Monitoramento e caracterização da população epifítica de Pantoea ananatis, agente causal da mancha branca do milho
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Sauer, Aline Vanessa
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Resumo
Resumo: A bactéria Pantoea ananatis, foi descrita recentemente como sendo agente causal da Mancha Branca do Milho Os sintomas caracterizam-se inicialmente por lesões iniciais cloróticas aquosas, que se tornam necróticas de coloração palha Este trabalho teve como objetivo, monitorar a população epifítica da bactéria, sob condições naturais de infestação e caracterizar essas bactérias comparando-as com aquelas presentes nas lesões O antibiótico eritromicina foi usado como marcador de resistência, permitindo o crescimento de P ananatis e inibição das demais bactérias da folha Três híbridos, HS2, DAS657, 2B71 foram utilizados, e a partir de 5 dias pós-semeadura (DAS), coletas semanais foram realizadas na safra verão 28/29 e quinzenais realizadas na safrinha/29 até o surgimento das lesões As folhas foram segmentadas (2,5g de massa fresca) e submetidas a dois processos: 1) Safra verão 28/29: agitação por duas horas a 6 RPM à 28ºC em 1mL de tampão fosfato (pH 7,) + ,1(g/v) peptona bacteriológica; Safrinha/29: agitação por duas horas a 14 RPM à 3oC em 1mL de tampão fosfato (pH 7,) + ,1(g/v) peptona bacteriológica e 2) maceração em 25mL de tampão fosfato (pH 7,) Cerca de ,1 mL de cada tratamento foi plaqueado em meio TSA acrescido de eritromicina (1mg/mL) e em TSA sem antibiótico (controle) As placas foram incubadas a 3ºC por 48 horas até a avaliação das unidades formadoras de colônias Os isolados utilizados na caracterização para nucleação de gelo foram cultivados em meio TSB por 24 horas, à 3ºC e à 6RPM ,1mL da suspensão bacteriana foi acrescida à 1mL de água com temperatura externa abaixo de -1oC e observada a formação de gelo instantânea Os isolados WT 2 e WT11 foram examinados em microscopia eletrônica de transmissão Os resultados permitiram observar uma grande variação no tamanho da população epifítica da bactéria durante o desenvolvimento da planta, indicando que P ananatis possa ficar acumulada em diferentes regiões da planta, sem uma distribuição homogênea A análise de similaridade revelou que os isolados se agruparam em apenas um grupo e através de testes bioquímicos revelou-se que os mesmos eram pertencentes à espécie P ananatis Não foram observadas diferenças entre os isolados de lesão e da superfície epifítica para a atividade de nucleação de gelo Através de microscopia eletrônica de transmissão, demonstrou-se a presença de estruturas semelhantes à vesículas protéicas na membrana externa, sendo provavelmente as responsáveis pela liberação de núcleos de gelo No teste de patogenicidade os isolados foram capazes de causar sintomas em casa de vegetação e em câmaras de microumidade
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Palavras-chave
Milho, Doenças e pragas, Bactérias fitopatogênicas, Bactérias, Efeito da temperatura, Corn, Phytopathogenic bacteria, Diseases and pests