aos antimicrobianos representa uma ameaça a saúde e segurança alimentar, diante isso, uma das alternativas estudadas são os probióticos, microrganismos que podem apresentar efeitos antagonistas frente a patógenos. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antagonista de um pool de Lactobacillus spp. (PL) comercial contendo 11 cepas, frente a diferentes sorovares de Salmonella de origem avícola. Para tanto, isolados de Salmonella spp. oriundos de monitoramento de campo e mantidos na bacterioteca do Laboratório de Medicina Aviaria - LMA/UEL, foram submetidos ao ensaio de antagonismo em agar, os isolados de Salmonella spp. (n = 80) foram testados pela técnica de Spot on the Lawn frente ao PL. Os halos foram mensurados e classificados com presença de inibição com halos > 1mm. Para avaliar a influencia de PL sobre as culturas de Salmonella spp. Foram selecionados 25 isolados de acordo com a prevalência e importância na avicultura, pertencentes a quatro sorovares (S. Minnesota (SM), S. Heidelberg (SH), S. Typhimurium (ST) e S. Infantis (SI)) e submetidas a teste de co-cultura, sendo que as culturas foram incubadas em caldo MRS-MH nos tempos 0, 6, 10 e 24 h, na sequência plaqueadas em agar MacConkey e agar Rogosa para a quantificação bacteriana. Foi observado que todos os isolados de Salmonella spp. apresentaram inibição pelo PL sendo que 75% (60/80) apresentaram halos de inibição até 5,9 mm e 25% (20/80) de 6 a 12mm. No ensaio de cocultura foi possível observar que PL inibiu significativamente o crescimento dos diferentes sorovares de Salmonella spp., apresentando níveis indetectáveis com 10 horas de incubação para SI, SH, SM e ST respectivamente. Conclui-se que o Pool de Lactobacillus comercial apresentou perfil antagonista, com potencial inibição do crescimento de diferentes sorovares de Salmonella spp. de origem avícola
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    Investigação dos pontos críticos de contaminação por salmonella spp. em fábrica de ração de frango de corte
    (2026-02-24) Moura Júnior, Jurandir de; Baptista, Ana Angelita Sampaio; Oba, Alexandre; Carvalho, Rafael
    A produção avícola brasileira ocupa posição estratégica no abastecimento global de proteína animal, porém permanece vulnerável à contaminação por Salmonella spp., patógeno zoonótico dotado de elevada capacidade de adaptação e persistência em ambientes industriais. Em fábricas de ração, esse microrganismo pode ser introduzido por matérias-primas contaminadas e manter-se ao longo do fluxo produtivo, constituindo importante elo epidemiológico na manutenção da infecção na cadeia avícola. Diante desse contexto, este estudo teve como objetivo identificar as fontes de introdução e os pontos críticos associados à ocorrência de Salmonella spp. em uma fábrica de ração para frangos de corte com sistema de expansão térmica, além de caracterizar determinantes fenotípicos e genotípicos relacionados à persistência ambiental. Para tanto, procedeu-se ao isolamento bacteriano a partir de amostras coletadas em diferentes etapas do processo produtivo, incluindo áreas pré-tratamento térmico (APRTT), áreas pós-tratamento térmico (APOTT), sistemas de filtragem e condução de ar, caminhões de transporte e matérias-primas, seguido de identificação e sorotipagem dos isolados. Cepas selecionadas foram submetidas à avaliação da capacidade de formação de biofilme, à análise de tolerância térmica por meio de ensaios in vitro que reproduziram as condições industriais de processamento (82 °C/90 s e 82 °C/90 s + 102 °C/5 s) e à determinação de similaridade genética por eletroforese em campo pulsado (PFGE), visando elucidar relações clonais e possíveis rotas de disseminação. Das 2.062 amostras analisadas, 81 isolados de Salmonella spp. foram recuperados (3,93%), com predominância de Salmonella Senftenberg (38,3%), seguida por S. Idikan (19,7%) e S. Mbandaka (17,2%), configurando perfil sorológico compatível com sorovares frequentemente associados à persistência ambiental. A detecção de 17,2% dos isolados em filtros e condutos de ar evidencia o potencial papel desses sistemas na manutenção e redistribuição do patógeno após o tratamento térmico. Entre os 29 isolados avaliados quanto à formação de biofilme, 82,75% apresentaram produção moderada a forte, sendo que apenas a formação de biofilme forte demonstrou associação estatisticamente significativa com persistência ambiental (p < 0,05), sugerindo que esse fenótipo representa vantagem adaptativa relevante no contexto industrial. Nos ensaios térmicos, o tratamento padrão (peletização) promoveu eliminação de 70,10% dos isolados, enquanto a expansão atingiu 90,8%, indicando redução expressiva da carga bacteriana, porém insuficiente para garantir esterilização completa, o que evidencia a sobrevivência diferencial de cepas mais tolerantes. A análise clonal por PFGE revelou a circulação de perfis geneticamente relacionados entre ingredientes, APRTT, APOTT, resfriadores e caminhões, confirmando a existência de fluxos internos de disseminação e reforçando a hipótese de recontaminação cruzada após o processamento térmico. Em conjunto, os achados demonstram que a dinâmica de Salmonella spp. na fábrica de ração é resultado da interação entre introdução contínua por matérias-primas, pressão seletiva exercida pelo tratamento térmico e persistência ambiental mediada por características adaptativas, como formação de biofilme e tolerância ao calor. A adoção integrada de medidas corretivas direcionadas aos pontos críticos identificados resultou em redução da positividade na área pós-tratamento térmico, evidenciando que estratégias combinadas, envolvendo controle rigoroso de ingredientes, manutenção estrutural e otimização dos sistemas de filtragem e resfriamento, são essenciais para o fortalecimento da segurança sanitária na produção de ração destinada à avicultura.