Oliveira, Tereza Cristina Rocha Moreira de [Orientador]Saeki, Erika Kushikawa2024-05-012024-05-012011.00https://repositorio.uel.br/handle/123456789/8346Resumo: Salmonella enterica subespécie enterica sorovares Enteritidis e Typhimurium são importantes agentes causadores de infecções alimentares Métodos de detecção simultânea destes sorovares podem contribuir para a adoção de medidas de prevenção destas doenças A reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção individual ou simultânea (PCRm) dos sorovares Enteritidis e Typhimurium em alimentos já foram padronizados, no entanto, a maioria emprega o gene fliC como alvo para detecção do sorovar Typhimurium A especificidade deste gene é questionável, pois também já foi descrito para S Kentucky Neste contexto, o objetivo desta pesquisa foi desenvolver um novo ensaio PCR multiplex (PCRm) para a detecção e diferenciação simultânea de Salmonella spp, S Enteritidis e S Typhimurium em carne de frango O gene STM4492, que foi utilizado para diferenciar S Typhimurium, nunca havia sido utilizado em ensaio multiplex para diferenciação desses sorovares Os ensaios de PCRm revelaram elevada especificidade para S Typhimurium com capacidade de diferenciá-lo dos 22 sorovares de Salmonella testados, incluindo S Kentucky Os pares de oligonucleotídeos Styinva-JHO-2 (gene invA) e ENT (gene sdf) empregados no ensaio para detecção de Salmonella spp e S Enteritidis mostraram-se também específicos A sensibilidade do ensaio foi de 1% e a especificidade de 94,8% O ensaio foi capaz de detectar 1 a 1 UFC/mL de S Enteritidis e S Typhimurium após 24 horas de enriquecimento não seletivo e extração do DNA com TZ e fervura sem purificação A extração do DNA com TZ e fervura é adequada e, devido a sua simplicidade, pode ser utilizada na rotina laboratorial O ensaio mPCR desenvolvido mostrou ser viável e apresentar sensibilidade satisfatória para a detecção de Salmonella spp e a diferenciação dos sorovares Enteritidis e Typhimurium em carne de frango Dada a importância dos surtos de salmonelose, o ensaio mPCR padronizado pode ser utilizado como ferramenta de triagem rápida em laboratórios de análise de alimentos e como técnica alternativa para a identificação específica dos sorovares Enteritidis e Typhimurium a partir de cepas isoladas pelo método convencionalAlimentosMicrobiologiaSalmoneloseReação em cadeia de polimeraseFrango de corteFoodSalmonellosisPolymerase chain reactionBroilers (Chickens) - Food - ContaminationMicrobiologyAnalysisDissertação