Oliveira, Tereza Cristina Rocha Moreira de [Orientador]Alves, Juliane2024-05-012024-05-012010.00https://repositorio.uel.br/handle/123456789/12763Resumo: O Brasil é o terceiro produtor e o primeiro exportador mundial de carne de frango, sendo o Estado do Paraná o segundo maior produtor brasileiro Salmonella spp e Campylobacter spp são as causas mais frequentes de doenças bacterianas transmitidas por alimentos no mundo e os produtos avícolas apontados como os principais veículos de transmissão para o ser humano O monitoramento dessas bactérias em carne de frango, é fundamental para evitar que barreiras sanitárias possam interferir na comercialização, como também, é essencial para o controle da doença humana Os métodos convencionais de isolamento de Campylobacter e Salmonella em alimentos podem requerer de quatro a dez dias para a conclusão dos resultados Métodos moleculares, como a PCR, têm sido otimizados para detecção, identificação e quantificação dessas bactérias em alimentos, devido à rapidez, especificidade e sensibilidade Embora vários kits comerciais estejam disponíveis, o seu alto custo dificulta o uso nos laboratórios de diagnóstico e controle de qualidade, principalmente em países em desenvolvimento como o Brasil A padronização de um ensaio molecular específico e, principalmente, a detecção simultânea dessas duas bactérias patogênicas vem de encontro à necessidade desses laboratórios O objetivo desse trabalho foi otimizar um ensaio de PCR multiplex (mPCR) para a detecção simultânea de Salmonella spp e Campylobacter spp em carne de frango A mPCR otimizada utilizou o par de iniciadores Styinva-JHO-Right e Styinva-JHO-Left, específico para Salmonella spp, que gerou um amplicon de 119 pares de bases O par de iniciadores específico para Campylobacter spp foi OT1559 e 18-1 gerando um amplicon de 287 pares de bases A especificidade do ensaio mPCR otimizado foi de 1%, testada com culturas puras de diferentes sorovares de Salmonella, C jejuni, C coli e outras espécies bacterianas A reação de mPCR otimizada detectou 12 UFC/mL de Campylobacter spp e 1 UFC/mL de Salmonella spp, após 24 horas de enriquecimento Das 5 amostras de carne de frango analisadas, adquiridas no comércio de Londrina, duas (4%) estavam contaminadas com Salmonella spp e 28 (56%) com Campylobacter spp A presença dessas bactérias foi confirmada pelo método tradicional de cultura A mPCR padronizada neste trabalho é uma alternativa rápida, barata e eficiente para detecção simultânea de Samonella spp e Campylobacter spp em carne de frango, após 24 horas de enriquecimentoReação em cadeia de polimeraseAlimentosMicrobiologiaCarne de aveDoençasPolymerase chain reactionMicrobiologyDiseasesSalmonellaPoultry as food - FoodDissertação